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韩跃武: 作品数：72 被引量：177H指数：6; 供职机构：兰州大学更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划甘肃省自然科学基金甘肃省科技厅中小企业创新基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>

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SELEX法筛选宫颈癌前病变核酸适配子被引量：6: 2018年; 构建随机ssDNA文库,通过SELEX技术,以正常、炎性宫颈脱落细胞为反筛细胞,以上皮内低级别病变(CIN1)、上皮内高级别病变(CIN2、CIN3)和鳞状细胞癌脱落细胞为正筛细胞,经过12轮筛选特异性适配子高度富集得到宫颈癌前病变适配子库,经特异性、亲和力分析和细胞免疫荧光确立高特异性适配子CIN-Ap4可作为诊断宫颈癌前病变生物标志物,为宫颈癌前病变分子诊断奠定理论基础,提供新思路。利用Prime Premier 5.0设计构建了随机ssDNA文库并根据文库两端固定序列设计引物,对对称PCR和间接不对称PCR中的退火温度、循环数以及上、下游引物浓度比等条件进行优化,分析确定50μL反应体系中对称PCR的最佳反应条件为:最佳退火温度为49.5℃,最佳循环数为15个循环;间接不对称PCR的最佳反应条件为:50μL反应体系中上、下游引物浓度的最佳比例为80∶1,最佳循环数为35个循环。实验结果表明成功构建了寡核苷酸文库,在最适PCR条件下可获得理想的dsDNA和ssDNA,并具有良好的重复性,为顺利筛选适配子提供保证。; 李文慧石大林贾茹涵杨静张艳艳陈卫韩跃武; 关键词：宫颈癌前病变生物标志物

慢性粒细胞白血病ssDNA适配子PCR扩增条件的优化: 2013年; 目的优化慢性粒细胞白血病(Chronic myelogenous leukemia,CML)ssDNA适配子的PCR扩增条件。方法以合成的核苷酸适配子为模板并设计引物,根据引物解链温度(Tm值)设置不同的退火温度(38.0、39.2、41.2、44.2、48.3、51.5、53.6、55.0℃)、循环次数(12、16、20、24、28、30、35、38、40)及非限制性与限制性引物比例(1∶1、30∶1、50∶1、70∶1、80∶1、100∶1),进行PCR扩增,优化CML ssDNA适配子对称PCR及间接不对称PCR扩增条件,并验证优化的PCR条件的重复性。结果对称PCR扩增的最佳退火温度为44.2℃,最佳循环次数为30次;间接不对称PCR的最佳循环次数为38次,非限制性引物与限制性引物浓度比例为50∶1时,可获得理想的ssDNA和较少的dsDNA;优化的PCR条件重复性较好。结论优化了CML ssDNA适配子的PCR扩增条件,为筛选到特异性的ssDNA适配子提供了参考,也为后续试验奠定了基础。; 习静郭鹏韩跃武刘文伟张雪燕; 关键词：慢性粒细胞白血病聚合酶链反应

高效液相色谱法同时测定肿瘤患者尿中假尿苷和肌酐的含量被引量：3: 1995年; 高效液相色谱法同时测定肿瘤患者尿中假尿苷和肌酐的含量何书泉，韩跃武，朱昕，李亢宗，魏睛霞（兰州医学院兰州７３００００）１前言假尿苷是一种稀有核苷，是人体ＲＮＡ分解代谢的最终产物，机体不再重新利用而从尿中排出，正常成人每日排出量较为恒定，性别之间无明显...; 何书泉韩跃武朱昕李亢宗魏睛霞; 关键词：假尿苷肌酐肿瘤患者高效液相色谱

核酸适体电化学生物传感器的研究进展被引量：2: 2010年; 核酸适体(aptamer)是一种体外筛选,功能类似于单克隆抗体的,能与靶物质高特异性、高亲和力结合的寡核苷酸片段。因其具有诸多优于抗体的特点,已被广泛应用到生物传感器领域。而电化学检测技术因其具有选择性好、灵敏度高,以及快速、简单、测试费用低和易于联机化等优点而在适体传感器的发展中占有重要的地位。本研究依据电化学适体传感器的构建原理中DNA链的数量和结构,对近几年电化学适体传感器的研究发展做一综述,包括单链核酸物质体系构建的核酸适体电化学传感器、双螺旋结构的核酸物质体系构建的核酸适体电化学传感器和两条单链核酸物质体系构建的核酸适体电化学传感器。; 刘文伟韩跃武张雪燕查成喜; 关键词：核酸适体电化学生物传感器

基于ssDNA适配子的慢性粒细胞白血病K562细胞检测方法的建立被引量：3: 2011年; 目的建立基于ssDNA适配子的慢性粒细胞性白血病K562细胞的检测方法。方法利用Cell-SELEX(Sys-tematic evolution of ligands by exponential enrichment)技术获得针对K562细胞的高特异性ssDNA适配子,以双位点结合模式试验原理,结合生物素链霉亲和素磁珠技术,建立K562细胞的特异性检测方法,并验证其特异性及灵敏度。结果利用建立的方法分别检测K562细胞、HL-60细胞及空白对照细胞,K562组与HL-60组和空白对照组荧光强度值差异有统计学意义(P<0.01),HL-60组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05),表明该方法特异性强;该方法能检测出数量小于100个的K562细胞,检测阈值低,灵敏度高。结论已成功建立了基于ssDNA适配子的检测K562细胞的新方法,为慢性粒细胞性白血病的分子诊断提供了一种新方法,也为分离K562细胞表面物质提供了新的思路。; 查成喜韩跃武张雪燕杨浩夏艳郭鹏; 关键词：K562细胞适配子分子诊断技术

新早期胃癌标志物PRDX4通过清除ROS促进胃癌的发生发展（英文）被引量：5: 2020年; 胃癌是全球第四大最常见的癌症,也是全球癌症中引起死亡的第二大原因。为了降低胃癌的死亡率,目前亟需解决的问题是发现新的早期胃癌特异性的标志物,提高早期胃癌的检出率,从而从根本上解决胃癌死亡率高的问题。实验室前期研究发现过氧化物酶4 (Peroxiredoxin 4,PRDX4)具有早期胃癌标志物的潜能,文中通过建立恶性转化模型及转化细胞过表达等方法,研究PRDX4在转化细胞中的作用。结果显示PRDX4通过减少转化细胞中活性氧(Reactive oxygen species,ROS)含量,使细胞处在利于生长增殖的微环境中,从而促进细胞发生恶性转化,即PRDX4通过清除ROS促进胃癌的发生发展。; 贾茹涵石大林李文慧杨静张艳敏韩跃武; 关键词：早期胃癌活性氧生物标志物

高效液相色谱法测定三颗针中生物碱的含量被引量：1: 1994年; 本文建立了在室温同一条件下对三颗针中小檗碱,药根碱,巴马亭及小檗胺同时分离测定的反相高效液相色谱法,并测定了其中各组分的含量。生物碱的检测限量为1-12ng,分析的最适波长为280nm,最适pH4.2。研究结果说明,用反相高效液相色谱法测定生物碱是一灵敏可靠的方法。; 李亢宗韩跃武; 关键词：高效液相色谱法三颗针生物碱

LfcinB基因的克隆、突变、表达及抗菌活性的初步研究: 根据 Genebank 中 LfcinB DNA 序列及氨基酸残基序列,按照 Codon Usage Database 中大肠杆菌偏爱的密码子原则对 LfcinB 基因进行优化设计。利用基因重组技术构建克隆重组体 pUC...; 张琦韩跃武王玉平谢俊秋; 文献传递

天蚕素A-蛙皮素杂合肽突变体的构建、表达及其抗菌活性被引量：3: 2008年; 目的构建天蚕素A(1～8)-蛙皮素(1～12)杂合基因抗菌肽(CA-MA杂合肽)突变体,在大肠杆菌中融合表达,并进行抗菌活性检测。方法采用PCR体外定点突变技术,设计1对方向相反的引物,其中1个引物引入突变点,应用高保真的PolybestDNA多聚酶进行重组表达质粒pGEX-4T-1-CA-MA的PCR扩增,使CA-MA杂合肽第16位密码子由AGT突变为TGG。将扩增片段自身连接,构建CA-MA杂合肽突变重组表达质粒pGEX-4T-1-W16-CA-MA,转化E.coliBL21,IPTG诱导表达突变体蛋白W16-CA-MA,并对表达产物进行纯化。分离GST融合蛋白后,进行抗菌活性检测。结果重组突变表达质粒DNA测序结果表明,在预期位点发生了突变;突变蛋白在大肠杆菌中的表达量约占菌体总蛋白的18%;纯化后蛋白纯度可达75%以上,并具有一定的抗菌活性。结论已成功获得了具有抗菌活性的杂合肽突变体W16-CA-MA。; 冯惟萍韩跃武任慧子陈建国张庆华卢天龙; 关键词：突变体抗菌活性

抗菌肽Aurein1.2基因的同向串联及其克隆载体的构建和鉴定被引量：4: 2005年; 目的: 构建抗菌肽Aurein1 2基因多拷贝串联体,并将目的基因串联产物克隆到载体pUC18上.方法: 分别合成含相同黏性末端的Aurein1 2单拷贝基因、EcoRⅠ前接头及SalⅠ后接头.单拷贝基因分别与前、后接头连接,通过控制基因和接头加入的量及时间,可得到两侧有EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的同向串联的多拷贝基因,选取合适拷贝数的基因,将其克隆到载体pUC18上.结果: PCR鉴定、酶切鉴定和DNA测序证明多拷贝基因重组质粒构建成功.结论: 该方法能方便高效地获得所需的多拷贝基因,为进一步克隆到表达载体并进行高效表达打下基础.; 栗学清韩跃武; 关键词：抗菌肽多拷贝

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