董辉 作品数:48 被引量:126 H指数:6 供职机构: 宁夏医科大学总医院 更多>> 发文基金: 宁夏回族自治区自然科学基金 国家自然科学基金 中央高校基本科研业务费专项资金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
大鼠巨噬细胞感染弓形虫的基因表达谱分析 被引量:2 2016年 目的分析大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞感染弓形虫RH株的基因表达谱差异。方法以弓形虫RH株速殖子感染SD大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞0h、6h后提取细胞总RNA,采用NimbleGen 12x135K微阵列基因表达分析芯片检测差异表达基因,并对部分表达变化的基因进行Real time PCR验证。结果表达分析芯片涵盖大鼠26 419个基因,对差异表达基因(Fold Change≥4.0)进行聚类分析显示,经弓形虫RH株作用6h和0h的RNA表达谱相比,大鼠肺泡巨噬细胞上调的基因有49个(主要包括Zfp90,Map4k4,Mrpl42等),下调的基因有130个(主要包括Pitx1,Chpt1,Chd6等)。大鼠腹腔巨噬细胞上调的基因有136个(主要包括Map2k3,Il17b,Phka2等),下调的272个(主要包括Tlr2,Tgfb2,Wnt2等)。GO、Pathway分析差异表达的基因,大鼠腹腔巨噬细胞能够引发更多和弓形虫有关的信号通路变化,其肺泡巨噬细胞则不能引起这一效应。Real time PCR和基因芯片检测结果一致。结论大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞感染弓形虫不同的表现型,可能和其基因表达差异引起的信号通路变化有关。 赵志军 董辉 汪涛 郭雅琪 钟利 王姝 殷国民 林茹关键词:弓形虫 基因表达谱 NDUFA4在上皮性卵巢癌组织中的表达及意义 2023年 目的探讨I型辅酶脱氢酶1α亚复合物4(NDUFA4)在上皮性卵巢癌(EOC)组织中的表达与临床病理特征及预后的相关性。方法用免疫组化法检测NDUFA4在137例EOC组织和22例正常卵巢组织的表达情况。免疫组化结果分析分别用人工计数和病理数字化软件进行评分,取结果一致的例数进行卡方检验分析NDUFA4的表达水平与临床病理特征的关系。结果NDUFA4表达水平在EOC组织中显著高于正常卵巢组织,NDUFA4的高表达率在EOC患者的病理分级、卵巢癌类型(Ⅰ型卵巢癌和Ⅱ型卵巢癌)、临床分期(FIGO)、原发肿瘤(T分期)方面差异有统计学意义(P<0.05),而在患者的发病年龄、组织类型、肿瘤大小、复发、区域淋巴结(N分期)、远处转移(M分期)方面差异无统计学意义(P>0.05)。COX回归分析显示,NDUFA4不是上皮性卵巢癌患者的危险因素。结论NDUFA4在EOC组织中的表达与其恶性程度相关,与其预后无明显相关性。 冯帆帆 董辉 马鹏珠 石璐璐 杨彩虹关键词:上皮性卵巢癌 免疫组织化学 法舒地尔对急性心肌梗死大鼠心肌组织中ROCK2及TNF-α表达影响的研究 2023年 目的观察法舒地尔对急性心肌梗死大鼠心肌组织中ROCK2 mRNA和蛋白及TNF-α蛋白表达的影响,探讨法舒地尔对血性心肌梗死(AMI)大鼠的心肌保护作用。方法健康成年雄性SD大鼠48只,使用随机数字表法,将其分为对照组、假手术组(sham组)、心肌梗死模型组(AMI组)及心肌梗死后尾静脉注射盐酸法舒地尔组(AMI+HF组)。盐酸法舒地尔溶液浓度为30 mg/100 mL,给药剂量为4 mg/kg,该组大鼠自模型建立成功后立即首次给药,完成首次给药后开始计时,以后每6 h尾静脉注射HF 1次;AMI组及AMI+HF组大鼠开胸并结扎冠状动脉前降支建立心肌梗死模型。结扎成功6、24、48 h后无痛将其处死大鼠获取心肌组织;对照组大鼠不做处理,sham组大鼠开胸后,于大鼠冠状动脉穿线但不结扎冠状动脉(对照组及sham组大鼠每6 h尾静脉注射生理盐水1次),均无痛将其处死后获取心肌组织;使用Real-time PCR测定心肌组织中ROKC2 mRNA表达水平,使用蛋白质免疫印迹检测心肌组织中ROCK2及TNF-α蛋白表达水平。结果Sham组大鼠心肌组织中ROCK2 mRNA和蛋白及TNF-α蛋白表达与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);在冠脉结扎6 h、24 h和48 h的时间点,AMI组大鼠、AMI+HF组大鼠心肌组织中ROCK2 mRNA和蛋白及TNF-α蛋白表达均高于sham组(P<0.05);在冠脉结扎6 h、24 h、48 h的时间点,AMI+HF组大鼠心肌组织中ROCK2 mRNA和蛋白及TNF-α蛋白表达均低于AMI组(P<0.05)。结论法舒地尔抑制AMI大鼠心肌组织中ROCK2表达,降低下游炎性因子TNF-α水平,这可能是法舒地尔具备保护心肌作用的机制之一。 张建银 邬容光 王强强 张淑红 张淑红 王艳 马金秀 陈乾 王艳关键词:法舒地尔 急性心肌梗死 ROCK2 缺氧对人肺动脉平滑肌细胞内活性氧及细胞色素C的影响及意义 被引量:1 2022年 目的观察缺氧对人肺动脉平滑肌细胞(hPASMCs)内活性氧(ROS)及细胞色素C表达的影响,探索缺氧性肺动脉高压的形成机制。方法购买hPASMCs,分别在常氧条件和缺氧条件下进行培养,连续细胞培养72h,并观察细胞增殖情况;使用CCK-8法分别于细胞培养后的1、24、48及72 h连续观察细胞增殖情况,使用分子探针对上述时间节点hPASMCs内的ROS水平进行检测,使用Westernblot检测hPASMCs内细胞色素C的表达水平。结果常氧组与缺氧组在1、24、48及72 h的培养过程中,其细胞增殖水平的OD值分别为缺氧组(0.306±0.004、0.733±0.009、0.973±0.018和1.258±0.030)、常氧组(0.307±0.004、0.459±0.022、0.751±0.021和1.151±0.037),2组细胞的增殖水平差异有统计学意义(P<0.05),缺氧组的hPASMCs增殖水平明显高于常氧组;2组hPASMCs在1、24、48及72 h的培养过程中,其细胞内ROS荧光OD值差异分别为缺氧组(2.32±0.192、3.46±0.270、4.12±0.259和4.7±0.187)、常氧组(2.38±0.130、2.30±0.158、2.34±0.207和2.38±0.179),2组hPASMCs内ROS荧光OD值比较差异有统计学意义(P<0.05),缺氧组的hPASMCs内ROS水平明显高于常氧组;2组hPASMCs在1、24、48及72 h的培养过程中,其细胞内细胞色素C的表达相对值分别为缺氧组(0.516±0.029、0.673±0.060、0.981±0.135和1.180±0.131)、常氧组(0.509±0.064、0.488±0.023、0.534±0.016和0.512±0.033),2组hPASMCs内细胞色素C的表达相对值差异有显著性(P<0.05),缺氧组hPASMCs内细胞色素表达水平明显高于常氧组。结论缺氧将导致hPASMCs明显增殖,其内ROS水平增加,同时伴有细胞色素C水平增加,这种改变可能参与了肺动脉血管重构,并最终诱发了肺动脉高压的形成。 陈乾 沈乐 杨静 杨静 杨静 张建银 李丹丹 耑冰关键词:缺氧 人肺动脉平滑肌细胞 活性氧 细胞色素C pri-miR-21重组腺病毒载体构建及其对TLR4基因调控的研究 被引量:8 2012年 目的:构建能高效表达成熟miR-21小分子的腺病毒载体,探讨其对TLR4基因的靶向调控关系。方法:以正常小鼠基因组DNA为模板,PCR扩增pri-miR-21基因,克隆至穿梭载体pAdTrack-CMV中经PCR、酶切及基因测序分析正确无误后,与pAdEasy-1腺病毒骨架质粒进行同源重组,并利用293A细胞,包装成pri-miR-21重组腺病毒感染HeLa细胞,通过Western blot检测TLR4的蛋白表达水平,验证miR-21与TLR4靶向调控的关系。结果:经PCR、酶切、测序及GFP表达证实,成功构建携带pri-miR-21基因的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒。Western blot证实,miR-21可抑制TLR4蛋白的表达。结论:所制备的小鼠pri-miR-21重组腺病毒,可以高效表达成熟miR-21小分子,能够抑制靶基因TLR4的表达。 赵婧 徐广贤 贾伟 董辉 张一琳 赵志军 魏军关键词:重组腺病毒载体 靶向调控 1654株金黄色葡萄球菌耐药性及pvl、qacA/B基因分析 被引量:6 2015年 目的了解宁夏医科大学总医院金黄色葡萄球菌临床耐药及pvl、qac A/B基因携带情况,为MRSA防治提供数据支持。方法用VITEK-2全自动细菌鉴定仪和K-B纸片扩散法对临床分离的1 654株金黄色葡萄球菌进行细菌鉴定及药敏试验,PCR检测MRSA菌株pvl和qac A/B基因,用WHONET 5.6和SPSS 17.0软件进行统计分析。结果本院金黄色葡萄球菌主要来源于脓液(42.5%)和痰液(32.0%);检出率较高的科室为烧伤科(29.8%)、骨科(11.0%)、脑外科(10.0%)和ICU(9.8%);MRSA平均检出率为50.1%,不同年份间MRSA检出率差异有统计学意义;MRSA对多种抗生素耐药性较高,耐药率明显高于MSSA,尚未发现呋喃妥因、利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁的MRSA耐药菌株;MRSA基因检测结果显示pvl和qac A/B基因携带率分别为1.23%和0.55%。结论医院应加强对金黄色葡萄球菌感染高发病区的防治工作,同时完善对耐药菌株pvl和qac A/B基因的监测,规范抗生素使用,降低耐药菌株的发生率。 林茹 魏军 殷国民 董辉 贾伟 赵志军关键词:金黄色葡萄球菌 耐药率 BCG对人外周血来源树突状细胞miRNA表达谱的影响及其初步验证 结核分枝杆菌是典型的胞内寄生菌,主要靶细胞是巨噬细胞,但树突状细胞能显著激活初始型T细胞,启动T细胞免疫应答反应,是细胞免疫反应的重要启动者。MicroRNAs作为一类18-22 nt的小分子,其调控作用广泛存在真核生物... 董辉关键词:结核分枝杆菌 树突状细胞 细胞免疫反应 外周血来源 2011~2013年宁夏某院烧伤科病原菌分布及耐药性分析 2015年 目的了解宁夏医科大学总医院烧伤科2011~2013年临床病原菌分布及抗菌药物耐药情况,为有效指导临床用药、控制感染提供依据。方法 对2011年1月至2013年12月烧伤科送检阳性标本的细菌培养结果及药敏结果进行回顾性统计分析。结果 临床共分离出病原菌2 587株,其中革兰阴性菌832株(32.1%),分离率居前3位的病原菌为阴沟肠杆菌、鲍曼不动杆菌和大肠埃希菌,分别占9.3%、6.4%、5.2%;阴沟肠杆菌对氨苄西林、头孢唑啉、哌拉西林、头孢西丁及复方磺胺甲噁唑的耐药率分别为62.9%、100.0%、37.5%、100.0%、98.3%;鲍曼不动杆菌对大部分抗菌药物的耐药率达到60.0%以上;大肠埃希菌对氨苄西林、阿米卡星、左旋氧氟沙星的耐药率分别为91.8%、4.1%、56.8%。革兰阳性菌1 728株占66.8%,分离率最高病原菌分别为金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌,分别占21.5%、9.4%;金黄色葡萄球菌对大部分抗菌药物的耐药率达70.0%以上;表皮葡萄球菌对大部分抗菌药物的耐药率达40.0%以上。真菌27株(1.1%),以白假丝酵母菌为主。结论 医院烧伤科患者存在混合感染,病原菌主要以金黄色葡萄球菌为主,病原菌对常用抗菌药物的耐药率较高,且存在多重耐药情况,因此需加强对烧伤科耐药细菌的监测,指导临床合理使用抗菌药物。 殷国民 刘自军 董辉 林茹 魏军 赵志军关键词:病原菌 抗菌药物 耐药性 替格瑞洛对急性心肌梗死大鼠心肌组织中ROS、TNF-α及IL-6含量的影响 被引量:4 2018年 目的观察替格瑞洛对急性心肌梗死大鼠心肌组织中ROS、TNF-α、IL-6含量的影响。方法 48只健康成年雄性SD大鼠,随机分为对照组、假手术组(sham组)和心肌梗死模型组(AMI组)以及心肌梗死后口服替格瑞洛组(AMI+Ti组),AMI组及AMI+Ti组大鼠开胸并结扎冠状动脉前降支建立心肌梗死模型。结扎成功6、24和48h后无痛处死大鼠获取心肌组织;对照组大鼠不做任何处理;假手术组大鼠开胸冠状动脉穿线但不结扎冠状动脉;四组大鼠均无痛处死大鼠并获取心肌组织;使用比色法测定心肌组织中ROS(O2-和OH-)含量,使用Western blot检测心肌组织TNF-α、IL-6表达量。结果同对照组相比,sham组大鼠心肌组织中ROS含量(O2-和OH-)均无明显变化(P均>0.05),在冠脉结扎6、24和48h的时间点,AMI组大鼠、AMI+Ti组大鼠心肌组织中ROS含量均高于sham组(P均<0.05),冠脉结扎6、24和48h时AMI+Ti组大鼠心肌组织中ROS含量均明显低于AMI组大鼠对应时间点ROS含量(P均<0.05);同对照组相比,sham组大鼠心肌组织中TNF-α、IL-6表达量均无明显变化(P均>0.05),冠脉结扎6、24和48h AMI组大鼠、AMI+Ti组大鼠心肌组织中TNF-α、IL-6表达量均高于sham组大鼠对应时间点TNF-α、IL-6表达量(P均<0.05),冠脉结扎6、24和48h时AMI+Ti组大鼠心肌组织中TNF-α、IL-6表达量均低于AMI组大鼠对应时间点心肌组织中TNF-α、IL-6表达量(P均<0.05)。结论替格瑞洛可抑制AMI大鼠心肌组织氧化应激反应而减少ROS含量并降低心肌组织中TNF-α和IL-6水平而发挥心肌保护作用。 张复贵 魏文 董辉 陈乾关键词:心肌梗死大鼠 ROS TNF-Α IL-6 过表达JNK2增强SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖及抗凋亡能力 被引量:2 2018年 目的探讨c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)或JNK2过表达对SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法将JNK1、JNK2分别与p HBAD-EF1-MCS-3FLAG-CMV-GFP载体结合,构建JNK1和JNK2的重组腺病毒表达载体,感染SCL-1细胞,优化感染条件,实时荧光定量PCR和Western blot法鉴定过表达效果。CCK-8法测定SCL-1细胞的增殖活性,细胞克隆形成实验观察细胞集落形成能力,划痕实验检测细胞划痕愈合率;流式细胞术检测细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR检测JNK1、JNK2、c-Jun mRNA水平; Western blot法检测磷酸化c-Jun的蛋白水平。结果 JNK1、JNK2过表达腺病毒载体最佳感染条件为感染复数(MOI)=100,感染48 h后,SCL-1细胞的JNK1和JNK2的表达水平显著升高。与对照组相比,过表达JNK1对SCL-1细胞的增殖和抗凋亡能力无显著影响,过表达JNK2的SCL-1细胞增殖和抗凋亡能力明显增强,且磷酸化c-Jun蛋白水平上调。结论过表达JNK2可以增强SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖能力和抗凋亡能力。 刘慧旭 董辉 张旭 陈源昊琪 焦亚宁 葛新红关键词:皮肤鳞状细胞癌