顾海燕
- 作品数：9 被引量：6H指数：2
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- Fba蛋白的原核表达及其免疫效果分析
- 目的:基因工程手段诱导表达并纯化A族链球菌(GAS)表面新发现的Fba蛋白,并将Fba蛋白免疫小鼠,对其引发的体液免疫应答进行分析。方法:将本室保存的pGEX4T-2／fba E．coliBL21阳性菌株经IPTG诱导表...
- 马翠卿魏林李彩虹顾海燕王秀荣
- 关键词：体液免疫重组疫苗
- 文献传递
- A族链球菌表面蛋白Fba保护性区段的鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的将A族链球菌表面蛋白Fba分段克隆、表达，免疫动物并攻毒，以鉴定各区段诱导的保护性免疫并确定保护性最强的区段。方法根据Fba蛋白的结构特点将其划分为4个重叠区域，以A族链球菌（GAS）的SSI-9为模板，PCR扩增4段蛋白的基因，克隆、表达后，Western印迹鉴定蛋白表达。4段蛋白纯化后分别免疫小鼠，同时设PBS对照组。ELISA检测各免疫组血清IgG水平，并用致死量的GAs（M＋Fba＋）攻击免疫3次后的小鼠，计算各组保护率。数据行方差检验和Fisher精确概率法。结果成功构建原核表达质粒pGEX-2T／FbaA1、pGEX-2T／FbaA2、pGEX2T／FhaA3和pGEX2T／FbaA4，成功表达了4段蛋白。Fba蛋白免疫小鼠后，实验组血清IgG随免疫次数的增加呈逐渐增高趋势。第3次免疫后，与PBS对照组比较，FbaA2蛋白组效价升高最为明显，达1：102400（F=1290．2，P〈0．01）。攻毒后，FbaA2蛋白组8只小鼠中有4只得到保护，FbaA1、FbaA3及FbaA4蛋白组各8只小鼠中，仅2只得到保护（P〈0．05）。结论成功构建、表达了Fba分段蛋白；初步确定FbaA2段可诱导较强的保护性免疫应答。
- 魏澎马翠卿郭奕阳顾海燕冯惠东王秀荣魏林
- 关键词：A族链球菌纤连蛋白类质粒
- 针对A族链球菌表面蛋白FbaA第96－118位氨基酸的单克隆抗体
- 本发明涉及一种针对A族链球菌表面蛋白FbaA第96－118位氨基酸的单克隆抗体，所述单克隆抗体是由以FbaA蛋白为免疫原免疫小鼠制备的杂交瘤细胞产生；所述单克隆抗体的类型为IgG1。本发明的有益效果是：为深入研究链球菌的...
- 魏林马翠卿顾海燕李彩红郭奕阳王秀荣杨建岭
- 文献传递
- A族链球菌表面蛋白Fba的原核表达及免疫原性分析被引量：5
- 2008年
- 目的 研究A族链球菌（GAS）表面新型纤连蛋白Fba的免疫原性，探讨GAS感染机体的免疫应答机制。方法 PCR扩增fba基因，测序正确后克隆至原核表达质粒pGEX4T-2，并在E．coli BL21中表达，应用ELISA和Western印迹法鉴定目的蛋白表达，以该蛋白作为抗原，包被酶联板．俭测GAS全菌免疫鼠血清、33份抗链球菌“0”阳性患者血清。同时，将该蛋白免疫Balb／C小鼠，3次免疫后收集血清，检测IgG效价。结果 ELISA和Western印迹证实，表达的Fba重组蛋白可与已知兔抗Fba阳性血清产生特异性反应；且Fba蛋白可与GAS全菌免疫鼠血清、抗链球菌“0”阳性患者血清发生特异性结合。Fba蛋白免疫小鼠后抗血清IgG效价达1：4800。结论 GAS感染或Fba蛋白免疫动物后均可诱导动物体产生Fba抗体，该抗体与Fba重组蛋白可产生特异性反应，提示Fba蛋白具有良好的免疫原性和抗原性。Fba蛋白可作为GAS的候选疫苗及检测GAS感染患者血清效价的重要工具。
- 马翠卿李彩虹王秀荣王秀文尹晓琳顾海燕冯惠东魏林
- 关键词：链球菌纤连蛋白类免疫原性
- Epitope Specific for a Monoclonai Antibody against Fba, a Surface Protein on Group A Streptococci, Overlaps its Binding Site with Complement Regulatory Proteins Factor H
- 马翠卿魏林郭弈阳顾海燕刘征王秀荣冯惠东
- Fba蛋白的原核表达及其免疫效果分析
- ＜正＞【目的】基因工程手段诱导表达并纯化A族链球菌（GAS）表面新发现的Fba蛋白,并将Fba蛋白免疫小鼠,对其引发的体液免疫应答进行分析。【方法】将本室保存的pGEX4T-2/fba
- 马翠卿魏林李彩虹顾海燕王秀荣
- 关键词：体液免疫重组疫苗
- 文献传递
- A族链球菌表面蛋白Fba单克隆抗体的制备及其结合表位的初步定位
- 目的：A族溶血性链球菌(GAS)是咽部、皮肤、软组织感染的常见致病菌，也是引起儿童中毒性疾病猩红热、毒性休克综合征等的病原，它的危害还在于可以导致感染后的自身免疫性疾病风湿热、风湿性心脏病、肾小球肾炎、牛皮癣以及免疫性脑...
- 顾海燕
- 关键词：A族链球菌表面蛋白单克隆抗体免疫效果
- 文献传递
- A族链球菌表面蛋白Fba单克隆抗体的制备及其对应表位的初步鉴定被引量：4
- 2008年
- 目的:制备抗A组溶血性链球菌(GAS)表面蛋白Fba(fibronectin-binding proteins a)的单克隆抗体(mAb),并对单抗的生物学功能及其相应表位进行了初步鉴定。方法:以重组Fba蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术及间接ELISA筛选出针对Fba的杂交瘤细胞株,以Western blot鉴定mAb的特异性,并将获得的mAb与Fba+GAS和Fba-GAS分别行全菌ELISA、与Fba的分段表达蛋白行Western blot,初步鉴定mAb针对的表位所在区域。结果:获得了稳定分泌抗Fba-mAb的杂交瘤细胞株,其中一株mAb能特异结合天然Fba+链球菌,且该单抗针对的表位包含了Fba蛋白的第104～108位氨基酸,该位点也是链球菌Fba蛋白结合补体调节蛋白FH的位点。结论:成功地制备了抗GAS表面Fba蛋白的mAb,其中一株mAb对应的表位为位于菌体表面的天然表位,并检测出了该mAb对应的表位所在区段,这为深入研究GAS的致病机制提供了有力工具。
- 马翠卿顾海燕郭奕阳胡光磊魏澎魏林
- 关键词：A族链球菌单克隆抗体表位
- 一株抗A族链球菌表面蛋白Fba的单克隆抗体对应的表位与Fba结合调节蛋白FH的位点重叠
- ＜正＞目的 G+化脓性链球菌,又称为A族链球菌（GAS）,是一种重要的可以引起多种人类疾病的致病菌,由于感染GAS,每年有超过500,000人死亡,以风湿热和风湿性心脏病为主。目
- 马翠卿郭奕阳顾海燕曾瑞红杨丽娟魏林
- 关键词：单克隆抗体
- 文献传递
