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长滩军团菌荧光原位杂交探针的设计研究: 2014年; 目的设计一条特异性的长滩军团菌荧光原位杂交探针,并验证其特异性与敏感度,初步建立长滩军团菌的荧光原位杂交检测法。方法以长滩军团菌16S rRNA特异性位点设计杂交探针。在数据库中对探针序列进行特异性检验,优化反应条件,以军团菌标准菌株和环境分离菌株验证探针的特异性,并以模拟水样验证探针灵敏度。结果生物信息学分析表明,设计的探针LEG long序列与长滩军团菌16S rRNA序列完全配对,与其他军团菌种均存在1个碱基以上的错配。菌株验证实验证明LEG long探针可与长滩军团菌的标准菌株和环境分离株特异性杂交,与其他军团菌种和非军团菌属菌株无杂交信号。探针检测灵敏度可达1.49×103 CFU/ml。结论本研究设计的探针LEG long可用于长滩军团菌的高特异性和高灵敏度检测。; 顾全胡朝晖赵利伟范晓姗严慧朱庆义; 关键词：荧光原位杂交探针

半巢式聚合酶链反应酶切分型快速检测军团菌及其应用: 本发明公开了一种半巢式聚合酶链反应酶切分型快速检测军团菌及其应用。检测方法是：首先，增加一对引物Leg 226F和Leg 226R；接着，以386bp扩增片段为模板，进行第二次PCR扩增，得226bp片段产物；最后，对2...; 赵利伟朱庆义胡朝晖詹晓勇刘洋敏; 文献传递

实时荧光定量PCR及其在军团菌检测中的应用被引量：3: 2011年; 军团菌是一种兼性胞内寄生菌,可入侵人体巨噬细胞,并在其中繁殖,是引起人类军团菌病的重要病原体。目前已确认军团菌有50多个种,70多个血清型,其中20多种与人类疾病相关[1]。由于军团菌种类繁多,常规的检测鉴定方法已不能满足需要。近年来,随着分子技术特别是PCR技术的发展,已有许多分子生物学方法被用于军团菌的检测。; 赵利伟胡朝晖朱庆义; 关键词：军团菌病基因设计 RRNA 荧光基团荧光定量

PCR酶切分型检测军团菌试剂盒及其应用: 本发明为公开了一种PCR酶切分型检测军团菌试剂盒，包括PCR反应液、酶切反应液、阴性对照及阳性对照。采用一对军团菌特异引物扩增16S rRNA基因上的区域，在该扩增片段存在一个嗜肺军团菌特异的酶切位点，通过一个PCR-酶...; 朱庆义胡朝晖赵利伟顾全; 文献传递

环境水源军团菌的分离培养及生化试验快速鉴定方法探讨: 目的:建立一种高效的环境水源军团菌分离培养方法,提高培养阳性率。并选择简单有效的生化试验项目对初分离的军团菌进行快速鉴定。方法:对广州地区采集的44份环境水样,经过抽滤浓缩、热孵育后再抽滤浓缩、酸处理、热处理等不同的处理...; 赵利伟胡朝晖顾全范晓姗朱庆义; 关键词：军团菌生化试验; 文献传递

聚合酶链反应-酶切分型鉴定广州地区环境水源军团菌被引量：4: 2010年; 【目的】探讨聚合酶链反应-酶切分型在快速鉴定环境水源军团菌方面的应用价值,并了解广州地区环境水源军团菌的分布状况。【方法】对广州地区采集的44份环境水样,作军团菌分离培养,再对分离菌株进行16Sr DNA PCR-酶切分型鉴定、16S rDNA基因测序和mip基因测序鉴定。【结果】在广州地区环境水源分离的112株军团菌,经聚合酶链反应-酶切分型鉴定、16S rDNA基因测序和mip基因测序鉴定,检出嗜肺军团菌66株,非嗜肺军团菌46株,其中菲氏军团菌20株,戈氏军团菌17株,橡树岭军团菌7株,长滩军团菌2株。【结论】聚合酶链反应-酶切分型检测环境水源军团菌是一种简便、快速、特异的鉴定方法;在广州地区环境水源中普遍存在军团菌,主要是嗜肺军团菌,其次是菲氏军团菌,戈氏军团菌,橡树岭军团菌和长滩军团菌。; 赵利伟胡朝晖宣瑞红刘洋敏朱庆义王娟詹晓勇; 关键词：军团菌基因测序

环境水军团菌分离培养及其表型与分子分型研究被引量：5: 2012年; 目的探讨环境水系军团菌分离培养及其表型和分子分型鉴定方法。方法采用军团菌常规分离培养、生化试验、血清学分型和菌体脂肪酸成分分析、PCR试验、AFLP基因分型和SBT核酸测序分型鉴定等技术方法,对广东地区195份环境水系分离的226株军团菌进行表型和基因型分型鉴定。结果在广东地区195份环境水样中共检出军团菌226株,主要是嗜肺军团菌170株(75.22%),长滩军团菌21株(9.29%)、菲氏军团菌21株(9.29%)、橡树岭军团菌和茴芹军团菌各2株(0.89%),其他非嗜肺军团菌10株(4.42%)。125株军团菌细胞脂肪酸成分测定分嗜肺军团菌、橡树岭军团菌、长滩军团菌、菲氏军团菌等6种类型;54株嗜肺军团菌1型AFLP分型,分为25个基因型。7株不能用生化试验、细胞脂肪酸成分分析和AFLP分型做出鉴定的军团菌,用SBT核酸测序鉴定为菲氏军团菌2株、长滩军团菌3株和茴芹军团菌2株。结论广州地区环境水系军团菌分布以嗜肺军团菌为主,同时有橡树岭军团菌、菲氏军团菌、长滩军团菌和茴芹军团菌等多种军团菌种;SBT核酸测序鉴定有助于发现军团菌新种。; 朱庆义胡朝晖赵利伟陈文聪杨瑞馥宋亚军郭兆彪; 关键词：军团菌表型分子分型环境水

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赵利伟