程瑞雪 作品数:35 被引量:195 H指数:9 供职机构: 中南大学湘雅医学院基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 卫生部科学研究基金 湖南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
丙型肝炎病毒核心蛋白对核转录因子stat3活性的调控作用 被引量:3 2005年 目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白对核转录因子stat3活性的调控作用。方法:将表达HCV核心蛋白的真核细胞表达质粒pcDNA3.1-core转染人源肝细胞系QSG7701,建立稳定表达HCV核心蛋白的细胞株QSG7701-core,利用免疫细胞化学、W estern b lot及凝胶电泳迁移实验(EMSA)等方法检测stat3的磷酸化及DNA结合活性。结果:在表达HCV核心蛋白的QSG7701细胞中,stat3的磷酸化水平明显低于空白质粒转染组和未转染组,而总stat3的表达水平3组无明显差别;核内磷酸化的stat3阳性信号明显减弱;stat3的DNA的结合活性明显低于空白质粒转染组和未转染组。结论:在人源永生化肝细胞系中HCV核心蛋白的表达可能具有抑制stat3的磷酸化和DNA结合活性的作用,从而抑制JAK/stat3信号转导通路活化,这可能是HCV干扰素治疗效果不佳的原因之一。 冯德云 李波 郑晖 程瑞雪 曹亚关键词:丙型肝炎病毒 核心蛋白 肝细胞 核转录因子 丙型肝炎病毒NS3基因对人肝细胞生物学特性的影响 被引量:4 2007年 目的:建立稳定转染HCVNS3的人源肝细胞系,探讨HCVNS3对肝细胞生物学特性的影响。方法:通过脂质体将HCVNS3的真核表达质粒稳定转染至QSG7701细胞(pRcHCNS3/QSG细胞),PCR,WesternBlot,免疫组化检测基因的整合和表达;光学显微镜和电子显微镜观察转染前后细胞超微结构的改变;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率变化;生长曲线,软琼脂集落实验,成瘤性实验探讨HCVNS3对肝细胞增殖的影响。结果:HCVNS3基因在pRcHCNS3/QSG细胞中得到整合和表达,定位于细胞浆。形态学显示出增殖旺盛的的特点,流式细胞仪检测pRcHCNS3/QSG细胞G0/G1期细胞数目减少而S期细胞数目增加,生长曲线和软琼脂集落实验表明pRcHCNS3/QSG细胞倍增时间明显缩短,停泊非依赖性生长能力明显增强,并能接种裸鼠成瘤,免疫组化证实肿瘤组织有HCVNS3蛋白表达。电镜和流式细胞仪检测显示HCVNS3能促进pRcHCNS3/QSG细胞凋亡。但其促增殖速度远大于凋亡率,表现为pRcHCNS3/QSG细胞获得恶性表型和致瘤性。结论:HCVNS3能明显促进人肝细胞QSG7701恶性转化,pRcHCNS3/QSG细胞可作为研究HCVNS3致癌机理的细胞模型。 何琼琼 肖旭贤 冯德云 李波 郑晖 程瑞雪关键词:丙型肝炎病毒 基因转染 生物学特性 肝细胞癌发生中丙型肝炎病毒NS_3蛋白对诱导型一氧化氮合酶表达的影响 被引量:5 2001年 目的 :研究肝细胞癌 (HCC)及其癌旁肝组织 (PCLT)中丙型肝炎病毒 (HCV)NS3 蛋白对诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA表达的影响 ,以探讨其在HCC发生中的作用。方法 :利用SP免疫组化和原位杂交技术检测 5 2例HBV(- )的HCC及其PCLT中HCVNS3 蛋白和iNOSmRNA的表达 ,并比较两者的相关性。结果 :HCC中HCVNS3 蛋白的阳性率 (4 6 .2 % )和信号强度明显低于PCLT(6 7.3% ) ,且其表达强度与癌细胞分化程度相关 (P <0 .0 1) ;iNOSmRNA的阳性率 (80 .8% )与PCLT中者无差别 (90 .4% ,P <0 .0 1) ,但其阳性信号强度明显低于PCLT(P <0 .0 5 )。PCLT中HCVNS3 蛋白表达愈高iNOSmRNA的信号强度愈强 (P <0 .0 1) ,特别是在有些病例中两者的定位和信号形态几乎一致。结论 :HCVNS3 冯德云 程瑞雪 郑晖 蒋海鹰 沈明关键词:丙型肝炎病毒 一氧化氮合酶 一氧化氮 HCV TGFβ_1及其受体TGFβ RI在唾液腺腺样囊腺癌组织中的表达 被引量:9 2002年 目的 :研究TGFβ1 及其TGFβRI在唾液腺腺样囊腺癌中的作用。方法 :应用免疫组化SP法检测唾液腺腺样囊腺癌中TGFβ1 和TGFβRI的蛋白表达 ,并与正常唾液腺及唾液腺多形性腺瘤作定量比较。结果 :①TGFβ1 和TGFβRI蛋白在正常唾液腺组织中主要表达于各级导管上皮细胞和肌上皮细胞中 ,腺泡细胞无表达 ;②TGFβ1和TGFβRI蛋白在唾液腺多形性腺瘤组织中主要表达于呈腺管状、条索状及团块状排列的肿瘤上皮细胞中 ,其表达水平与正常唾液腺差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;③唾液腺腺样囊腺癌组织中TGFβ1 蛋白表达水平显著增高 (P <0 .0 1) ;TGFβRI蛋白表达水平显著降低 (P <0 .0 1)。结论 :TGFβRI蛋白的低表达在唾液腺腺样囊腺癌的发生发展中起重要作用 ,腺样囊腺癌独特的不良生物学行为可能与TGFβ1 蛋白的过度表达以及TGFβRI蛋白的低表达有关。 郭峰 翦新春 程瑞雪 姚志刚 沈明 冯德云 周建华关键词:转化生长因子Β1 转化生长因子Β受体I 免疫组化SP法 肝细胞癌和癌旁肝组织中PTEN蛋白表达及其临床意义 被引量:14 2001年 目的 探讨肝细胞癌 (HCC)和癌旁肝组织中PTEN蛋白表达及其临床意义。方法利用SP免疫组织化学技术检测PTEN蛋白在HCC及其癌旁肝组织的表达。结果PTEN蛋白在HCC中的阳性率和阳性强度均低于癌旁肝组织(P <0 .0 1) ;HCC中PTEN蛋白的表达强度与患者的性别和肿瘤的大小无关 (P >0 .0 5 ) ,但与肿瘤细胞的分化程度明显相关 (P <0 .0 1)。分化愈差 ,表达愈弱。结论提示检测PTEN蛋白可能对判断HCC的预后具有一定意义。 冯德云 郑晖 程瑞雪 颜亚晖关键词:肝细胞癌 病理学 癌旁肝组织 PTEN 抑癌基因 肝细胞癌发生的分子机理 被引量:1 2001年 肝细胞癌 (HCC)的发生常常存在p5 3,m6p/IGF2R ,P16INK4A ,RB ,APC等一系列基因突变。它们所作用的四种生长调节途径分别为 :①p5 3介导的DNA损害修复途径 ;②RB介导的细胞周期控制途径 ;③TGF β介导的凋亡和抑制增殖途径 ;④β 孙意 程瑞雪关键词:肝细胞癌 基因表达调控 基因突变 分子机理 肝细胞癌及癌旁肝组织中PTEN表达与MAPK磷酸化的相关性 被引量:3 2002年 目的 :研究肝细胞癌 (HCC)及癌旁肝组织中PTEN表达与丝裂素激活的蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinase ,MAPK)磷酸化的相关性。方法 :利用SP免疫组织化学检测 75例HCC及其癌旁肝组织中PTEN蛋白和p4 2 4 4 MAPK的表达。结果 :①HCC中PTEN蛋白的阳性率 (6 2 7% )和阳性强度明显低于癌旁肝组织 (89 3% ) (P <0 .0 1) ,且阳性信号强度与HCC分化程度相关 (P <0 .0 1) ,即HCC分化愈差 ,PTEN蛋白表达愈弱。②HCC中p4 2 4 4 MAPK 的阳性率 (85 3% )和表达强度明显高于癌旁肝组织 (34 7% ) (P <0 .0 1) ,但阳性信号强度与癌细胞分化程度无关 (P >0 .0 5 )。③相关性分析表明 ,HCC及癌旁肝组织中PTEN蛋白表达强度和MAPK磷酸化程度呈明显负相关(P <0 .0 1)。结论 :提示在HCC发生中 ,可能是由于PTEN蛋白表达降低或缺失 ,不能有效抑制由致癌因子异常激活的Ras Raf MAPK信号转导通路 。 冯德云 程瑞雪 郑晖 蒋海鹰 颜亚晖关键词:肝细胞癌 癌旁肝组织 MAPK 磷酸化 抑癌基因 原发性肝细胞癌中PTTG和c-myc基因表达的研究 被引量:4 2003年 目的:研究 PTTG 和 c-myc 基因表达在原发性肝细胞癌 (HCC)发生发展中的作用.方法:应用原位杂交(DNA-RNA)技术与免疫组化 SP 法分别检测61例原发性肝细胞癌及癌旁肝组织中 PTTG mRNA 和PTTG 蛋白及 c-myc mRNA 和 c-myc 蛋白的表达.结果:在原发性肝细胞癌(HCC)中,PTTG mRNA 和 PTTG蛋白阳性细胞呈弥漫性、小巢状或散在分布,在胞质内呈全浆型、膜下型表达.PTTG mRNA 和 PTTG 蛋白在 HCC 中表达率分别为72.1%(44/61)和78.7%(48/61),在癌旁肝组织中分别为93.4%(57/61)和91.8%(56/61),在 HCC中表达明显低于癌旁肝组织(P<0.005,P<0.05).相关性检验显示癌及癌旁 PTTG 基因表达与 c-myc 基因表达呈正相关(P<0.005).结论:PTTG 基因过度表达参与了肝细胞癌发生发展,过度表达的 FTTG 可能通过激活癌基因 c-myc 来参与肝细胞恶性转化和肝细胞癌的发生发展过程. 金中元 程瑞雪 郑长黎 郑晖关键词:原发性肝细胞癌 PTTG基因 C-MYC基因 原位杂交技术 免疫组化SP法 原发性肝细胞癌中p16和cyclin D1蛋白表达及p16突变研究 被引量:15 2001年 目的 :研究p1 6和cyclinD1蛋白表达及p1 6基因第 2外显子突变与原发性肝细胞癌 (HCC)发生的关系。方法 :利用SP免疫组织化学方法与多聚酶链反应———单链构象多态性 (PCR SSCP)分析技术分别检测 44例HCC及癌旁肝组织p1 6和cyclinD1蛋白表达和 1 2例新鲜手术肝癌组织的p1 6基因突变。结果 :HCC中p1 6蛋白阳性率和阳性信号强度明显低于癌旁肝组织 (P <0 .0 1 ) ,而cyclinD1蛋白阳性率和阳性信号强度明显高于癌旁肝组织。 1 2例新鲜HCC标本中p1 6基因第 2外显子突变率为 1 6 .7% (2 /1 2 ) ,癌旁组织未发现p1 6基因第 2外显子突变 ;有p1 6基因突变的HCCp1 6蛋白表达呈阴性。结论 :p1 6蛋白失活或 /和缺乏可能是肝细胞增殖失控的重要因素之一 ;HCC存在p1 6基因第 2外显子突变 ,但不是频发事件 ;在HCC形成过程中 ,p1 黄谷香 程瑞雪 冯德云 蒋海鹰 傅春燕 沈明关键词:P16 CYCLIND1 突变 多聚酶链反应 病理学双语教学的几点体会 被引量:28 2006年 为培养具有较高水平英语交流能力的医学人才,我们尝试在七年制、五年制各专业医学生的病理教学中开展了双语教学。通过课前精心准备、采用多种教学方法和手段,课后强化训练等,获得了较好的效果。本文总结了几点经验和体会。 何琼琼 程瑞雪 文继舫 周建华 胡永斌 王颖关键词:双语教学 病理学