罗宇维 作品数:17 被引量:43 H指数:3 供职机构: 南方医科大学第三附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 广州市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
Th17细胞在哮喘小鼠发病中的作用机制研究 被引量:19 2009年 目的初步探索Th17细胞在哮喘小鼠发病中的作用机制。方法30只小鼠随机均分为对照组和哮喘组。哮喘组小鼠于第0天(开始实验当天)和第14天给予腹腔注射生理盐水混悬液(含OVA 2mg,氢氧化铝乳化液5mg)200μl致敏,第21天开始给予含1%卵蛋白(OVA)的生理盐水40ml,雾化吸入,1次/d,每次40min,连续6d。对照组以等体积生理盐水代替致敏液及雾化液,余同哮喘组。观察2组小鼠BALF中细胞比例变化和气道病理改变;流式细胞术检测外周血、胸腺和肺组织中的Th17细胞。结果哮喘组BALF中细胞总数和中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞百分率均显著高于对照组(P<0.01)。病理观察可见哮喘组小鼠的气道炎症以中性粒细胞及嗜酸性粒细胞浸润为主,而对照组无此变化。哮喘组外周血及胸腺中Th17细胞(分别为3.62%±0.58%、6.96%±1.35%)显著增高,与对照组(分别为0.68%±0.26%、0.80%±0.30%)比较有显著性差异(P<0.01);而肺组织中Th17细胞很少,哮喘组(0.64%±0.30%)与对照组(0.55%±0.23%)相比无统计学差异(P>0.05)。结论Th17细胞在哮喘中的作用可能是通过胸腺释放入外周血,促进中性粒细胞及嗜酸性粒细胞在气道内聚集,参与哮喘气道炎症的发生。 龚雨新 于化鹏 邓火金 孙尔维 罗宇维关键词:小鼠 哮喘 白细胞介素17 自体凋亡细胞静脉回输联合雷帕霉素对恒河猴体内调节性T细胞的影响 2010年 目的观察凋亡细胞联合雷帕霉素对恒河猴体内调节性T细胞(Treg)的影响,探讨减少雷帕霉素用量,降低免疫抑制剂副作用的方法。材料及方法以CD4+FOXP3+调节性T细胞比例为观察对象,分组对比实验,4只雄性恒河猴8~10岁龄,体重7~8kg,随机分成实验组和对照组,每组2只。实验组采用低剂量雷帕霉素加凋亡细胞输注的方法,每天给予口服0.4mg雷帕霉素,同时静脉输注凋亡细胞一次;对照组每天给予同样剂量的雷帕霉素,同时静脉注射PBS。定期检测各组恒河猴外周血中CD4+Foxp3+Treg,并计算Treg占CD4+T细胞的比例。对比两组恒河猴Treg变化曲线的异同。结果单纯口服雷帕霉素的恒河猴,Treg/CD4+T比例在1只猴未见明显增加,在第38天为6.92%,另1只仅在4周后明显增加,在第38d为13.7%;而注射凋亡细胞联合雷帕霉素组的恒河猴,其Treg/CD4+T的比例在输注凋亡细胞后2~3周即有明显增加,2只猴在第38d Treg/CD4+T细胞比例升至16.67%和21.56%。结论凋亡细胞联合雷帕霉素有可能升高恒河猴体内Treg的比例。 陈晓延 顾冬生 罗宇维 李留洋 孙尔维关键词:凋亡细胞 调节性T细胞 雷帕霉素 恒河猴 通过细胞因子谱评估免疫抑制剂对人免疫状态的作用 排斥和感染是器官移植的两大难题,严重影响了受者术后的生存质量和移植物存活时间。这对茅盾的核心问题是缺乏准确有效的免疫状态评估方法。针对临床这个核心问题我们进行了有益的探索,首先,我们在体外应用不同的免疫刺激剂及不同刺激剂... 刘占国 袁小彭 罗宇维 何懿 孙尔维关键词:免疫状态 细胞因子 排斥 文献传递 他克莫司对全血细胞因子分泌的影响 被引量:4 2010年 目的研究免疫抑制剂他克莫司(Tacrolimus,FK506)在体外对全血细胞因子分泌的影响。方法健康志愿者全血加入不同浓度FK506,经佛波酯(PMA)和离子霉素(IONO)刺激后,用Bio-Plex悬浮蛋白芯片系统检测上清中细胞因子IL-2、IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γ、TNF-α、GM-CSF以及G-CSF的水平。结果同对照组相比,高浓度组FK506(20ng/ml)能显著抑制IL-2、IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γ、TNF-α、GM-CSF和G-SCF的分泌(P<0.05);中浓度组FK506(5ng/ml)能有效抑制GM-CSF的分泌,两组之间的差异有显著性(P<0.05)。结论FK506对全血细胞促炎症细胞因子IL-6,IFN-γ和TNF-α的分泌有较强的抑制作用,同时对IL-2,IL-12,IL-17以及集落刺激因子因子GM-CSF,G-CSF也有明显抑制作用。因此FK506发挥免疫抑制功能可能通过抑制免疫细胞分泌各类细胞因子来实现。同时,由于FK506与细胞因子的分泌有剂量依赖关系,有望可以通过FK506浓度水平与细胞因子的抑制水平的依赖关系来评估临床病人FK506的用量是否合理。 何懿 李民 刘占国 罗宇维 王明 张婕 孙尔维关键词:他克莫司 细胞因子 全血 免疫抑制 CFSE标记的淋巴细胞增殖实验检测方法的建立 被引量:2 2008年 目的建立基于流式细胞术和活细胞荧光染料CFSE的淋巴细胞增殖、单向混合淋巴细胞实验的免疫学检测方法。方法分离单个核细胞,将反应细胞经CFSE染色后,分别加入不同的淋巴细胞增殖刺激物或与灭活的异基因淋巴细胞共培养。培养后细胞经流式细胞术检测标记细胞是否增殖,应用CD4-PE抗体检测增殖细胞中CD4阳性T细胞亚群比例,ModFit软件分析增殖动力模型。计算增殖CDI或PI指数。结果基于CFSE建立的淋巴细胞增殖实验,经不同刺激物或异基因抗原刺激后增殖指数明显升高,使用CD4-PE抗体进行再次标记后可以对增殖实验中CD4阳性淋巴细胞亚群的增殖进行评估。结论成功建立了基于CFSE标记淋巴细胞的增殖实验检测方法,该方法简单、实用、灵敏度高,可以取代3H或MTT用于不同条件、不同免疫刺激情况下淋巴细胞增值的检测或评估。 孙尔维 袁小澎 罗宇维 陈忠华关键词:增殖 流式细胞术 不同免疫抑制剂对全血细胞白介素-1β分泌的影响 2016年 目的研究不同免疫抑制剂(他克莫司、地塞米松、环孢素A和吗替麦考酚酯)对佛波酯和离子霉素刺激下全血细胞分泌IL-1β的影响。方法健康志愿者静脉全血分别加入不同浓度的地塞米松、他克莫司、环孢素A和吗替麦考酚酯,经佛波酯和离子霉素刺激后,检测上清中细胞因子IL-1β。结果同对照组相比,低浓度、中浓度以及高浓度组的他克莫司、环孢素A和麦考酚酸均不能抑制IL-1β的分泌;而低浓度、中浓度以及高浓度组的地塞米松均能够有效地抑制IL-1β的分泌。结论不同免疫抑制剂对IL-1β的作用各不相同,仅地塞米松可以有效抑制IL-1β分泌,提示在自身免疫性疾病的治疗中,不同免疫抑制剂联合使用时,可以更全面地控制免疫系统,从而更好地治疗疾病。 何懿 罗宇维关键词:自身免疫性疾病 白介素1Β 免疫抑制剂 急性阑尾炎不同时期中性粒细胞活性与功能的变化及意义 2011年 目的比较急性阑尾炎感染期与恢复期中性粒细胞活性和吞噬能力的变化及中性粒细胞吞噬异物后死亡方式的差异及其临床意义。方法以珠江医院普通外科2010年,10例成年急性阑尾炎患者静脉全血作为样本,用磁珠分选法分离中性粒细胞,检测其0、12、24、48及72h细胞存活情况;在中性粒细胞中加入CFSE标记的珠子共同培养1~6h,流式细胞仪(FCS)检测中性粒细胞的活性及其吞噬情况。结果体外培养感染期患者中性粒细胞72h仍存活,正常人及恢复期患者中性粒细胞24h即出现大量死亡。病人感染期中性粒细胞在2h可达最大吞噬量,吞噬后细胞多发生凋亡;恢复期中性粒细胞在4h达到最大吞噬量,吞噬后细胞多发生坏死。结论感染期中性粒细胞活性明显高于正常人和恢复期患者的中性粒细胞。在感染期中性粒细胞吞噬异物后以细胞凋亡为主,而在恢复期中性粒细胞吞噬异物后细胞以坏死为主。这可能与不同时期中性粒细胞功能活化有关。 郑彦涛 厉周 罗宇维 史福军 李强 黄宗海关键词:中性粒细胞 急性阑尾炎 凋亡 凋亡和坏死细胞输注对脓毒症小鼠存活率的影响 被引量:2 2011年 目的研究凋亡和坏死细胞对脓毒症小鼠存活率的影响。方法将BALB/c小鼠分为3组,分别为PBS对照组、凋亡细胞输注组和坏死细胞输注组,输注3d后行盲肠结扎穿孔,制作脓毒症模型,观察脓毒症小鼠的存活率和器官病理损伤。结果 PBS对照组小鼠2周存活率为44.6%,肺脏和肾脏组织出现一定程度的损伤;凋亡细胞输注组1周存活率为69.6%,较对照组显著提高(P=0.012),肺脏和肾脏组织损伤明显减轻;坏死细胞输注组1周存活率为31.6%,较对照组显著下降(P=0.035),肺脏和肾脏组织损伤明显加重。结论脓毒症造模前3d输注凋亡细胞可以减轻器官损伤,提高脓毒症小鼠的存活率,而输注坏死细胞可以加重器官损伤,降低存活率。 刘占国 张婕 何懿 常平 顾冬生 罗宇维 孙尔维关键词:凋亡 坏死 脓毒症 存活率 线性免疫印迹法检测抗60 kD Ro/SSA IgG抗体的对比分析 2014年 目的评价5个不同厂家自身抗体谱线性免疫印迹法(LIA)试剂中的抗60 k D Ro/SSA Ig G抗体项目的一致性及符合率。方法收集本院54例自身免疫性疾病病人和10份2013年卫生部临检中心室间质评血清及30例健康人血清,同时使用酶联免疫吸附(ELISA)法和5个不同品牌LIA法试剂对血清中的抗60 k D Ro/SSA Ig G抗体进行检测,比较5个不同品牌LIA法试剂检测60 k D Ro/SSA Ig G抗体的一致性及总体符合率。结果 ELISA法试剂盒检测94例血清中阳性标本37例,阴性标本57例,同时进行的5种不同品牌LIA法抗核抗体谱试剂检测抗60 k D Ro/SSA Ig G抗体结果的总体符合率均超过90%,吻合系数均>0.8,说明一致性很好,但5种品牌均出现不相一致的阳性和阴性。结论 LIA法的抗核抗体谱检测试剂盒在检测抗60 k D Ro/SSA Ig G抗体项目中一致性很好,但检测结果可疑时应使用天然抗原包被的ELISA法试剂或双向扩散法进行复测。 劳小斌 何懿 罗宇维 谭礼平 孙尔维关键词:KD RO/SSA IGG抗体 酶联免疫吸附法 输入供体凋亡细胞对受体外周免疫耐受的影响 2009年 背景:预输注供者凋亡细胞能够诱导受者体内产生针对供者抗原发生的特异性免疫耐受,但其具体途径尚不清楚。目的:观察供体凋亡淋巴细胞输注后受体外周血细胞因子的变化。设计、时间及地点:细胞观察性实验,于2007-11/2008-05在南方医科大学附属珠江医院移植免疫实验室完成。材料:供体C57BL雄性小鼠14只,8~10周龄,受体Balb/c雄性小鼠50只,6~8周龄。方法:分离供体小鼠脾脏细胞,放置于紫外线灯距离20cm处的摇床上照射1h,紫外线诱导C57BL小鼠脾脏细胞凋亡。将受体Balb/c小鼠随机分为凋亡细胞组和活细胞组,分别将107个供体C57小鼠脾脏凋亡细胞、活细胞经尾静脉输注于受体小鼠。主要观察指标:输注后0,1,3,6,12h经心脏采血,Luminex技术液态芯片法检测外周血白细胞介素1β、白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素5、白细胞介素6、白细胞介素10、白细胞介素12、粒细胞-巨细胞集落刺激因子、干扰素γ、肿瘤坏死因子变化。结果:只检测到白细胞介素6、白细胞介素10、白细胞介素12、粒细胞-巨细胞集落刺激因子、干扰素γ5种细胞因子,其他细胞因子未测出。经紫外线诱导后小鼠脾脏细胞凋亡率达到93.86%。与0h相比,外周血中干扰素γ和白细胞介素10分别在输注活细胞后6h和3,6h明显升高,其他细胞因子无明显变化。与0h相比,输注凋亡细胞1,3,6,12h后,外周血中各细胞因子无明显变化。活细胞组输注后1h白细胞介素6和输注后3,6h白细胞介素10浓度高于凋亡细胞组,其他细胞因子差异不显著。结论:同种异源供者凋亡淋巴细胞输注对外周血细胞因子浓度无变化,提示其对受体外周免疫功能可能无明显影响,其诱导产生的免疫耐受可能主要在局部发挥作用。 夏武政 孙尔维 高毅 袁小鹏 罗宇维 汪艳 刘勇关键词:同种异基因 凋亡细胞 免疫耐受 外周血