谢而付
- 作品数：54 被引量：220H指数：9
- 供职机构：南京医科大学第一临床医学院更多>>
- 发文基金：江苏省实验诊断学重点实验室基金江苏省科技厅社会发展基金江苏省卫生厅重大科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 肺癌细胞株APC基因启动子甲基化对其转录的影响被引量：10
- 2007年
- 背景与目的:抑癌基因家族性腺瘤样结肠息肉病易感基因(adenomatous polyposis coli,APC)启动子区的高甲基化在很多肿瘤中被发现,与这些肿瘤的发生发展相关。本实验室在肺癌患者肿瘤组织中检测到APC甲基化率达47%,为了研究其在肺癌细胞株中的甲基化情况,并进一步了解甲基化对其转录的影响,本研究检测了3株肺癌细胞的抑癌基因APC启动子甲基化状态及其对该基因转录水平的影响。方法:提取3株肺癌细胞株(肺腺癌细胞株SPC-A1、小细胞肺癌细胞株NCI-H446、大细胞肺癌细胞株NCI-H460)的DNA,以经转甲基处理和未做处理的脐带血DNA为阳性、阴性对照,亚硫酸氢盐化学修饰后,用甲基化特异性基因扩增(methylation specific-polymerase chain reaction,MSP)和甲基化基因芯片对APC基因启动子1ACpG岛甲基化进行研究,并用实时荧光定量PCR(real time-polymerase chain reaction)技术,以Sybr-GreenⅠ为荧光染料,β-actin基因为内参照,检测mRNA转录;对甲基化阳性的NCI-H460细胞,分别用1、5、10、15μmol/L的5′-杂氮-2'-脱氧胞嘧啶(5-aza-2-deoxycytidine,5-aza-dC)试剂进行脱甲基化,提取RNA,荧光定量检测其转录变化。结果:SPC-A1和NCI-H446细胞APC甲基化阴性,NCI-H460细胞APC甲基化阳性;甲基化芯片检测NCI-H460细胞在APC启动子1A5个CpG位点均存在甲基化(687、707、714、719、726),SPC-A1和NCI-H446甲基化阴性,荧光定量结果NCI-H460的APC转录较SPC-A1和NCI-H446有明显的下降,仅为二者平均的30.04%;经5-aza-dC脱甲基化作用后,NCI-H460细胞的APC表达增加了约5～10倍,其中10μmol/L浓度作用下,APC表达增加最多。结论:肺癌细胞株NCI-H460中存在APC基因高甲基化,5-aza-dC脱甲基化试剂可以激活其转录。
- 张丽霞潘世扬陈丹谢而付高丽束永前陆祖宏程璐杨迪张寄南
- 关键词：肺癌细胞株APCMSP5-AZA-DC
- 医学检验专业成人高等教育专升本学生科研思维培养和探索被引量：4
- 2018年
- 目的:探索采用不同的教学策略对医学检验专业成人高等教育专升本学生进行科研思维培养的作用。方法:首先,通过压缩理论课学时,安排论文和科研标书讲解的教学方式,从2011年开始,每学期专业课在保证理论课授课完成的前提下,采用论文讲解的模式进行教学,同时,选择优秀论文作为范例进行讲解。其次,引入导师制,授课教师进行一对多的精准指导,许多老师都是高学历和高职称,具有丰富的带教经验。最后,通过本学系是研究生学科点的优势,安排学生与在读研究生进行见面交流。结果:经过多年的教学实践,本学系的科研培养策略和教学方法对提高了学生的科研思维能力和创新能力有一定帮助。结论:本学系使用的教学方法和教学策略对学生的科研思维能力和创新能力具有一定的意义,可以推广。
- 谢而付凌芸徐华国蒋叶王芳
- 关键词：科研思维成人高等教育
- 单纯疱疹病毒性脑炎患者相关抗体滴度分析及意义被引量：5
- 2010年
- 目的研究单纯疱疹病毒性脑炎患者血液及脑脊液中单纯疱疹病毒抗体(抗-HSV)滴度的改变。方法收集45例单纯疱疹病毒性脑炎患者的血液和脑脊液,稀释成不同滴度,用ELISA双抗原夹心法进行抗-HSV检测。结果采用多滴度稀释后,血液抗-HSV-IgG阳性率由20.0%上升到26.7%;脑脊液抗-HSV-IgM阳性率由6.7%上升到93.3%,抗-HSV-IgG阳性率由6.7%上升到13.3%。脑脊液中抗-HSV-IgM的阳性率显著高于血液,差异有统计学意义(P<0.05),而两者抗-HSV-IgG阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论ELISA法检测抗-HSV需要进行多个滴度稀释检测,避免钩状效应,提高阳性检出率。此法简便快速,有望成为辅助诊断单纯疱疹病毒性脑炎的重要指标。
- 凌芸杨瑞霞谢而付
- 关键词：单纯疱疹病毒属脑炎病毒性抗体病毒钩状效应
- 血浆RASSF1A基因高甲基化与早期肺癌的相关性研究
- 目的RASSF1A基因是继p16基因以来所发现的在肿瘤中甲基化程度最高、最广泛的抑癌基因之一,大量研究表明RASSF1A启动子区的高甲基化以致表达缺失在肿瘤的发生发展中起着重要的作用。血浆中游离DNA的甲基化检测近年来逐...
- 潘世扬高丽谢而付陈丹张丽霞陈进步穆原俞同福刘希胜张寄南
- 关键词：早期肺癌血浆RASSF1A基因甲基化
- 文献传递
- 血浆DNA甲基化定量在晚期肺癌患者个体化治疗中的检测应用
- 潘世扬陆雅春顾兵赵纯夏文颖谢而付张丽霞
- 肺癌患者血浆中APC基因启动子甲基化定量检测研究被引量：13
- 2009年
- 背景与目的:APC基因编码的蛋白参与信号转导途径,大量研究证实APC启动子区的高甲基化在肿瘤的发生发展中起重要作用。本研究建立血浆APC基因实时荧光定量甲基化特异性基因扩增(methylation-specificPCR,MSP)检测方法,并对临床肺癌患者血浆进行检测,以确定该方法在肺癌诊断中的应用价值。方法:将APC基因启动子甲基化阳性肺癌细胞株NCI-H460细胞用有限稀释法获取单个集落形成的细胞,以经典的酚-氯仿法提取细胞DNA,并用MSP对APC基因甲基化进行验证,紫外分光光度计定量并以10倍稀释的浓度梯度依次投入到200μL健康人血浆中,得到模拟肺癌患者血浆,利用磁珠核酸提取方法从模拟肺癌及肺癌患者、肺部良性疾病患者和健康对照者血浆中提取DNA,对血浆DNA模板进行亚硫酸氢盐化学修饰;以模拟血浆样品作为标准品,采用外标准曲线法对各种血浆样品中APC甲基化进行定量分析。结果:所建立的实时荧光定量MSP检测方法的线性范围为1.5×102～1.5×105拷贝/mL,用该方法检测甲基化肿瘤细胞的DNA其最低检测限为1.5×102拷贝/mL。78例肺癌患者有40例组织中检测出APC基因甲基化阳性,其中的19例(47.5%)肺癌患者血浆中APC基因启动子甲基化阳性,APC甲基化浓度为1.67×102～6.78×103拷贝/mL,中位浓度为1.60×103拷贝/mL。38例组织阴性的肺癌患者、31例肺部良性疾病患者和23例健康者的血浆APC基因启动子甲基化均为阴性。结论:实时荧光定量MSP检测血浆APC基因甲基化在肺癌诊断方面具有潜在应用价值。
- 潘世扬谢而付束永前高丽张丽霞陈丹陈进步赵文君穆原张寄南
- 关键词：肺肿瘤血浆DNAAPC基因DNA甲基化
- 定量检测血浆RASSF1A甲基化在晚期肺癌患者个体化治疗中的应用被引量：2
- 2011年
- 目的定量检测晚期肺癌患者化疗过程中血浆RAS相关区域家族1A基因(RASSF1A)甲基化水平,探讨其在个体化治疗中的应用价值。方法采集24例晚期肺癌患者化疗前后静脉血共135份,用荧光定量甲基化特异性PCR(MSP)检测RASSF1A基因的甲基化水平,观察化疗前后的变化情况。结果 13例部分缓解组(partial remission,PR)患者化疗后甲基化定量水平明显升高(P<0.05),而11例未缓解组(stable disease,SD或progressive disease,PD)的患者化疗前后甲基化水平无明显变化;生存时间≥12个月的13例患者化疗后甲基化定量水平也明显升高(P<0.01),而生存时间<12个月的11例患者化疗前后甲基化水平无明显变化。生存曲线分析显示,化疗后有甲基化水平升高改变的患者总体生存时间更长(P<0.01)。结论晚期肺癌患者化疗前后血浆RASSF1A甲基化定量水平的检测,对评估化疗的疗效及预后有一定的价值,对个体化化疗的药物选择有一定的指导意义。
- 陆雅春潘世扬王芳夏文颖谢而付孙瑞红高丽陈丹张丽霞黄珮珺徐婷耿雁彭蘡秦雪君
- 关键词：晚期肺癌甲基化个体化治疗
- 南京地区81例儿童变态反应性疾病患者血清中变应原的分布特点被引量：1
- 2010年
- 目的:调查南京地区81例儿童变态反应性疾病患者血清中变应原的种类及其分布特点。方法:收集儿童变态反应性疾病患者血清81例,采用德国Mediwiss公司的变应原定量检测系统,以免疫印迹法检测血清中变应原特异性IgE抗体。结果:81例儿童变态反应性疾病患者血清中,有61例(61/81,75.3%)患者检测出阳性结果。阳性率最高的变应原是户尘螨,有44例(44/81,54.3%),其次是猫狗皮屑、羊肉、柏和霉菌等。有11例(11/81,13.4%)患儿检出3种以上变应原。吸入性变应原阳性率4～6岁组和7～14岁组均显著高于0～3岁组(P<0.05),而食入性变应原阳性率4～6岁组和7～14岁组则显著低于0～3岁组(P<0.05),且食入性变应原阳性率男性显著高于女性(P<0.05)。变应原阳性率夏秋季显著高于冬春季(P<0.05)。结论:通过南京地区81例儿童变态反应性疾病血清变应原检测,了解变应原的种类及其分布特点,对变态反应性疾病儿童的病因诊断、预防和治疗都有着十分重要的意义。
- 凌芸谢而付杨瑞霞曾慧敏
- 关键词：变态反应性疾病变应原IGE
- 辩证思维在检验医学技术专业实习带教中的应用被引量：2
- 2020年
- 随着医学的发展,新的检验项目和检验技术的不断出现,大大提高和拓展了对临床的服务能力,检验医学在临床诊疗中的作用也更加明显[1]。检验医学是一门实践性和应用性很强的学科,检验医学技术专业学生除需具备医学检验、临床医学、基础医学等方面的理论基础,还需具有扎实的实践能力。学生将来的主要就业去向是医院检验科,实习是学生校园学习阶段向毕业后工作岗位顺利过渡的关键[2],毕业实习在学生能否顺利胜任医学检验科工作中起到关键作用。在实习过程中,学生应重点学习如何将所学理论知识应用于临床实践,这就要求带教老师要重视实习带教,以正确的教学方法和教学理念教育和引导学生完成实习。
- 张伟徐华国蒋叶王芳王芳
- 关键词：实习带教辩证思维
- 自身抗体IgG检测蛋白芯片检测抗ENA抗体谱的研究
- 2009年
- 目的:使用蛋白芯片技术检测患者血清中的抗ENA抗体谱,评价蛋白芯片技术检测抗ENA抗体谱的性能。方法:收集249例患者血清,用自身抗体IgG检测蛋白芯片进行抗ENA抗体谱检测,应用PBT型生物芯片识别系统进行图像分析,以免疫印迹方法作为对照。结果:自身抗体IgG检测蛋白芯片与免疫印迹法方法相比,符合率分别为:抗SS-A/Ro抗体82.2%、抗SS-B/La抗体88.2%、抗Scl-70抗体94.7%、抗Jo-1抗体95.9%、抗Sm抗体92.5%、抗u1RNP抗体88.5%、抗Rib-P抗体82.2%。结论:自身抗体IgG检测蛋白芯片可应用于抗ENA抗体谱检测,与免疫印迹技术相比,检测结果无显著性差异。
- 蒋理徐建杨瑞霞谢而付
- 关键词：蛋白芯片免疫印迹
