邢莹
- 作品数:134 被引量:327H指数:9
- 供职机构:郑州大学更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划河南省自然科学基金河南省医学科技创新人才工程项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 端粒酶逆转录酶基因修饰人骨髓间质干细胞的实验(英文)被引量:1
- 2007年
- 背景:人骨髓间充质干细胞经过有限次的细胞传代后,就会停止增殖,发生衰老和死亡。有研究表明,端粒与细胞寿命的控制密切相关,是否可通过外源性人端粒酶逆转录酶基因的异位表达,诱导人骨髓间充质干细胞的端粒酶活性,维持端粒长度的稳定,从而延长人骨髓间充质干细胞的生命周期并保持其多潜能分化特性?目的:观察外源性人端粒酶逆转录酶基因的异位表达对人骨髓间质干细胞端粒酶活性及细胞生命周期的影响。设计:重复测量实验。单位:郑州大学医学院干细胞研究中心。材料:实验于2003-10/2005-12在郑州大学医学院干细胞研究中心完成。人骨髓间质干细胞采自郑州大学第一附属医院及第三附属医院小儿外科和门诊20名健康志愿者。增强型绿色荧光蛋白-C1质粒和增强型绿色荧光蛋白-人端粒酶逆转录酶质粒由加拿大Dr.ChantalAutexier馈赠。DH5α菌株由郑州大学医学院重点分子医学实验室侯卫红博士馈赠。方法:无菌条件下,抽取健康志愿者胸骨骨髓2mL,经离心、洗涤及传代培养后备用。①阳离子脂质体转染及阳性克隆的筛选和扩增结果:将第5代人骨髓间充质干细胞接种至24孔培养板中,将携带有增强型绿色荧光蛋白报告基因和人端粒酶逆转录酶目的基因的质粒pEGFP-人端粒酶逆转录酶通过脂质体转染法转入人骨髓间充质干细胞中,转染共分4组:正常对照组、脂质体组、增强型绿色荧光蛋白-C1质粒组、增强型绿色荧光蛋白-人端粒酶逆转录酶质粒组,并用G418筛选法进行抗性克隆的筛选与扩增。②人骨髓间充质干细胞转染前后人端粒酶逆转录酶mRNA的表达及端粒酶活性的检测:通过RT-PCR和PCR-ELISA对选用转染增强型绿色荧光蛋白-人端粒酶逆转录酶质粒的第5代人骨髓间充质干细胞(以下简称为转H人骨髓间充质干细胞第5代)、转染增强型绿色荧光蛋白-C1质粒的第5
- 李克刘瑞敏韩雪飞马岚邢莹
- 关键词:间质细胞端粒逆转录酶
- 大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化后自噬水平的变化被引量:4
- 2015年
- 目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经细胞分化前后自噬水平的变化,进一步研究BMSCs神经分化机制。方法:原代培养大鼠BMSCs,三代后用L-DMEM(2%DMSO+200μmol/L BHA)诱导其向神经细胞分化,采用免疫细胞化学方法检测神经元特异标记物NSE表达,采用RT-PCR方法检测自噬相关基因LC3B、Beclin1、Atg5、Atg7、Atg10的表达,用Western blot及流式细胞术检测了自噬标志蛋白LC3B的表达。结果:大鼠BMSCs传3代后,贴壁的BMSCs可达90%以上,类成纤维细胞样梭形生长,经诱导剂作用5 h后,细胞呈现神经细胞样改变,NSE阳性率为(83±5)%。RT-PCR结果表明BMSCs向神经细胞分化后LC3B,Beclin1,Atg5,Atg7,Atg10的表达升高,流式细胞术检测LC3B的平均荧光强度升高,Western blot结果表明神经分化后LC3B-Ⅱ表达增加。结论:大鼠BMSCs向神经细胞分化后自噬水平增加。
- 李博黄春田李彩芳段萍韩雪飞鄢文海邢莹
- 关键词:骨髓间充质干细胞自噬分化神经细胞
- 川芎嗪对蛙心收缩力的影响及其机制探讨被引量:3
- 2004年
- 目的 探讨不同剂量的川芎嗪对蟾蜍心脏的作用及其相关机制。方法 采用离体蛙心灌流法观察川芎嗪对蟾蜍心脏收缩力的影响。结果 在正常、无钙和高钙任氏液中 ,4mg/L的川芎嗪不能够影响蟾蜍心脏的收缩力 ;在正常和高钙任氏液中 ,4 0 0mg/L的川芎嗪明显降低蟾蜍心脏的收缩力 ,且川芎嗪在高钙溶液中的作用明显强于正常任氏液组 ;而在无钙任氏液中 ,4 0 0mg/L的川芎嗪不能够影响蟾蜍心脏的收缩力。结论 小剂量川芎嗪不能够影响蟾蜍心脏的收缩力 ,大剂量川芎嗪可以通过抑制细胞外的Ca2 +
- 赵文超王志举邢莹
- 关键词:川芎嗪药理机制心脏收缩力
- Wnt信号通路诱导胚胎干细胞向皮层神经元的分化
- 目的 经典Wnt信号通路对于胚胎皮质神经元的产生和类型分化具有重要影响,本实验拟在体外培养条件下,观察Wnt信号通路在胚胎干细胞向皮质神经元/前体细胞的诱导分化中的可能作用。方法 通过类胚体的方法诱导小鼠胚胎干细胞的悬浮...
- 景莹李博鄢文海邢莹
- 关键词:小鼠胚胎干细胞神经元发生
- 川芎嗪增加大鼠远端结肠阴离子分泌的基侧膜机制(英文)被引量:6
- 2003年
- 本研究用短路电流技术来观察在川芎嗪作用下,电解质在大鼠远端结肠上皮细胞的转运及其细胞机制。在新鲜分离的结肠上皮的基侧膜加入川芎嗪,能产生较大的短路电流。用粘膜下神经元阻断剂——河豚毒素预作用于结肠上皮,不影响随后的川芎嗪所产生的短路电流,前列腺素合成抑制剂indomethacin预作用可使随后的川芎嗪产生的短路电流减少55.2%。在结肠上皮的顶膜加入C1-通道阻断剂。DPC和glibenclamide,能完全阻断川芎嗪产生的短路电流。Bumetanide,基侧膜钠、钾、氯共转运体阻断剂能抑制川芎嗪引起的短路电流的85.2%,而结肠上皮细胞基侧膜的非选择性钾通道阻断剂Ba2+能阻断90%以上的短路电流,说明基侧膜的钠、钾、氯共转运体和钾通道在川芎嗪引起的短路电流中起着重要的作用。上述结果表明,川芎嗪刺激大鼠远端结肠上皮细胞分泌C1-是通过上皮细胞顶膜C1-通道和基侧膜的钠、钾、氯共转体和K+通道介导的。
- 邢莹何琼朱进霞陈小章
- 关键词:川芎嗪结肠上皮K^+通道
- 非诺贝特对LPC诱导脐静脉内皮细胞增殖、凋亡及eNOS基因表达的影响被引量:6
- 2006年
- 目的:探讨非诺贝特对LPC诱导的脐静脉内皮细胞增殖、凋亡及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达的影响。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),根据非诺贝特不同浓度分为正常对照组、LPC组、低浓度非诺贝特(10μmol/L)组、中浓度非诺贝特(50μmol/L)组、高浓度非诺贝特(100μmol/L)组,根据非诺贝特不同干预时间分为正常对照组、LPC组、非诺贝特(50μmol/L)干预6h组、12h组、24h组、48h组进行实验。分别观测不同浓度及不同时间非诺贝特内皮细胞增殖、凋亡、NO浓度及eNOS mRNA表达的变化。结果:与正常对照组比较,LPC抑制内皮细胞增殖,促进细胞凋亡,并使HUVECs eNOS mRNA表达降低,NO合成减少。非诺贝特可干预LPC对内皮细胞的作用,使内皮细胞增殖增强,细胞凋亡减少,eNOS mRNA表达升高,NO合成增加,且其作用呈时间-效应、浓度-效应依赖关系。结论:非诺贝特可改善LPC对HUVECs的影响,使内皮细胞增殖增强,凋亡减少,eNOSmRNA表达升高,NO合成增加,从而起到抗动脉硬化作用。
- 孙国举谢秀梅邢莹鄢文海杨天崙余国龙
- 关键词:非诺贝特人脐静脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶
- 川芎嗪对抗原诱发致敏豚鼠气管平滑肌环的舒张作用
- 2005年
- 目的:观察川芎嗪对过敏原诱发的哮喘豚鼠离体气管平滑肌环收缩的影响及其相关机制。方法:采用卵蛋白致敏法建立豚鼠哮喘动物模型,每只豚鼠制备5~7个气管平滑肌环,悬挂于恒温浴槽中,并将其与力位移换能器相连来纪录气管环张力的变化,所有标本分为正常KH液和无钙KH液2大组。正常KH液组又分为卵蛋白组、10mmol/L川芎嗪+卵蛋白组、30mmol/L川芎嗪+卵蛋白组、100mmol/L川芎嗪+卵蛋白组、300mmol/L川芎嗪+卵蛋白组、thapsigargin(TSG)+卵蛋白组、TSG+川芎嗪(100mmol/L)+卵蛋白组。无钙KH液组分为卵蛋白组和川芎嗪(100mmol/L)+卵蛋白组。结果:①卵蛋白组平滑肌环收缩产生的张力为(59.7±8.5)×10-6N,分别预先加入30mmol/L、100mmol/L、300mmol/L的川芎嗪20min后,再加入卵蛋白,平滑肌环产生的张力分别降低至(44.1±5.5)×10-6N、(20.7±20.4)×10-6N、(10.0±1.1)×10-6N(P均<0.05),10mmol/L的川芎嗪对卵蛋白的作用无明显影响(P>0.05);②去除溶液中的Ca2+后,再加入卵蛋白,平滑肌环收缩产生的张力为(10.5±1.9)×10-6N,预先加入100mmol/L的川芎嗪后,卵蛋白诱导产生的平滑肌环的收缩力无明显改变(P>0.05);③预先加入TSG(10mmol/L)40min后,再加入卵蛋白,平滑肌环收缩产生的张力为(27.3±3.4)×10-6N,分别预先加入TSG和100mmol/L的川芎嗪后,再加入卵蛋白诱导,平滑肌环的收缩力减少至(6.5±1.1)×10-6N(P<0.05)。结论:①川芎嗪可能通过抑制细胞膜上的钙通道来抑制抗原引起的哮喘豚鼠离体气管平滑肌的收缩作用。②抗原可能通过细胞外的Ca2+内流和细胞内肌浆网对Ca2+的释放来促进哮喘豚鼠离体气管平滑肌的收缩。
- 王志举赵文超涂会引阎明乔鹏王书春邢莹
- 关键词:川芎嗪气管平滑肌
- GLP-1 (7-36) NH2促进胰岛素分泌的机制探讨
- <正>目的:观察GLP-1(7-36)NH2对胰岛素分泌的影响,进一步探讨GLP-1(7-36)NH2 促进胰岛素分泌的机制。材料和方法:体外分离培养新生SD大鼠胰岛,用放射免疫分析方法(γ计数)检测GLP-1(7-36...
- 刘素芳邢莹姚运纬
- 文献传递
- 脐血单个核细胞培养前后神经细胞特有标志物的变化被引量:11
- 2003年
- 目的 :探讨脐血单个核细胞培养前后神经细胞特有标志物的表达差异。方法 :采用RT PCR方法对脐血单个核细胞培养前后nestin ,神经丝亚单位M(NF M)及微管相关蛋白 2 (MAP2mRNA)的表达进行检测。结果 :nestin ,NF M及MAP2mRNA在培养前的脐血单个核细胞中表达呈阳性 ,培养后 3者表达增强。结论 :直接分离的脐血单个核细胞中存在着表达神经细胞特有分子的细胞 ,培养后 。
- 邢莹鄢文海刘计荣龚光明许燕张莹曹孟德
- 关键词:骨髓移植脐血单个核细胞神经细胞微管相关蛋白-2
- 骨髓间充质干细胞向神经细胞分化中相关基因DNA甲基化状态的研究
- 目的 检测骨髓间充质干细胞(MSC)向神经细胞分化前后和脑组织中转录因子OCT4、微管相关蛋白TAU和神经特异性烯醇化酶NES基因启动子区甲基化状态,探讨DNA甲基化调控在MSC向神经细胞分化中的作用.方法 体外分离培养...
- 鄢文海张英段萍韩雪飞刘素芳许燕邢莹
- 关键词:骨髓间充质干细胞DNA甲基化