鲍炜
- 作品数：37 被引量：88H指数：5
- 供职机构：南京军区南京总医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学机械工程更多>>
- 针对HER2的RNA干涉抑制人胃癌细胞的生长和侵袭
- 目的:探讨针对HER2分子的RNA干涉对人胃癌细胞生长和侵袭的影响。方法:构建了针对癌基因HER2的siRNA表达载体,分别命名为pSUPER-sihe1和pSUPER-sihe2,将实验组载体与对照载体转染细胞后,通过...
- 鲍炜付海京孟艳玲杨安钢
- 关键词：RNA干涉
- 文献传递
- 男性生殖系统胚胎性横纹肌肉瘤的临床病理学研究被引量：4
- 2016年
- 目的：探讨男性生殖系统胚胎性横纹肌肉瘤（ERMS）的临床病理特征、诊断及鉴别诊断。方法：收集2000～2015年我院诊治的11例男性生殖系统ERMS的临床病理、免疫表型和电镜特征相关资料，并复习相关文献。结果：11例男性生殖系统ERMS的发病年龄9～58岁，中位年龄17岁；发病部位睾丸3例、阴囊4例、附睾1例、前列腺3例。临床表现无特异，难以与炎性病变及其他良性病变区分。组织学：肿瘤细胞呈弥漫状或束状分布，主要由核深染的短梭形、圆形或不规则形细胞组成，瘤细胞胞质红染，部分强嗜酸性，有横纹肌分化，部分瘤细胞较幼稚，部分可见网球拍状细胞，部分胞质有空泡变性，核呈类圆形或短梭形，部分可见核仁，见核分裂象，部分可见网球拍状细胞。免疫表型：肿瘤细胞表达Myogenin（5／6）、Desmin（11／11）、MyoDl（8／9）和Myosin（1／2）。1例电镜观察：瘤细胞胞质内可见早期肌原纤维。结论：男性生殖系统ERMS是一种较为罕见、好发于年轻人的高度恶性肿瘤。确诊主要根据其组织学形态和免疫表型，必要时可结合电镜观察辅助诊断。ERMS具有局部侵袭性强、多早期扩散，采用早期手术切除、辅以放疗和化疗的综合治疗可减少复发、提高患者生存率。
- 周晓蝶涂频程凯汪小霞王璇王建军鲍炜石群立
- 关键词：胚胎性横纹肌肉瘤生殖系统临床病理
- 针对HER2/neu的siRNA对非小细胞肺癌细胞生长的抑制作用被引量：4
- 2006年
- 目的:构建针对HER2/neu的RNA干涉载体,观察对HER2/neu表达抑制及抑制后对非小细胞肺癌生长的影响.方法:设计和合成长度为64nt的脱氧寡核苷酸链,退火互补成双链,克隆至pSUPER质粒载体,转化DH5α菌株,提取质粒,转染过表达HER2/neu的肺腺癌细胞系SPCA1,RTPCR检测HER2/neu的mRNA表达,Westernblot和间接免疫荧光法检测HER2/neu的蛋白表达,FCM分析细胞周期变化,MTT法观察细胞生长.结果:肺腺癌细胞系SPCA1存在HER2/neu过表达;成功构建了HER2/neu特异性RNA干涉载体pSUPERsiHER2;瞬时转染SPCA1细胞,HER2/neu的mRNA及蛋白表达均降低;G1期细胞较亲代增加9.9%;肿瘤细胞增殖速度减慢(P<0.05).结论:成功构建了HER2/neuRNA干涉载体,转染后可有效降低肺腺癌细胞系SPCA1HER2/neu的mRNA转录及蛋白水平表达,阻滞转染细胞于G1期,造成转染细胞生长速度减慢,这有望为肺癌基因治疗提供一种选择手段.
- 任新玲钱桂生鲍炜付海京贾林涛张瑞王涛许彦鸣杨安钢
- 关键词：SIRNARNA干涉HER2/NEU癌细胞生长
- HER2分子与肿瘤靶向治疗被引量：19
- 2006年
- HER2分子是表皮生长因子受体家族的第二位成员,对细胞的生长、分化及存活有着重要的调节作用,在乳腺癌、卵巢癌、肺腺癌、肾细胞癌中其过表达与否是患者预后的重要指标。研究表明它与表皮生长因子受体家族其他3位成员形成异二聚体,通过多种信号转导途径促进肿瘤的增殖、转移、耐药性的产生,是肿瘤基因治疗的重要靶位点。
- 鲍炜裘秀春贾林涛张立红王成济杨安钢
- 关键词：表皮生长因子受体基因治疗
- 免疫组化染色及FISH检测12号染色体短臂捕获对Ⅱ型睾丸生殖细胞肿瘤的诊断意义被引量：6
- 2016年
- 目的:分析Ⅱ型睾丸生殖细胞肿瘤(TGCT)的各亚型病理形态以及免疫组化特点、分子生物学改变,探讨免疫组化染色(IHC)及荧光原位杂交(FISH)检测在TGCT诊断分型中的意义。方法:收集97例TGCT(含有精原细胞瘤成分75例,胚胎癌成分17例,卵黄囊瘤成分11例,成熟性畸胎瘤16例,未成熟畸胎瘤3例,表皮囊肿1例),正常睾丸组织20例,以及非生殖细胞肿瘤的睾丸肿瘤6例。通过IHC检测TGCT各亚型对于不同抗体的阳性表达情况,并运用FISH技术检测各亚型中12号染色体短臂等臂和扩增的发生率。结果:TGCT各亚型的免疫表型各有不同,人类婆罗双树样基因-4(SALL4)及胎盘碱性磷酸酶(PLAP)最广谱、敏感性高,CD117及人八聚体结合转录因子4(OCT4)在浸润性精原细胞瘤和原位生殖细胞瘤(GCNIS)中强阳性表达,而在正常生精小管不表达。卵黄囊瘤显著表达人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3),表达范围和强度均优于人调节T细胞特异转录因子3(GATA3)和甲胎蛋白(AFP)。胚胎癌表达人广谱细胞角蛋白(CKpan)、OCT4、CD30。绒癌表达人绒毛膜促性腺激素(h CG)。浸润性TGCT中12号染色体短臂发生等臂和扩增的阳性率为96.7%(29/30)。结论:临床病理工作中,绝大部分病例单凭组织形态观察即可诊断TGCT,IHC检测利于更精确的分型,对于个体化治疗选择和预后评估意义重大。12号染色体短臂捕获是Ⅱ型TGCT的特异性分子改变,有助于排除其他病变。
- 沈勤饶秋余波夏秋媛鲍炜陆珍凤石群立周晓军
- 关键词：睾丸免疫组化染色荧光原位杂交
- 重组逆病毒介导的Immunocaspase-3分泌性T细胞对ErbB2阳性乳腺癌的杀伤作用被引量：4
- 2004年
- 将Immunocaspase-3基因转染Jurkat T淋巴细胞, 使其稳定地分泌性表达靶向促凋亡蛋白Immunocaspase-3, 间接免疫荧光检测表明该蛋白可内化进入ErbB2阳性的SKBr3乳腺癌细胞, 细胞计数结果表明乳腺癌细胞的生长和增殖受到明显抑制. 进一步将Immunocaspase-3基因克隆入逆转录病毒载体pLNCX, 转染PA317细胞进行包装, 挑选高滴度的包装细胞株收获病毒. 用收获的病毒感染刺激分裂的人外周血T淋巴细胞, 经筛选后通过尾静脉注射给荷有SKBr3乳腺癌的裸鼠, 观察到肿瘤生长明显受到抑制(抑制率 73.25%), 裸鼠存活时间较对照组延长80.95%. 免疫组织化学染色结果表明裸鼠肿瘤组织中有Immunocaspase-3蛋白分布, TUNEL检测证实肿瘤细胞发生凋亡. 上述结果表明, T淋巴细胞分泌的Immunocaspase-3在裸鼠体内可以识别和进入ErbB2阳性的乳腺癌细胞, 抑制肿瘤生长.
- 张立红贾林涛赵晶许彦鸣温伟红鲍炜曹云新苏成芝王成济杨安钢
- 关键词：重组逆转录病毒ERBB2CASPASE-3阳性乳腺癌天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶
- 针对ERα的RNA干涉对人乳腺癌Bcap-37细胞生长的抑制作用
- 2006年
- 目的:探讨针对雌激素受体(ERα)分子的RNA干涉对肿瘤细胞生长的影响.方法:人工合成编码siRNA的脱氧寡核苷酸链,经磷酸化后退火连接进pSUPER载体.挑取和扩增序列正确的重组载体,稳定转染Bcap-37细胞后分别以RT-PCR和间接免疫荧光检测mRNA及蛋白质的表达情况,MTT法检测RNAi对细胞生长的影响.结果:siRNA表达载体转染后ERα表达水平明显降低,细胞增殖减慢.结论:针对ERα的RNA干涉可在体外抑制Bcap-37细胞生长.
- 付海京贾林涛鲍炜赵晶孟艳玲王成济杨安钢
- 关键词：雌激素受体ΑRNA干涉基因治疗
- 针对MAGE-1基因RNAi在恶性胶质瘤SHG-44细胞中的作用研究
- 2006年
- 目的构建抑制黑色素瘤抗原-1(MAGE-1)的siRNA表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系SHG-44细胞中对MAGE-1基因表达的干涉作用。方法化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE-1基因寡核苷酸链,克隆到经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建RNA干涉(RNAi)质粒载体。利用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后SHG-44细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干扰效果。结果重组构建的pSUPER-MAGE-1载体经双酶切电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成功插入到预计位点,并且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的SHG-44多克隆细胞MAGE-1的表达经RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干涉作用。结论成功构建了针对MAGE-1基因的siRNA表达载体,抑制SHG-44细胞中的MAGE-1分子的表达。
- 程光章翔鲍炜张赟张新海曹卫东高大宽宋蕾
- 关键词：小干涉RNAPSUPER黑色素瘤抗原-1SHG-44细胞
- 人抗HBsAg单链抗体/鱼精蛋白截短体融合蛋白基因的构建、表达及活性鉴定被引量：5
- 2006年
- 目的:构建人抗HBsAg单链抗体(ScFv)/鱼精蛋白截短体(truncated protam ine,tP)融合基因,在大肠杆菌中进行表达纯化并分析ScFv/tP融合蛋白的活性.方法:设计引物扩增人抗HBsAg ScFvHBs15基因,在其3′端引物引入tP的编码基因,PCR扩增获得ScFv/tP融合基因,将其克隆入原核表达载体pET-32 a后,在大肠杆菌BL2 l(DE3)LysS内诱导表达.表达产物经SDS-PAGE及W estern b lot鉴定后,用N i-NTA螯合层析介质纯化.间接ELISA分析ScFv/tP融合蛋白的亲和活性,凝胶迁移阻滞实验检测ScFv/tP融合蛋白与DNA结合的情况.结果:成功获得人抗HBsAg ScFv/tP融合基因,经IPTG诱导后在大肠杆菌中表达,表达的ScFv/tP融合蛋白不仅保持了与HBsAg结合的能力,同时具有DNA结合活性.结论:ScFv与tP融合后,同时具有与抗原和DNA结合的活性,为该ScFv的进一步应用奠定了基础.
- 孟艳玲温伟红薛茜张勇张巍鲍炜任君琳贾林涛王成济杨安钢
- 关键词：单链抗体乙型鱼精蛋白类
- HER2 siRNA抑制肺癌细胞增值的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的构建针对HER2的RNA干涉载体,观察对HER2表达抑制及抑制后对非小细胞肺癌生长的影响。方法设计和合成长度为64nt的脱氧寡核苷酸链,退火互补成双链,克隆至pcD-NA3质粒载体,转化DH5α菌株,提取质粒,转染过表达HER2的肺腺癌细胞系SPC-A-1,RT-PCR检测HER2的mRNA表达,Western Blot和间接免疫荧光法检测HER2的蛋白表达,FCM分析细胞周期变化,MTT法观察细胞生长。结果成功构建了HER2特异性RNA干涉载体pcDNA3～siHER2;瞬时转染SPC-A-1细胞,HER2的mRNA及蛋白表达均降低;G_1期细胞较亲代增加9.9%;肿瘤细胞增殖速度减慢(P<0.05)。结论成功构建了HER2 RNA干涉载体,转染后可有效降低肺腺癌细胞系SPC-A-1 HER2的mRNA转录及蛋白水平表达,阻滞转染细胞于G_1期,造成转染细胞生长速度减慢,这有望为肺癌基因治疗提供一种选择手段。
- 任新玲钱桂生付海京鲍炜杨安钢
- 关键词：SIRNARNA非小细胞肺癌
