韦海娜 作品数:12 被引量:16 H指数:2 供职机构: 新疆农业大学动物医学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
重组牛乳源金黄色葡萄球菌黏附因子FnbpA A功能区的表达与鉴定 2013年 黏附素分子FnbpA(纤连蛋白结合蛋白A,fibronectinbindingproteinA)是金黄色葡萄球菌感染早期最重要的致病因子,也是一个重要的免疫靶标。由于不同地区流行的菌株产生的黏附素有一定的差异,将分离自新疆地区奶牛乳源金黄色葡萄球菌黏附素分子FnbpA的A功能区亚克隆至pGEX原核表达载体并转入BL21中诱导表达,SDS—PAGE分析表明,切除GST标签后在63kD处出现特异性条带。纯化切除GST标签的蛋白经弗氏佐剂乳化免疫试验兔。ELISA方法检测免疫兔的抗体效价并评估抗体和葡萄球菌结合能力,结果表明,目的蛋白的抗体效价可达6.7×10^6,并可在体外识别菌体抗原。 苏艳 王世民 李莹 韦海娜 邵俊高 张宝江 殷涛关键词:金黄色葡萄球菌 原核表达 蛋白纯化 免疫原性 ELISA 一种牛乳源金黄色葡萄球菌Efb蛋白及其制备方法和应用 本发明涉生物工程及免疫学领域。具体地说涉及牛乳源金黄色葡萄球菌来源的Efb蛋白的制备方法和其在免疫中的可能应用。从新疆地区患乳腺炎的牛乳中分离致病性金黄色葡萄球菌和从该菌基因组中克隆Efb基因,该基因具有序列表1中的氨基... 苏艳 刘云涛 韦海娜 姜慧娇 张宝江文献传递 一种预防奶牛乳腺炎的核酸疫苗PV-Fn的设计及其构建 本发明属于微生物学,分子生物学及免疫学领域,涉及牛乳腺炎奶样中金黄色葡萄球菌来源的粘附素分子FnBPA核酸疫苗的设计和制备使用。通过对来源于奶牛乳腺炎地区分离株FnBPA的部分基因的克隆,分析其序列及抗原表位,筛选抗原表... 苏艳 王世民 张宝江 邵俊高 韦海娜文献传递 新疆三个地区来源牛乳源金黄色葡萄球菌FnBPA-A基因多态性及免疫原性分析 奶牛乳房炎是严重危害奶牛业的疾病之一,也是给奶牛业造成巨大经济损失的疾病之一。金黄色葡萄球菌是奶牛乳房炎的主要致病菌,可引发奶牛乳腺组织炎症、纤维化,严重影响乳的质量和奶牛的产乳年限等。 在金黄色葡萄球菌感染的早期,黏... 韦海娜关键词:乳房炎 金黄色葡萄球菌 免疫原性 文献传递 牛源金黄色葡萄球菌黏附素纤连结合蛋白A分泌型DNA疫苗诱导小鼠免疫效应的研究 被引量:1 2013年 采用PCR方法对编码金黄色葡萄球菌黏附素纤连结合蛋白A(FnbpA)的A区基因片段进行了特异性扩增,构建了真核表达载体pVAX-SFn,转染BHK-21细胞后经ELISA可检测出分泌表达的FnbpA蛋白。将真核重组表达质粒肌肉注射C57BL/6小鼠,免疫后检测小鼠血清抗体效价、淋巴细胞增殖及对试验小鼠攻毒试验。结果表明,该重组表达载体诱导细胞和体液免疫应答的强度均明显超过对照组。对小鼠的攻毒试验结果提示该重组DNA经肌肉注射途径接种可对小鼠产生免疫保护。本试验的结果对该DNA疫苗今后在实际中的应用奠定了良好的试验基础。 苏艳 王世民 邵俊高 张宝江 韦海娜 李莹关键词:金黄色葡萄球菌 DNA疫苗 免疫效应 牛乳源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测与耐药性分析 被引量:8 2013年 从新疆昌吉、伊犁、石河子3个地区奶牛养殖场乳腺炎奶样中共分离134株金黄色葡萄球菌,对其中mecA基因阳性的30株进行了8种不同抗菌素敏感性检测。结果显示,分离自同一地区牛乳源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)对不同药物的耐药性不同,不同地区牛源MRSA对同一药物的耐药性也存在差别。3个地区分离的牛源MRSA均对青霉素、氨苄西林表现为耐药。此外还发现,伊犁地区的所有菌株均对四环素敏感。该调查显示,新疆奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌中MRSA普遍存在,MRSA的分离率可达22.3%,且对当前常用的抗菌素呈现多重耐药现象。 姜慧娇 苏艳 韦海娜 黄莹关键词:牛乳腺炎 金黄色葡萄球菌 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 MECA基因 耐药性 Kozak序列对金黄色葡萄球菌黏附因子FnBPA-A DNA疫苗诱导小鼠免疫应答的影响 被引量:5 2013年 黏附因子FnbpA(纤连蛋白结合蛋白A,Fibronectin binding protein A)是金黄色葡萄球菌表面的蛋白质成分,是该菌感染早期最重要的致病因子,可促进其对寄主组织的侵入,也是一个有潜力的免疫靶标。将牛乳源金黄色葡萄球菌中FnBPA基因的A功能区克隆至真核表达载体中,分别构建含Kozak序列和不含Kozak序列的FnBPA-A基因真核表达载体,重组质粒经鉴定测序正确后,免疫C57BL/6小鼠检测其抗体水平和淋巴细胞增殖情况,并对各组小鼠进行攻毒实验。检测的结果表明Kozak修饰的重组DNA在血清抗体效价(P<0.05)和免疫保护率方面均优于不含Kozak序列的重组DNA,在刺激淋巴细胞增殖方面Kozak修饰的重组DNA的刺激效果虽然也高于不经修饰的重组DNA,但是差异不显著(P>0.05)。根据总体的免疫效果来看,Kozak序列对增强FnBPA的重组DNA疫苗诱导的免疫应答起了不容忽视的作用。 苏艳 王世民 邵俊高 张宝江 韦海娜关键词:金黄色葡萄球菌 KOZAK序列 免疫应答 一种牛乳源金黄色葡萄球菌Efb蛋白及其制备方法和应用 本发明涉生物工程及免疫学领域。具体地说涉及牛乳源金黄色葡萄球菌来源的Efb蛋白的制备方法和其在免疫中的可能应用。从新疆地区患乳腺炎的牛乳中分离致病性金黄色葡萄球菌和从该菌基因组中克隆Efb基因,该基因具有序列表1中的氨基... 苏艳 刘云涛 韦海娜 姜慧娇 张宝江文献传递 FnBPA-A遗传多态性对牛源金黄色葡萄球菌与牛乳腺上皮细胞相互作用的影响 被引量:1 2016年 为研究FnBPA-A不同遗传多态性重组质粒抗血清对牛源金黄色葡萄球菌与牛原代乳腺上皮细胞粘附作用的影响。采集奶牛乳腺组织样品,用组织块种植法和胰酶消化法进行纯化和传代培养,并利用对乳腺上皮细胞特异性角蛋白18进行鉴定。将4株不同金黄色葡萄球菌分离株作用于纯化的乳腺上皮细胞,分析不同菌株粘附牛乳腺上皮细胞的能力。进而比较研究FnBPA-A不同遗传多态性重组质粒免疫后的抗血清对4株不同金黄色葡萄球菌分离株与牛乳腺上皮细胞粘附的抑制作用。结果表明,分离纯化获得了牛原代乳腺上皮细胞,分析了该乳腺上皮细胞的培养特性,不同金黄色葡萄球菌分离株对该细胞粘附的检测结果表明,4株不同分离株粘附牛乳腺上皮细胞的能力明显不同(P<0.05),其中GY278菌株粘附乳腺细胞的能力最强。FnBPA-A不同遗传多态重组质粒免疫后的抗血清抑制不同菌株粘附牛乳腺上皮细胞的能力也表现出明显的差异性,pV-819、pV-309、pV-20-2免疫组的抗血清对4株牛源金黄色葡萄球菌分离株的抑制作用高于其他免疫组。 王彩蝶 苏艳 王世民 韦海娜 苏玲玲关键词:金黄色葡萄球菌 牛乳腺上皮细胞 粘附 牛乳源金黄色葡萄球菌Efb基因的克隆与序列分析 被引量:1 2012年 对分离自新疆的奶牛乳源金黄色葡萄球菌,提取分离菌株的基因组DNA,参考GenBank中发表的细胞外纤维蛋白原结合蛋白(Efb)基因序列,设计特异性引物经PCR扩增得到长432bp的Efb基因。对新疆三个不同地区分离的9株金黄色葡萄球菌分别进行Efb基因的克隆和序列分析,对Efb蛋白的氨基酸序列分析结果表明:新疆三个不同地区Efb蛋白氨基酸的同源性为91.0%~100%,与其他地区分离菌株的同源性为86.5%~100%,差异性较小。该结果表明,Efb基因在该菌进化和流行过程中是保守的。 韦海娜 王世民 邵俊高 苏艳关键词:金黄色葡萄球菌 克隆