付明
- 作品数：85 被引量：281H指数：8
- 供职机构：中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
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- MTA1基因表达与子宫颈癌细胞侵袭转移的关系被引量：5
- 2011年
- 目的探讨MTA1基因表达与宫颈癌细胞侵袭转移的关系。方法将真核细胞表达载体pcDNA3质粒、MTA1基因表达载体pcDNA3-MTA1质粒、MTA1基因RNA干扰载体pSilencer3．1-MTA1-siRNA质粒稳定转染宫颈癌细胞株CaSki细胞（分别命名为对照组、MTAl组、MTA1-siRNA组），逆转录（RT）-PCR技术和蛋白印迹法检测CaSki细胞中MTA1 mRNA和蛋白的表达，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法及平板集落形成实验检测CaSki细胞的增殖情况，划痕实验、穿膜实验检测CaSki细胞的迁移能力，基质黏附实验检测CaSki细胞的黏附能力，细胞侵袭实验检测CaSki细胞的侵袭能力，流式细胞仪检测CaSki细胞的细胞周期比例。将3组CaSki细胞接种于裸鼠腋下，观察其在裸鼠体内的生长情况。结果MTA1组细胞中MTA1 mRNA和蛋白的表达强度均明显高于对照组，而MTA1-siRNA组细胞中MTA1 mRNA和蛋白的表达强度均明显低于对照组。MTT比色法检测显示，与对照组比较，自第2天起，MTA1组细胞的生长速度加快，而MTA1-siRNA组细胞的生长速度减慢，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；平板集落形成实验显示，对照组、MTA1组、MTA1-siRNA组的克隆数分别为（1334-6）、（1694-10）和（57±5）个，MTAl组明显多于对照组（P〈0．05），而MTA1-siRNA组明显少于对照组（P〈0．05）。划痕实验显示，MTA1组细胞的迁移能力明显增强，而MTA1-siRNA组细胞的迁移能力明显减弱；穿膜实验显示，对照组、MTA1组、MTA1-siRNA组穿膜细胞数分别为（153±17）、（247±38）和（82-4-10）个，MTA1组明显多于对照组（P〈0．05），而MTA1-siRNA组明显少于对照组（P〈0．05）。基质黏附实验显示，孵育90min时，对照组、MTA1组、MTA1-siRNA组细胞的黏附率分别为（69．3±3．6）％、（80．4±5．6）％、（39．2±7．4）％，MTA1组明显高于对照组（P〈0．05），而MTA1-siRNA组明显低于对照�
- 韩肖燕钱海利杨隽钧张雪燕付明梁萧林晨向阳
- 关键词：宫颈肿瘤肿瘤浸润肿瘤转移组蛋白脱乙酰基酶类
- 基因枪介导的neu基因DNA疫苗抗肿瘤作用的实验研究被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨DNA疫苗pWRG neu的皮内免疫 ,对高表达neu基因的小鼠移植瘤生长和转移的抑制作用。方法 向小鼠黑色素瘤B16F10细胞系转染pcDNA neu ,用有限稀释法筛选一株高表达neu基因的细胞株B16F10 neu。在基因枪介导下 ,向C5 7BL/ 6小鼠导入DNA疫苗pWRG neu ,通过观察免疫动物的生存期 ,评价DNA疫苗的抗肿瘤作用。分离免疫动物脾细胞 ,经自体淋巴细胞混合培养实验 ,分析DNA疫苗体内免疫后机体的CTL应答。结果 筛选到一株高表达neu基因的B16F10 neu细胞株 ,转基因过程和外源基因的表达没有改变细胞系的增殖特性。用基因枪轰击 ,进行DNA疫苗pWRG neu皮内免疫 ,对小鼠黑色素瘤B16F10 neu进行预防、治疗和抗转移的实验研究 ,结果表明 ,DNA疫苗的免疫能够明显推迟移植瘤的生长 ,延长小鼠生存期 ,获得明显的抗肿瘤效果。DNA疫苗免疫后可诱导小鼠脾淋巴细胞CTL活性。结论 基因枪介导的DNA疫苗pWRG neu经皮内免疫 ,能够有效的诱导机体的细胞免疫应答 ,预防和治疗小鼠移植瘤的发生 ,并有一定的预防肿瘤肺转移的作用。
- 查园园林晨张叔人梁肖张雪艳付明张自强吴旻
- 关键词：NEU基因DNA疫苗基因枪抗肿瘤作用
- p53重组腺病毒联合增殖细胞核抗原反义寡核苷酸治疗膀胱癌的研究被引量：4
- 2002年
- 目的 探讨重组腺病毒p53(Ad p53)与增殖细胞核抗原反义寡核苷酸 (PCNA ASO)联合应用对膀胱癌的抑瘤效应。方法 用腺病毒将p53 [感染强度 (MOI) 1 0 0 ]导入细胞 ,PCNA ASO(1 .6μmol/L)在脂质体 (Lipofectin)介导下转染细胞 ,通过噻唑蓝比色法 (MTT)、流式细胞术、克隆形成、建立移植瘤模型 ,探讨其体内外抗瘤活性。结果 Ad p53与PCNA ASO联合应用明显抑制膀胱癌胞EJ(89.3 % )和BIU 87(78.6 % )生长 ,细胞克隆形成能力分别下降 74.8%和 67.5 % ,S期比率 (EJ细胞 1 1 .4% ,BIU 87细胞 1 4 .6 % )明显降低 ,细胞生长受阻于G1 期 (EJ细胞 62 .2 % ,BIU 87细胞 56 .8% ) ;联合应用 7d后 ,肿瘤体积较初始分别下降 47.6 %和 36 .4%。结论 Ad p53联合PCNA ASO可抑制膀胱癌细胞体内外生长 。
- 朱朝辉曾甫清鲁功成邢诗安林晨付明张雪艳梁萧吴旻
- 关键词：增殖细胞核抗原反义寡核苷酸膀胱癌
- 重组腺病毒介导反义c-myc基因对人肝癌细胞系的治疗作用被引量：1
- 2000年
- 目的：探讨重组腺病毒介导反义 c-myc基因(Ad-ASmyc)治疗人肝癌细胞的作用。方法：观察 Ad-ASmyc对人肝癌细胞系的转导效率，通过细胞生长曲线、克隆形成实验、 DNA片段化分析、RT-PCR、裸鼠皮下移植瘤治疗实验，分析 Ad-ASmyc对人肝癌细胞系 Bel-7402、 QSG-7701、 SMMC-7721和 HCC-9204细胞生长和 c-myc基因表达及裸鼠肿瘤生长的抑制作用。结果： Ad-ASmyc可高效转导人肝癌细胞系，抑制细胞生长；转染细胞克隆形成能力降低，克隆成活率为对照组的53.9％～69.1％，c-myc基因表达下降；Ad-ASmyc处理肝癌细胞， DNA凝胶电泳出现明显的梯形条带，瘤内注射 Ad-ASmyc可抑制裸鼠皮下移植瘤生长。 结论：重组腺病毒介导的反义 c-myc基因转移，有可能成为肝癌基因治疗的一种有效方法。
- 林晨张海增梁萧张雪艳付明吴旻余昌中
- 关键词：腺病毒载体反义C-MYC
- DNA损伤反应信号传导通路调控基因组稳定性的机制研究
- 詹启敏金顺钱童彤宋咏梅姬峻芳高华付明樊飞跃范文红董立佳
- 1999年1月～2005年12月，由国家973项目、国家杰出青年科学基金资助，进行了研究。恶性肿瘤的发生发展是一个复杂的生物学过程。在细胞DNA受到损伤因素的作用后，基因组稳定性能否得以维持，是肿瘤发生发展的关键环节之一...
- 关键词：
- 关键词：DNA损伤恶性肿瘤信号传导通路调控基因基因组稳定性分子机制
- 基因重组趋化抗原疫苗
- 本发明涉及一种重组基因序列，该序列包括人SLC基因，抗原基因和IgG1的Fc片段基因，其中在抗原基因上游连接SLC基因；在抗原基因下游连接IgG1的Fc片段基因。本发明还涉及该重组基因序列在制备基因疫苗中的应用。
- 张叔人林晨孙文欣覃汉军周春霞梁萧王冬梅马文波张雪燕付明
- 文献传递
- 基因组稳定性在恶性肿瘤发生发展中的作用机制研究
- 詹启敏童彤宋咏梅姬峻芳高华汪洋付明董立佳
- 该项研究属基础研究类项目。恶性肿瘤的发生发展是一个复杂的生物学过程。在细胞DNA受损伤后，基因组稳定性能否得以维持，是肿瘤发生发展的关键环节之一。正常细胞受到外界损伤因素作用时，一系列损伤反应信号通路被激活，启动和参与复...
- 关键词：
- 关键词：生物学基因组稳定性
- 食管鳞癌组织芯片中MTA1蛋白表达的免疫组织化学研究被引量：3
- 2007年
- 目的研究食管鳞癌组织中转移相关基因MTA1蛋白定位及表达水平的改变及与食管鳞癌进展、转移的关系。方法应用食管鳞癌组织芯片通过免疫组织化学染色研究MTA1蛋白在食管癌中的表达情况。结果MTA1蛋白在食管鳞癌组织中主要定位于胞核,在淋巴结转移灶中出现胞浆与胞核同时着色。正常组织与重度不典型增生、原位癌及癌组织之间差异有统计学意义,在食管鳞癌不同进展阶段的组织中MTA1表达逐渐升高,并且出现异位表达。结论MTA1与食管鳞癌的侵袭和转移高度相关,在食管鳞癌的发展过程中可能发挥着重要作用,可作为判断食管癌侵袭及转移能力的辅助因子。
- 钱海利李云峰于静宋崇文吕宁张雪燕梁萧付明林晨
- 关键词：食管鳞癌MTA1组织芯片
- 基因治疗与化疗联合应用对人肺腺癌GLC-82细胞作用的实验研究被引量：5
- 2000年
- 目的 探讨基因治疗和化疗联合应用提高肿瘤疗效的可能性和初步机制。方法 将重组腺病毒载体 (Ad)介导的p5 3基因 (Ad p5 3)与化疗药顺铂 (CDDP)或三氧化二砷 (As2 O3)联合 ,通过细胞生长和存活的抑制实验 ,流式细胞分析 ,末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记检测 ,逆转录 聚合酶链反应 ,免疫组织化学检测 ,以及裸鼠皮下移植瘤模型的治疗实验 ,观察其对人肺腺癌GLC 82细胞的作用及可能机制。结果 Ad p5 3与CDDP或As2 O3 联合在体外实验中对人肺腺癌GLC 82细胞生长的抑制效果比单独用“药”的效果强。在体内实验中 ,Ad p5 3与CDDP联合对GLC 82细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制率可达 89.0 % (单用的抑制率分别为 43.9%、5 7.3% )。Ad p5 3及较低剂量化疗药可导致GLC 82细胞凋亡 ,CDDP与As2 O3 均可引起GLC 82细胞G2 /M期的阻滞 ,当联合应用时 ,阻滞作用更明显地受阻于G2 /M期。结论 Ad p5 3与CDDP或As2 O3 联合应用 ,可以提高对人肺腺癌GLC
- 徐敏毅林晨梁萧付明张雪艳吴旻
- 关键词：肺腺癌基因治疗药物疗法化疗
- 宫颈癌中MTA1蛋白的表达及临床意义被引量：2
- 2011年
- 目的:研究转移相关基因1(MTA1)在宫颈癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化法检测20例正常宫颈组织,50例宫颈癌以及淋巴结转移癌组织中MTA1蛋白的表达情况,并与临床病理特征相比较。结果:与正常宫颈上皮相比,宫颈癌与淋巴结转移癌组织中MTA1阳性细胞数量及染色强度均明显增高。正常宫颈中MTA1蛋白定位于细胞核;宫颈癌及淋巴结转移癌组织中MTA1出现了细胞核、细胞浆、细胞膜的多种形式的蛋白定位。宫颈癌中MTA1蛋白的过表达与淋巴转移、浸润深度及脉管浸润有关,与组织学类型、分化程度无关。Kaplan-Meier生存分析未发现MTA1是宫颈癌的不良预后因素。结论:MTA1蛋白的过表达可能与宫颈癌的发生发展、浸润转移密切相关,其与宫颈癌预后的关系还有待于进一步研究。
- 韩肖燕钱海利林晨张雪燕梁萧付明杨隽钧向阳
- 关键词：宫颈癌免疫组化
