陈婕
- 作品数：8 被引量：19H指数：1
- 供职机构：南方医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 男性与女性AS临床特点的观察与分析
- 目的对男性与女性 AS 进行对比分析。方法选择我科2000～2005年诊治的 AS 患者 86例,其中男性60例,女性26例。对男性 AS 与女性 AS 临床表现进行比较,主要项目包括腰痛、外周关节受累、脊柱强直、颈椎受...
- 杨少锋吴启富肖长虹杨敏陈德超陈婕肖丹
- 文献传递
- 人CD4和HLA-DR0401表达载体转化扩增及其在L929细胞中的表达
- 2008年
- 背景:转基因小鼠的开发已成为类风湿关节炎动物模型的必然趋势,HLA-DR是通过何种分子机制导致类风湿关节炎的发病是目前研究热点。目的:拟对含有人CD4基因质粒pcDNA3-CD4和含HLA-DR0401基因质粒pLNCX2-DR*0401进行体外转化扩增,并观察其在小鼠成纤维细胞内的表达。设计、时间及地点:开放性实验,于2007-06/2008-01在南方医科大学中医药学院实验中心、南方医科大学动物实验中心分步完成。材料:含人CD4基因载体pcDNA3-CD4和含HLA-DR0401基因载体pLNCX2-DR*0401分别由美国宾西法尼亚大学微生物学系和马里兰巴尔的摩县大学生物化学系惠赠。大肠杆菌DH5α为北京天根生化科技有限公司产品。小鼠成纤维细胞(L929)细胞株为南京凯基生物科技发展有限公司产品。方法:取pcDNA3-CD4和pLNCX2-DR*0401质粒转化DH5α感受态菌,再接种到含氨苄青霉素的LB琼脂培养板进行抗性筛选培养,挑取阳性克隆菌落进行培养后抽提质粒,并取样进行限制性内切酶鉴定和测序。采用脂质体转染L929细胞,通过流式细胞仪和直接免疫荧光法对人CD4和HLA-DR0401的表达进行检测。主要观察指标:①质粒扩增情况。②质粒酶切及测序鉴定。③质粒转染L929细胞后的表达。结果:经转化扩增后,pcDNA3-CD4、pLNCX2-DR*0401质粒的纯度及浓度均较高。人CD4表达载体经酶切鉴定和测序证实目的基因插入正确且与GenBank一致,HLA-DR0401表达载体酶切鉴定正确,测序鉴定HLA-DRα基因正确。流式细胞仪检测转pcDNA3-CD4载体的细胞约61%呈阳性,直接免疫荧光结果显示人CD4在转基因细胞中得到表达,分布于胞膜及胞质内。流式细胞术检测仅有1%的转pLNCX2-DR*0401载体的细胞呈阳性,直接免疫荧光无特异性荧光检出。结论:成功转化并扩增了人CD4和HLA-DR0401表达载体,并转染小鼠成纤维细胞系L929,为下一步转基因鼠模型的构建奠定了实验基础。
- 陈婕肖长虹顾为望吴启富袁进吴清洪林继红
- 关键词：CD4基因测序体外转染
- 男性与女性AS临床特点的观察与分析
- 目的对男性与女性 AS 进行对比分析。方法选择我科2000～2005年诊治的 AS 患者86例, 其中男性60例,女性26例。对男性 AS 与女性 AS 临床表现进行比较,主要项目包括腰痛、外周关节受累、脊柱强直、颈椎受...
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- 文献传递
- 三水白虎汤含药血清对培养热痹滑膜细胞增殖和表达NO的抑制效应
- 目的观察三水白虎汤含药血清对体外培养关节炎滑膜细胞增殖和细胞表达一氧化氮 (NO)的抑制效应。方法采用体外细胞培养技术,含药血清法研究体外培养细胞的增殖,用细胞直接计数法观察细胞增殖,用硝酸还原酶法检测细胞上清液表达一氧...
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- 关键词：含药血清一氧化氮类风湿关节炎滑膜炎
- 文献传递
- 三水白虎汤含药血清对培养热痹滑膜 细胞增殖和表达NO的抑制效应
- 目的: 观察三水白虎汤含药血清对体外培养关节炎滑膜细胞增殖和细胞表达一氧化氮(NO)的抑制效应。
方法: 采用体外细胞培养技术,含药血清法研究体外培养细胞的增殖,用细胞直接计数法观察细胞增殖,用硝酸还原酶法检测...
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- 关键词：含药血清类风湿性关节炎滑膜细胞细胞增殖
- 文献传递
- 转基因小鼠模型在类风湿性关节炎中的研究进展
- 转基因技术是类风湿关节炎研究的一个新型的强有力的工具,已经被成功运用到小鼠类风湿关节炎动物模型中。本文概述了目前转基因技术在类风湿关节炎动物模型研究中的应用状况及发展前景。
- 肖长虹顾为望吴启富陈婕
- 关键词：小鼠模型类风湿关节炎动物模型转基因
- 文献传递
- 南蛇藤醇提物对类风湿关节炎滑膜增生和软骨侵蚀及降解的抑制作用被引量：19
- 2007年
- 目的观察南蛇藤醇提物对类风湿类关节炎(RA)滑膜组织增生和软骨侵蚀及降解的作用并探讨其机制,为RA的新药研究提供依据。方法将RA患者的关节滑膜和正常关节软骨移植到NOD/SCID小鼠体内建立人RA滑膜-软骨-NOD/SCID鼠嵌合体模型(NOD/SCID-HuRAg),4周后分别给予蒸馏水、南蛇藤醇提物(30mg/d)及来氟米特(500μg/d)灌胃,每日1次,持续4周。评价移植物中的滑膜增生、滑膜细胞对软骨的侵蚀和软骨细胞周围软骨降解的组织学积分,放免法检测血清TNF-α含量。原位杂交法观察滑膜的TNF-αmRNA表达,TUNEL法观察滑膜的细胞凋亡程度,自动图像分析系统分析结果。结果滑膜和软骨在SCID鼠体内生长良好,南蛇藤醇提物及来氟米特能显著降低滑膜增生(分别为2.00±0.76,2.25±0.89vs3.63±0.52)、软骨侵蚀(1.69±0.80,2.00±1.36vs3.75±0.53)和软骨降解(1.88±0.83,2.13±0.83vs3.63±0.74)的积分,并显著降低血清TNF-α含量(0.84±0.09,0.83±0.12vs0.99±0.11,ng/ml)。二种药物均显著增加了滑膜细胞的凋亡,南蛇藤醇提物还显著下调了滑膜组织中TNF-α的表达水平。结论南蛇藤醇提物能抑制SCID-HuRAg模型的滑膜增生,减轻滑膜的软骨侵蚀和软骨细胞介导的软骨降解,其作用的机制包括抑制RA滑膜组织的TNF-α的产生和促进滑膜细胞凋亡。南蛇藤醇提物的作用效果与来氟米特相似,但在抑制RA滑膜TNF-α表达方面南蛇藤醇提物强于来氟米特。
- 肖长虹顾为望张嘉宁陈国强黄世峰杨敏陈德超陈婕肖丹
- 关键词：类风湿关节炎滑膜软骨南蛇藤
- 人CD4和HLA-DR0401表达载体的转化扩增及其在L929细胞中的表达
- 目的与意义:
类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis，RA)是一种慢性进行性的自身免疫性疾病。由于RA发病机制未明，目前尚无令人满意的具有确切疗效且毒副作用小的药物。为了进一步探讨RA的病因、病...
- 陈婕
- 关键词：类风湿性关节炎自身免疫性疾病HLA-DR基因
- 文献传递
