胡艳霞
- 作品数:15 被引量:18H指数:3
- 供职机构:山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:山东省农业良种工程项目国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学经济管理更多>>
- 山羊毛囊外根鞘细胞系的构建方法
- 本发明涉及一种山羊毛囊外根鞘细胞系的构建方法,利用皮肤成纤维细胞外基质诱导和机械分离与酶消化相结合的方法,启动了ORSC的原代培养,并利用不同培养液,成功建立了山羊毛囊外根鞘细胞系。利用本发明构建的山羊毛囊外根鞘细胞系已...
- 王慧崔志峰胡艳霞曾勇庆陈维云周芬娜董忠典张娇
- 文献传递
- 莱芜猪GPx4基因在不同组织中的表达规律研究被引量:3
- 2011年
- 为研究GPx4基因mRNA在莱芜猪不同组织中的差异表达规律,探讨该基因与地方猪种抗氧化性能的关系。本研究以5头莱芜猪为实验材料,提取10种组织的总RNA,应用实时荧光定量PCR技术,检测GPx4基因在莱芜猪不同组织的mRNA相对表达量。实时荧光定量PCR研究结果显示:GPx4基因在莱芜猪各组织中均有表达,组织之间的相对表达量存在显著差异(P<0.05);GPx4基因在莱芜猪脑、心、肝、脾等组织高丰度表达,并且极显著地高于其他组织中的表达量(P<0.01)。GPx4基因在不同组织中的表达水平由高到低依次为:肌肉>脊髓、大肠、背膘、小肠>肺,差异显著(P<0.05)。
- 陈伟杜金芳崔景香陈其美胡艳霞杨伦曾勇庆
- 关键词:莱芜猪荧光定量PCR组织表达谱
- RNA干扰沉默PID1基因在C2C12细胞中表达的研究被引量:3
- 2013年
- 构建和筛选对PID1(phosphotyrosine interaction domain containing 1,PID1)基因有RNA干扰作用的PID1-shRNA表达载体。据小鼠PID1 cDNA序列,优化设计了4条shRNA及1条阴性干扰序列,插入pGPU6/GFP/Neo载体中,得到pGPU6/GFP/Neo-PID1-1、pGPU6/GFP/Neo-PID1-2、pGPU6/GFP/Neo-PID1-3、pGPU6/GFP/Neo-PID1-4和pGPU6/GFP/Neo-PID1-NC。干扰载体转染C2C12细胞,以RT-PCR和Western blot技术检测shRNA对C2C12细胞中PID1 mRNA和蛋白表达的下调作用。结果表明:靶向PID1基因的4个shRNA重组质粒载体经测序分析,其shRNA编码序列与预期设计的完全一致,经酶切鉴定和测序分析证实,靶向PID1基因的shRNA重组质粒载体构建成功。进一步将构建的4个表达载体分别转染C2C12细胞,24 h后细胞中PID1基因mRNA表达水平依次下调(23.58±1.87)%、(75.44±0.77)%、(70.52±0.41)%和(56.60±3.13)%。48 h后细胞中PID1蛋白表达水平依次降低(30.15±5.05)%、(71.86±4.85)%、(67.93±2.28)%和(56.81±2.01)%。所筛选出的pGPU6/GFP/Neo-PID1-2、pGPU6/GFP/Neo-PID1-3和pGPU6/GFP/Neo-PID1-4三个表达载体均能高效地抑制转染细胞PID1 mRNA和蛋白的表达,为进一步研究PID1基因的功能奠定了基础。
- 杨伦徐正刚王慧陈其美陈伟胡艳霞石元祝洪磊曾勇庆
- 关键词:小鼠RNA干扰
- 应用抑制性消减杂交技术筛选影响猪肌内脂肪沉积相关基因的研究
- 肌内脂肪(IMF)是影响猪肉品质的一个重要指标,已有的研究表明IMF含量与肉的风味、嫩度等优良肉质性状呈正相关。近年来,人们在猪IMF沉积方面进行了大量研究,但影响IMF沉积的主效基因至今尚未确定。因此,本研究以IMF含...
- 陈其美杨伦崔景香杜金芳陈伟胡艳霞祝洪磊石元曾勇庆
- 关键词:肌内脂肪抑制性消减杂交差异表达基因
- 猪CuZnSOD基因的克隆、表达及功能分析被引量:7
- 2010年
- 为了进一步了解和认识CuZnSOD基因的结构和功能,揭示CuZnSOD对猪抗氧化机能的影响,寻找与肉质性状相关联的分子标记,文章采用RACE(Rapid amplification of cDNA end)方法,对莱芜猪CuZnSOD基因cDNA进行克隆测序,分析其结构和功能,并用Real-time PCR检测CuZnSOD基因的表达。结果表明,CuZnSOD基因cDNA序列全长658bp(GenBank登录号:GU944822),包含76bp的5′UTR和120bp的3′UTR序列。全部CDS序列462bp,编码153个氨基酸,分子量为15.9kDa,等电点为6.03。CuZnSOD基因编码的氨基酸序列中,第3氨基酸残基处存在1个O-糖基化位点,第86氨基酸残基处存在1个N-糖基化位点。二级结构中α螺旋仅占1.31%。在进化过程中高度保守,与人、牛、小鼠和褐鼠的编码区同源性分别为87.74%、87.66%、83.44%和83.23%;氨基酸序列同源性分别为90.26%、94.12%、92.21%和91.50%。CuZnSOD存在典型的金属结合配体结构域(GFHVHQFGDNT)。基于蛋白序列所构建的分子进化树表明猪与牛的亲缘关系最近。在mRNA水平上,CuZnSOD是一个广谱表达基因,在大脑、心脏、脾脏、肝脏、肾脏、肺、大肠、小肠、脊髓、肌肉、背膘和胃中都能检测到,其在肾脏、小肠和肺中表达量较高,在心脏和肌肉组织中表达量较低。
- 杜金芳曾勇庆陈伟崔景香陈其美杨伦胡艳霞
- 关键词:CUZNSOD基因克隆
- 莱芜猪前体脂肪细胞的原代培养及诱导分化研究被引量:6
- 2012年
- 为了建立莱芜猪前体脂肪细胞的体外培养体系,探索猪脂肪组织增生的生物学特征。本研究采集1日龄莱芜猪仔猪颈、背部皮下脂肪组织,采用胶原酶与胰蛋白酶相结合的方法,分离原代前体脂肪细胞,进行前体脂肪细胞的原代和传代培养,以及前体脂肪细胞诱导分化的研究,并采用Real-time PCR方法检测前体脂肪细胞分化过程中关键基因PPARγ的表达。结果表明,分离的猪原代前体脂肪细胞约8h后开始贴壁,贴壁的细胞呈短梭形或不规则的三角形,第3天多数细胞进入指数生长期,呈成纤维细胞样形态,细胞生长曲线近似S形;诱导培养结果显示,少量细胞在第2天开始出现脂滴,大多数细胞在第3天出现脂滴,第7~8天小脂滴逐渐融合成大脂滴,在第12天左右融合成大脂滴,油红O染色呈橘红色。在前体脂肪细胞分化过程中PPARγ基因mRNA的表达量逐渐增加,在诱导后的48h表达量最高,随后其表达丰度逐渐下降。本试验成功建立了莱芜猪前体脂肪细胞培养体系和体外诱导分化模型,为进一步研究莱芜猪前体脂肪细胞增殖与分化机制和猪体脂肪的沉积奠定基础。
- 胡艳霞曾勇庆崔志峰杨伦陈伟陈其美石元祝洪磊
- 关键词:莱芜猪前体脂肪细胞细胞培养诱导分化
- 猪GPx4基因mRNA的表达对肌肉抗氧化性能及肉质特性的影响
- 猪肉的感官性状、主要的物理和生化参数都与肉质特性紧密相关。猪肉中含有丰富且活跃的酶类,很容易在屠宰后,因为动物机体的氧化还原体系失衡、快速的糖酵解、微生物繁殖生长等因素导致蛋白质变性、脂肪酸败。猪肉对脂质氧化非常敏感。但...
- 陈伟杜金芳崔景香陈其美杨伦胡艳霞曾勇庆
- 关键词:抗氧化性肉质特性
- 猪CuZnSOD基因的克隆、表达及功能分析
- 为了进一步了解和认识CuZnSOD基因的结构和功能,揭示CuZnSOD对猪抗氧化机能的影响,寻找与肉质性状相关联的分子标记,文章采用RACE(rapid amplification of cDNA end)方法,对莱芜猪...
- 杜金芳曾勇庆陈伟崔景香陈其美杨伦胡艳霞
- 关键词:CUZNSOD基因克隆
- 猪前体脂肪细胞的诱导分化及13个群体AFLP多态性研究
- 本论文对莱芜猪前体脂肪细胞的诱导分化和13个中外猪种(群)的AFLP多态性进行了研究。
脂肪沉积性状是猪的重要经济性状,与猪肉品质密切相关。前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化细胞,对其增殖和分化机...
- 胡艳霞
- 关键词:猪前体脂肪细胞诱导分化AFLP标记
- TaqMan荧光定量RT-PCR检测猪ADD1 mRNA方法的建立与应用
- 近年来,随着人们生活水平的提高,猪肉的肉质问题得到了消费者和生产者重视,遗传基础是改善肉品质的关键。猪脂肪细胞定向和分化因子1(ADD1)在脂肪细胞分化中起着重要作用,准确度量脂肪组织中ADD1 mRNA的表达量成为许多...
- 崔景香胡艳霞杨伦陈其美杜金芳陈伟石元祝洪磊曾勇床
- 关键词:荧光定量RT-PCRTAQMAN探针