何维明
- 作品数：30 被引量：123H指数：6
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：陕西省科技攻关计划湖北省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 牛病毒性腹泻病毒陕西株的分离与NS_(5b)基因序列测定被引量：5
- 2008年
- 【目的】分离并鉴定陕西省牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)。【方法】采集腹泻犊牛的肠系膜淋巴结,处理后接种于MDBK细胞,盲传,逐日观察是否有细胞病变产生。采用病毒蚀斑技术对病毒克隆纯化后,提取其RNA,进行RT-PCR鉴定。将扩增的NS5b基因克隆入pMD18-T载体中,采用碱裂解法小量提取质粒,并对质粒进行EcoRⅠ和SalⅠ双酶切、SalⅠ单酶切及PCR鉴定,对阳性克隆进行核苷酸序列测定及分析。采用病毒蚀斑试验测定分离毒株的半数组织培养感染量(TCID50)。【结果】盲传4代后细胞出现典型、规律的细胞病变。RT-PCR扩增出预期长度(360 bp)的基因片段,核苷酸序列分析结果表明,所扩增的基因为牛病毒性腹泻黏膜病病毒NS5b基因,其与BVDV VEDEVAC株NS5b基因核苷酸序列有99%同源性。BVDV陕西株的半数组织培养感染量(TCID50)为3.6。【结论】成功分离了牛病毒性腹泻病毒陕西株,为陕西省BVDV的防治提供了理论依据。
- 马秋明王学艳王晶钰何维明
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒RT-PCR细胞病变
- 雏鸵鸟大肠杆菌病的诊治
- 2001年
- 西安市某鸵鸟场出壳后5日龄前后雏鸵鸟发生了一种以严重下痢并伴有大量死亡为特征的传染病,经实验室诊断确诊为大肠杆菌病,现将情况报告如下.
- 姜艳芬何维明王亚娥
- 关键词：雏鸵鸟大肠杆菌病症状剖检变化
- 山羊传染性胸膜肺炎的诊断与防治被引量：4
- 2006年
- 2002年7月,陕西省某羊场先后从外地购回奶山羊准备进行布尔山羊胚胎移植。8月初,部分羊只出现精神沉郁,食欲减退,咳嗽流鼻等症状,8月16日有2只羊死亡。至9月中旬,共有163只羊发病,死亡86只,发病率达58.2%,死亡率达30.7%。根据临床症状、一般抗菌治疗无效、剖检变化和实验室诊断,确诊为山羊传染性胸膜肺炎。用磷酸泰乐菌素原粉治疗病羊83只,共治愈68只,治愈率为81.9%。
- 黄建文马秋明何维明伊岚
- 关键词：山羊传染性胸膜肺炎
- 口服鼠疫F1-V重组融合基因DNA活菌疫苗的构建及免疫原性研究被引量：3
- 2007年
- 目的构建携带鼠疫耶尔森菌F1-V融合基因的重组减毒沙门菌苗,口服免疫Balb/c小鼠检测其免疫原性,为口服鼠疫活载体DNA疫苗研究打下基础。方法将F1-V融合基因克隆到真核表达载体asd-pVAX1,进一步依次将重组质粒转化减毒沙门菌X3730、X4550得到重组沙门菌X4550(asd-pVAX1/F1-V),提取重组质粒转染COS-7细胞并做免疫组化和Western-blot检测F1-V融合蛋白在细胞中的表达。以1×109CFU/只的剂量3次口服免疫Balb/c小鼠,ELISA方法检测血清中抗体水平。结果构建的重组减毒沙门菌转染COS-7细胞后,免疫组化和Western-blot试验证明F1-V融合蛋白在细胞中得到了瞬时表达,ELISA检测到免疫小鼠血清有特异性抗体IgG产生。结论构建的重组沙门菌能运送DNA疫苗到体内并成功释放质粒刺激机体产生特异性免疫应答,为口服鼠疫活载体DNA疫苗的黏膜免疫研究打下了基础。
- 郭习勤焦新安王栋董梅邢丽颜艳何维明王希良
- 关键词：鼠疫耶尔森菌鼠疫DNA疫苗伤寒沙门菌
- 禽流感油乳剂灭活疫苗的研制及应用被引量：19
- 2001年
- 采用分子生物学技术,用陕西省部分地区自然发病鸡群分离鉴定的AIV毒株,按不同的抗原含量研制成AIV的双价油乳剂灭活疫苗进行质量检验和安全试验。结果表明:该灭活疫苗符合兽药生物制品规程的要求;免疫易感鸡后3～5 d出现HI抗体,14 d达1:128以上,21～30 d达到高峰(1:1024),并维持3～6个月(1:256);用同源AIV毒株攻毒,5 d产生保护力,7 d达100%(5/5),保护期为9个月;疫苗4℃保护期暂定12个月。区域性免疫试验,免疫后第14 d抽血检验HI滴定在(1:128)以上。使用安全,效果可靠。
- 黄建文何维明姜艳芬罗文焕刘备战张尧有张迎江
- 关键词：禽流感灭活疫苗油乳剂灭活疫苗
- 禽流感病毒的亚型鉴定及致病力研究被引量：4
- 2002年
- 用已知的 AIV亚型毒株抗原 ,采用血清学分型方法和毒力测定试验 ,鉴定从陕西省不同地区发生 AI鸡群中分离的 A型 AIV的亚型和致病力。结果证明 ,3株 AIV属 H9N2 ( A1 ,A2 ,A4) ;1株属 H1 1 N6( A5)。 4株AIV的鸡胚尿囊液分别感染试验鸡后 ,发病死亡率分别为 37.5 %、2 5 .0 %、37.5 %和 1 2 .5 % ,均为中等毒力以下毒株。
- 何维明姜艳芬黄建文王义民李明全罗文焕张延利
- 关键词：禽流感亚型鉴定致病力禽流感病毒血清学
- 用反向遗传8质粒系统构建流感H1N1重组病毒
- 2007年
- 为了建立用于流感病毒拯救的反向遗传操作系统,用RT-PCR方法扩增得到A型流感病毒流行株A/shanghai/7/99的HA和NA基因,将其克隆到pGEM-T载体上并测序,挑选阳性克隆分别用BsmBⅠ、BsaⅠ酶切,连接到以BsmBⅠ酶切的双向转录/表达载体pAD3000上,获得重组质粒pAD-HA和pAD-NA,分别与含A/PR/8/34流感病毒7个基因的阳性质粒共转染COS-1细胞,拯救了重组病毒R-HA-PR8和R-NA-PR8,说明构建的重组质粒pAD-HA和pAD-NA是正确的,将pAD-HA和pAD-NA与含A/PR/8/34流感病毒6个基因的阳性质粒共转染COS-1细胞,培养48 h后吸取上清液及COS-1细胞,接种10日龄SPF鸡胚,孵育96 h后,收获鸡胚尿囊液进行血凝和血凝抑制试验。结果显示,鸡胚尿囊液中重组病毒H1N1的血凝效价和血凝抑制效价均为29,鸡胚半数感染剂量为10-8.5~10-9。病毒的成功拯救为进一步深入研究流感病毒的基因功能以及流感新型疫苗的研发奠定了基础。
- 颜艳杨鹏辉罗德炎崔萍王希良何维明
- 关键词：流感病毒反向遗传学重组病毒
- 禽流感双乳相灭活疫苗的研究被引量：6
- 2002年
- 用AIVH5N1和H9N2毒株作抗原,采取分步乳化法制成双乳相灭活疫苗。经无菌检验、稳定性和安全性试验,疫苗A和C符合兽用生物药品规程的要求,经免疫效力和保护力测定,疫苗可于免疫后3～5d产生HI抗体,9～14d抗体达高峰值,其中H5N1的HI抗体可达9log2以上,H9N2可达11log2以上,疫苗保护力与常规疫苗相近,但产生保护力的时间明显提早;疫苗在4℃条件下,保存期可达1年,免疫期为6～9个月。
- 黄建文姜艳芬何维明马秋明朱旭东罗文焕刘备战
- 关键词：禽流感保护力
- SARS冠状病毒与动物冠状病毒的分子生物学研究进展被引量：3
- 2005年
- 冠状病毒是一类有囊膜的单股正链RNA病毒,经常引起动物和人群的感染。2003年,全世界多个国家和地区暴发了重症急性呼吸系统综合征,这也使冠状病毒的研究成为病毒学领域中最为关注的问题。文章主要叙述了动物冠状病毒和SARS冠状病毒的分子生物学特性及其最新研究进展。同时,也对SARS冠状病毒和其他冠状病毒的相关性进行了比较分析。
- 赵卓何维明秦鄂德
- 关键词：SARS冠状病毒分子生物学特性
- 布尔山羊流行性淋巴管炎病原诊断及感染途径研究
- 2006年
- 采用微生物学技术,从流行病学、临床诊断、血相及血液生化指标测定、微生物检验及感染途径等方面,对陕西省舍饲布尔山羊良种肉羊罹患流行性淋巴管炎病进行了较详细的研究。结果表明,该病病原为假性皮疽囊球菌(Cryptococcus farciminosus),通过损伤的皮肤粘膜而感染致病。同时提出了综合防治措施。
- 李联正马秋明何维明赵卓郭习勤谢应国王亚萍张迎疆
- 关键词：布尔山羊流行性淋巴管炎病原诊断
