邱少辉
- 作品数:38 被引量:47H指数:4
- 供职机构:中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域:医药卫生文学生物学更多>>
- 甲乙型肝炎联合疫苗诱导小鼠免疫应答的研究
- 目的 比较甲乙型肝炎联合疫苗与单价重组乙型肝炎疫苗、甲型肝炎灭活疫苗诱导小鼠细胞免疫和体液免疫应答特点.方法 4组小鼠(BALB/c,H-2d)皮下接种甲乙型肝炎联合疫苗、单价重组乙型肝炎疫苗及甲型肝炎灭活疫苗,分别于免...
- 胡忠玉何鹏邱少辉方鑫李河民梁争论
- 关键词:甲型肝炎乙型肝炎疫苗抗-HBS
- 不同种类乙型肝炎表面抗原诱导小鼠早期细胞免疫应答的比较被引量:2
- 2011年
- 目的 比较不同表达系统来源的乙型肝炎(乙肝)表面抗原(HBsAg)免疫小鼠诱导早期脾淋巴细胞抗原特异性细胞免疫应答的特点,探讨影响乙肝疫苗保护效果的因素.方法 3种HBsAg(汉逊酵母、CHO细胞和血源)分别皮下接种不同组小鼠(BALB/c,H-2d),每只3μg,于免疫后4d分离脾单个核细胞(MNC),经细胞分选仪(MACs)分选后,获得纯度高于90%的CD4+和CD8+T细胞,应用ELISPOT测定MNC、CD4+和CD8+T细胞体外刺激后所产生的细胞因子IFN-γ、IL-2斑点数( SFC).结果 细胞分选后,汉逊抗原诱导CD8+T细胞分泌IFN-γ的水平和CD4+T细胞分泌IL-2水平均显著高于CHO抗原组(8/10、2/10,P=0.035;6/10、0/10,P=0.005).汉逊抗原组与血源抗原组CD8+T细胞经体外刺激诱导IFN-y全部阳转(10/10),但分泌水平上汉逊抗原组显著高于血源抗原组(t=2.479,P=0.035);汉逊抗原组诱导CD4+T细胞IFN-γ阳转率及分泌水平均显著高于血源抗原组(10/10、4/10,P=0.005;t=3.967,P=0.003).结论 乙肝抗原免疫小鼠4d即可诱导细胞免疫应答,且汉逊酵母抗原早期诱导抗原特异性IFN-γ、IL-2的能力显著高于CHO和血源抗原,与其临床考核母婴传播阻断HBV保护率显著优于CHO和血源乙肝疫苗相一致,为及时接种乙肝疫苗的必要性和高危新生儿选择接种乙肝疫苗的类型提供依据.
- 胡忠玉何鹏方鑫邱少辉李河民梁争论
- 关键词:乙型肝炎表面抗原细胞免疫应答
- 乙肝表面抗原细胞免疫活性及聚乳酸微球佐剂作用的初步研究
- 邱少辉
- 重组乙型肝炎疫苗中庆大霉素残留量检测相关影响因素研究
- 目的:研究酶联免疫法测定乙型肝炎疫苗中庆大霉素含量的相关影响因素.方法:使用市场化庆大霉素酶联免疫试剂盒对三种表达系统的乙型肝炎疫苗和原液进行庆大霉素回收率测定,同时对不同个来源的庆大霉素标准品进行对比,对铝佐剂和标准品...
- 邱少辉方鑫何鹏梁争论沈琦胡忠玉
- 关键词:乙型肝炎疫苗酶联免疫法
- 文献传递
- 乙型肝炎疫苗加强免疫中细胞免疫应答相关因素的研究
- 目的:探讨现有铝佐剂乙肝疫苗不同加强免疫程序及检测时间时细胞免疫的差异。方法:采用三种疫苗剂量,两种加强免疫程序,即初免后14天加强免疫和初免后28天加强免疫,分别于加强免疫后7天和14天分离小鼠脾单个核细胞(MNC),...
- 邱少辉方鑫何鹏胡忠玉梁争论
- 关键词:乙肝疫苗免疫ELISPOT
- 不同方法测定生物制品中硫柳汞含量的比较被引量:6
- 2010年
- 目的比较原子吸收分光光度法(简称仪器法)与滴定法测定生物制品中硫柳汞含量的精密性和准确性,为仪器法列入《中国药典》(2010版)提供依据。方法由不同实验室分别采用仪器法与滴定法测定不同硫柳汞含量的样品,并进行精密性和准确性比较。结果不同实验室在测定硫柳汞含量为65.8、25.0及1.5μg/ml的样品时,仪器法的变异系数均小于滴定法,回收率较滴定法更接近100%;在测定硫柳汞含量为100μg/ml的样品时,两种方法回收率均不理想,但仪器法优于滴定法。结论仪器法测定生物制品中硫柳汞含量的精密性和准确性均优于滴定法,但仍需进一步完善。
- 何鹏邱少辉郭玉芬饶洪冲朱征宇金于兰秦洁潘海龙洪小栩胡忠玉梁争论
- 关键词:硫柳汞滴定法原子吸收分光光度法
- 重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)冻干参考品的研制被引量:2
- 2012年
- 目的制备重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)冻干参考品,用于重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)的效力评价。方法选取检定合格的重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)原液,经协作标定表面抗原蛋白含量后,加入氢氧化铝佐剂和冻干保护剂,冷冻干燥制备重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)冻干参考品,并按《中国药典》三部(2010版)要求进行各项检定。经10次独立试验测定冻干参考品小鼠效力,采用Reed-Münch计算ED50值;将冻干参考品置4℃(8周)、37℃(4和8周)后分别检测疫苗效力,分析其稳定性,依据Q10法进行效期推测;并对2个生产企业10批疫苗进行效力测定,分析其适用性。结果制备的冻干参考品各项指标均符合规定,小鼠ED50均值为0.183μg,CV为50.5%;该CHO细胞效力冻干参考品蛋白含量定为20μg/ml,规格为10μg/0.5 ml;冻干保护剂、冻干工艺对乙型肝炎疫苗(CHO细胞)的效力影响较小,冻干参考品在37℃放置不同时间,效力变化不明显,表明冻干参考品稳定性较好,有效期约为7年;10批疫苗中,不合格率为10%,表明该参考品可用于乙型肝炎疫苗(CHO细胞)效力质控。结论制备的冻干参考品可作为重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)效力检定的质控参考品。
- 邱少辉方鑫何鹏梁争论张红霞张卫婷赵坤福李德桂周根喜郭玉芬钟熙胡忠玉
- 关键词:乙型肝炎疫苗CHO细胞参考品
- 重组乙型肝炎疫苗和乙型肝炎表面抗原诱导细胞免疫应答被引量:3
- 2008年
- 目的 探讨重组乙型肝炎(乙肝)疫苗和汉逊酵母菌表达的乙肝表面抗原(rHBsAg)诱导动物和人体细胞免疫应答的动态变化。方法 应用不同剂量rHBsAg免疫小鼠(BALB/c,H-2^d),酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测小鼠脾单个核细胞(MNC)体外刺激诱生IFN-γ的水平;单剂rHBsAg免疫后不同时间检测MNC、CD8^+T淋巴细胞产生IFN-γ水平;同时测定免疫后不同时间细胞毒T淋巴细胞反应(CTL)活性;检测免疫单剂和多剂乙肝疫苗后小鼠MNC分泌IFN-γ、IL-2、IL-5和抗-HBs抗体水平;对乙肝感染标志阴性的4名成年人按0、1、2个月程序接种乙肝疫苗,检测免疫后外周血单个核细胞(PBMC)、CD;T淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-2和IL-4水平以及抗体动态。结果 应用ELISPOT法,汉逊rHBsAg免疫小鼠7d时,可检测到IFN-γ应答,14d时达到高峰;CTL在免疫后7d时可检出,峰值位于28d。在1~8ug免疫剂量范围内,MNCs IFN-γ免疫应答与剂量呈显著正相关(阳转率:r=0.951,P=0.049〈0.05;SFC:r=0.996,P=0.000〈0.05),在1~4ug免疫剂量范围内,CD8^+T淋巴细胞的IFN-γ与剂量也呈显著正相关(r=0.999,P=0.025〈0.05);三剂乙肝疫苗免疫小鼠诱生细胞免疫和体液免疫应答水平均显著高于单剂(P值均〈0.05);成年人接种汉逊乙肝疫苗后不同个体间细胞免疫和体液免疫应答的模式不同,IL-2、IL-4应答与个体抗体滴度有关。结论 用ELISPOT法成功测定了汉逊HBsAg免疫小鼠后不同淋巴细胞的细胞免疫剂量效应和CTL时间动态变化,并分析了成年人的细胞免疫应答特点,为规范疫苗细胞免疫评价提供了基础。
- 胡忠玉何鹏张瑞方鑫朱凤才邱少辉李河民汪华梁争论庄辉
- 关键词:乙型肝炎疫苗乙型肝炎表面抗原
- 国产与进口重组酵母乙型肝炎疫苗免疫小鼠早期细胞免疫应答的比较被引量:5
- 2014年
- 目的比较国产与进口重组酵母乙型肝炎疫苗免疫小鼠早期细胞免疫应答的差异。方法取批签发合格的国产疫苗1和2(酿酒酵母)、进口疫苗1(酿酒酵母)、国产疫苗3和4(汉逊酵母)、进口疫苗2(汉逊酵母)各3批,经背部皮下免疫BALB/c小鼠,3μg/(100μl·只),于免疫后7 d,处死小鼠,无菌取脾,制备脾细胞悬液,分离脾单个核细胞(mononuclear cell,MNC)。采用酶联免疫斑点(enzyme linked immunospot assay,ELISPOT)法测定小鼠MNC体外接受HBsAg刺激后产生的抗原特异性细胞因子IFNγ、IL-2、IL-4和IL-5水平及体外接受MHCⅠ类多肽S28-39刺激后产生的IFNγ水平。结果小鼠免疫酿酒酵母乙肝疫苗后,以HBsAg刺激MNC,国产疫苗1诱导产生的IFNγ、IL-2和IL-4水平均明显高于国产疫苗2和进口疫苗1,国产疫苗1和2诱导的IL-5水平均明显高于进口疫苗1(P均<0.05);以S28-39刺激MNC,3种疫苗诱导产生的IFNγ水平差异均无统计学意义(P>0.05)。小鼠免疫汉逊酵母乙肝疫苗后,以HBsAg或S28-39刺激MNC,进口疫苗2诱导的IFNγ和IL-4水平均明显高于国产疫苗3(P<0.05);3种汉逊酵母乙肝疫苗诱导的IL-2和IL-5水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论国产重组酵母乙肝疫苗诱导早期细胞免疫应答能力较好。
- 何鹏邱少辉方鑫钟熙梁争论沈琦胡忠玉
- 关键词:乙型肝炎疫苗酶联免疫斑点法细胞免疫
- 氢氧化铝佐剂对重组乙型肝炎疫苗诱导的免疫相关细胞因子的影响被引量:2
- 2015年
- 目的分析氢氧化铝佐剂对乙型肝炎表面抗原、重组乙型肝炎疫苗诱导的早期固有免疫反应和加强免疫后获得性免疫反应的影响。方法单针免疫,分为4组,每组15只:经BALB/c小鼠背部皮下注射重组乙型肝炎抗原(20μg/ml)、重组乙型肝炎疫苗(汉逊酵母,10μg/0.5 ml)、氢氧化铝佐剂(0.5 mg/ml),100μl/只,同时设生理盐水对照组,于免疫后3、24、48、96、168 h,收集处理外周全血及血清。加强免疫,分为2组,每组9只:相同方法免疫疫苗及抗原,1μg/(100μl·只),于初免后第14天,按照相同剂量加强免疫1次,于加强免疫后24、48、168 h,采集外周血分离血清。使用Luminex方法测定全血中相关因子的m RNA表达及血清中蛋白类细胞因子的分泌水平。结果单针免疫后24 h,3个免疫组多种细胞因子m RNA表达达到高峰,其中IRF7在铝佐剂和乙肝疫苗组中的表达显著高于乙肝抗原组(P<0.05)。加强免疫后,乙肝疫苗组IL-5、IL-6和IL-12p70在24 h时分泌水平最高,之后逐渐下降;CXCL10、IFNγ和MIP-1α则随时间持续升高;乙肝抗原组中细胞因子分泌量及持续时间均低于乙肝疫苗组。结论氢氧化铝佐剂可单独或协同抗原,共同增强乙肝疫苗诱导的早期固有免疫反应,加强免疫后,铝佐剂促进多种细胞因子的分泌。
- 邱少辉方鑫张然何鹏梁争论郑直胡忠玉
- 关键词:氢氧化铝佐剂乙型肝炎疫苗细胞因子