赵春澎
- 作品数：60 被引量：189H指数：9
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 一种抗原、重组表达载体、抗体及制备方法和应用
- 本发明涉及生物科学和检测技术领域，具体涉及一种抗原、重组表达载体、抗体及制备方法和应用。所述抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，用所述抗原免疫新西兰大白兔；采血，收集抗血清，获得昆虫COXIV多克隆抗体。本发明...
- 耿少雷赵小杰王天云李卫东贾岩龙赵春澎米春柳常新见曹祥祥
- 一种提高CHO细胞重组蛋白表达水平的方法
- 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种提高CHO细胞重组蛋白表达水平的方法。包括以下步骤：（1）将目的基因重组载体与含细胞周期调控相关基因<I>p18</I>和/或调控细胞生长的基因<I>aFGF</I>的共转基因重组...
- 王小引王天云张玺易丹丹林艳赵春澎贾岩龙
- 坚持理论联系实际原则对生物化学教学改革的指导作用被引量：3
- 2010年
- 本文分析了生物化学教学中存在的问题，提出必须坚持理论联系实际原则，全面改革生物化学教学。具体措施为：明确生物化学教学目标，合理安排教学内容；密切联系实际，激发学生学习兴趣，提高课堂教学效果；优化实验教学内容，开展创新实践，培养学生实践能力和创新意识；建立多元化考试方式，改革考试内容，注重实际应用能力。最后，对生物化学教学改革的实践效果进行了分析。
- 石如玲张煜张艳芳赵春澎王天云杨保胜谷兆侠
- 关键词：生物化学教学改革
- 催化系统对聚丙烯酰胺凝胶聚合的影响被引量：2
- 2005年
- 目的探讨不同的催化系统对不同酸碱条件下聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)凝胶聚合的影响。方法采用不同剂量的过硫酸铵(AP)四甲基乙二胺(TEMED)催化系统组合和过硫酸铵(AP)硫酸亚铁(FeSO4)-抗坏血酸(VC)催化系统组合,进行碱性PAGE和酸性PAGE,观察各组凝胶聚合所需时间。结果AP-TEMED在碱性电泳中应用,0.05%～0.1%的AP和0.1%的TEMED用量,凝胶聚合在0.5h内完成;在酸性电泳中应用时,0.2%的AP和0.3%～0.4%的TEMED用量,凝胶聚合在2h内完成。AP-VC-FeSO4催化系统应用于酸性电泳时设计的10组用量,48h均未发现凝胶形成。结论AP-TEMED催化系统在碱性PAGE中的效果好于酸性PAGE。在碱性电泳中,以0.05%～0.1%的AP和0.1%的TEMED为宜;在酸性电泳中,以0.2%的AP和0.3%～0.4%的TEMED为宜。
- 赵春澎时岚孙斐许兵红谷兆侠赵丁奎
- 关键词：聚丙烯酰胺凝胶电泳硫酸亚铁
- 不同启动子和MAR组合对重组CHO细胞转基因表达的影响被引量：1
- 2018年
- 目的分析不同启动子与核基质结合区(MAR)组合对中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中转基因表达的影响。方法将β-珠蛋白MAR(gMAR)与人巨细胞病毒早期启动子(CMV-IE)、猿猴空泡病毒40(SV40)启动子组合,构建两种不同启动子与gMAR组合的表达载体。转染CHO细胞,48h后观察增强型绿色荧光蛋白(eGFP)的瞬时表达情况;G418筛选稳定转化的细胞株,流式细胞术分析稳定CHO细胞eGFP基因的表达水平,实时荧光定量PCR(qPCR)分析eGFP基因的相对拷贝数。结果不含gMAR的表达载体,CMV-IE启动子eGFP表达明显强于SV40启动子;gMAR能提高CMV-IE启动子eGFP表达水平,但在SV40启动子中并未表现出提高作用。两侧含gMAR的表达载体比一侧含有gMAR的表达载体CMV-IE启动子eGFP表达荧光强;G418加压筛选后,含SV40启动子的gMAR表达载体eGFP基因表达不稳定,荧光逐渐减弱,因此,后期只对稳定表达eGFP基因的CMV-IE启动子表达载体进行流式细胞术和qPCR分析。流式细胞术检测结果显示,一侧含有与两侧含有gMAR的CMV-IE启动子表达载体eGFP基因表达量比不含gMAR的表达载体分别提高9.85倍和12.94倍;qPCR结果显示,以不含gMAR的载体的eGFP基因拷贝数为1,一侧含有与两侧含有gMAR的CMV-IE启动子表达载体eGFP基因相对拷贝数为3.68和9.25。结论 CMV-IE启动子活性强于SV40启动子;gMAR能提高CMV-IE启动子外源基因的表达水平,其机制可能与增加基因拷贝数相关。
- 李琴王小引赵春澎田政伟徐丹华王天云张俊河
- 关键词：核基质结合区CHO细胞
- 附着型慢病毒载体、制备方法及应用
- 本发明公开了一种附着型慢病毒载体、制备方法及应用，属于生物技术领域。本发明中附着型慢病毒载体由pLRZM载体与包装系统共同转染宿主细胞获得，pLRZM载体为pLVX-IRES-ZsGreen1载体中土拨鼠肝炎病毒转录后调...
- 王天云贾岩龙张俊河赵春澎李琴王小引
- 重组丝氨酸蛋白酶抑制剂蛋白的密码子优化及原核表达被引量：2
- 2020年
- 目的探讨重组丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)蛋白的原核表达条件,为研究其功能提供实验依据。方法通过基因重组技术,将编码Vaspin蛋白的密码子优化后插入带有His标签的pET-28a载体中,构建原核表达载体pET-28a-Vaspin,转化BL21感受态细菌,分别给予不同诱导时间(6、8、10、12、15、20 h)、不同诱导温度(32、37、42℃)、不同浓度诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)(0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 mmoL·L^-1)进行培养,诱导产物经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳进行鉴定,表达出来的Vaspin蛋白进行镍离子亲和层柱纯化。结果成功构建重组Vaspin蛋白的原核表达载体,经IPTG诱导、电泳分析,在IPTG浓度为1 mmol·L^-1、诱导温度37℃、诱导时间为15 h且转化优化密码子的菌体沉淀中出现相对分子质量为48000的特异条带,与Vaspin相对分子质量一致,经His标签纯化,灰度扫描分析显示,Vaspin蛋白的纯度为95%。结论Vaspins蛋白在IPTG终浓度为1 mmol·L^-1、37℃、培养时间15 h条件下可成功表达并纯化,且该条件下实验具有重复性。
- 陈雪利胡婧婧王天云赵春澎王小引
- 关键词：丝氨酸蛋白酶抑制剂密码子优化原核表达蛋白纯化
- 小鼠感染伯氏疟原虫后TLR2、9、11及其下游因子表达量的变化被引量：3
- 2012年
- 目的了解小鼠感染伯氏疟原虫后Toll样受体(TLRs)的免疫作用。方法用伯氏疟原虫感染小鼠,采用RT-PCR、ELISA等方法测定TLRs的mRNA和下游炎症因子血清水平。结果小鼠感染伯氏疟原虫后TLR2、9、11的mRNA分别升高3、3.5和6倍;在感染后96h,IL-6、TNF-α及IL-12均达到峰值,分别为10 023U/ml、485pg/ml和186pg/ml;IL-18持续升高,在144h为4 225pg/ml。结论小鼠感染伯氏疟原虫后TLRs mRNA表达上调,并增强下游炎症因子的表达。
- 孙斐赵春澎许兵红
- 关键词：TOLL样受体RT-PCR小鼠
- 老年大鼠脑脂肪酸含量与脂肪酸β-氧化的关系
- 2011年
- 目的比较老年及青年大鼠脑脂肪酸含量、肝脏脂肪酸β-氧化关键酶表达水平的不同,探讨衰老时脂肪酸含量的变化与脂肪酸β-氧化功能的关系。方法老年组和青年组大鼠各10只,用气相色谱法分析脑皮质脂肪酸含量,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定过氧化物酶体β-氧化关键酶脂酰辅酶A氧化酶(AOX1)、线粒体β-氧化关键酶肉碱脂酰转移酶1(CPT1)及过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)mRNA的表达水平,用游离脂肪酸试剂盒测定血清游离脂肪酸(FFA)含量。结果与青年组相比,老年组大鼠脑内C180、C204、C226含量降低(P<0.05或P<0.01),脑内C161、C181、C200、C201、C221、C240、C241含量升高(P<0.05或P<0.01),肝脏AOX1、CPT1、PPARαmRNA水平降低(P<0.05),血清总FFA含量降低(P<0.05)。结论衰老时大鼠脑脂肪酸含量变化的原因可能由线粒体和过氧化物酶体β-氧化功能降低所致。
- 杨磊石如玲张煜赵春澎付云黄艳梅
- 关键词：脂肪酸线粒体过氧化物酶体老年
- 一种人类及哺乳动物细胞附着体表达载体、构建方法和应用
- 本发明公开了一种人类及哺乳动物细胞附着体表达载体、构建方法和应用，属于基因工程与基因治疗技术领域。本发明以pEGFP‑C1为出发载体构建含核基质结合区特征性序列(如SEQ ID NO:1所示)的附着体表达载体，并以EF‑...
- 王小引王天云杜爱玲贾岩龙赵春澎张俊河张玺 高向征 白可可孙彩霞
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