公共文化服务平台

枯草芽孢杆菌6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶的纯化及部分性质研究: 在对枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-phosphogluconate dehydrogenase,6-PGADase,E.C.1.1.1.44)分离纯化的基础上,对其性质进行...; 秦岭; 关键词：枯草芽孢杆菌分离纯化; 文献传递

瘦肉型猪(PIC344)精液碱性磷酸酶功能基团的化学修饰被引量：4: 2003年; 经正醇抽提、硫酸铵分级沉淀、DEAE SepharoseFF和SephacrylS 200柱层系,从瘦肉型猪(PIC344)精液中提取出电泳纯碱性磷酸酶。用NBS,PMSF,TNBS,DTT及AcBr在一定条件下分别选择性的作用于PIC344AKP的Trp,Ser,Lys,His及巯基,并对酶活力的变化和吸收光谱的变化作了测定,结果表明,NBS,TNBS,PMSF,DTT的修饰能显著的抑制AKP的活力,活力的降低与修饰剂的浓度呈正相关;AcBr的修饰对AKP的活力没有明显的影响。作者认为Trp,Ser,Lys及巯基可能是AKP活力的必须基团。; 国锦琳刘克武陶科秦岭刘鑫黄新河陈祁磊; 关键词：瘦肉型猪精液碱性磷酸酶功能基团化学修饰 TRP

枯草芽孢杆菌6-磷酸葡萄糖脱氢酶的纯化及性质被引量：2: 2003年; 枯草芽孢杆菌通过超声破壁,(NH4)2SO4分段盐析,DEAE SepharoseFF离子交换层析,Blue SepharoseCL 6B亲和层析,SephadexG 200凝胶过滤等纯化步骤,分离出6 磷酸葡萄糖脱氢酶。经PAGE和SDS PAGE检测为单一蛋白区带,比活1 7375IU/mg,纯化倍数72 7,收率13 6%。凝胶过滤法测定表观分子量220KD,SDS PAGE测定亚基分子量50 5KD,可见该酶是由四个相同亚基构成的四聚体。测定最适pH、温度分别为8 5,37℃,底物G6P的Km值0 177mmol·L-1。考察了部分金属离子及EDPA对该酶活性、紫外、荧光光谱的影响。; 莫宏春刘克武孟延发江琰秦岭宋贤丽; 关键词：枯草芽孢杆菌纯化激活剂光谱抑制剂

Star-PAP蛋白的纯化分析及其限定性因子的分离: 2014年; 克隆并构建了Star-PAP的表达载体,然后将该载体转染HEK293细胞,经纯化得到了重组的Star-PAP蛋白.以细胞总RNA和体外转录的U6snRNA为底物,对纯化到的Star-PAP的TUTase活性进行了分析.结果显示重组的Star-PAP能够对细胞总RNA以及U6snRNA进行体外尿苷化修饰,表明纯化到的Star-PAP具有良好的TUTase活性.此外,使用HPLC分离得到了具有U6snRNA底物特异性的细胞核组分.该组分除了含有StarPAP外,还含有一种未知蛋白,该未知蛋白可能就是赋予Star-PAP底物特异性的限定性因子.; 于春雷田平平吴传芳欧阳劲秦岭; 关键词：SNRNA TUTASE

枯草杆菌6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶的分离纯化及部分性质研究被引量：3: 2003年; 采用DEAE Sepharose离子交换层析,Blue SepharoseCL 6B特异结合层析和SephadexG 200凝胶过滤技术,对枯草芽孢杆菌中的6 磷酸葡萄糖酸脱氢酶进行了分离纯化.纯化倍数为112.3倍,比活为1.46U/mg,回收率为8.2%.纯化酶液经聚丙烯酰胺凝胶电泳检验为单一带.测得全酶相对分子质量为107kD,具有两个分子量相同的亚基,亚基相对分子质量为51kD.最适pH值为8.0,最适温度为30℃,对热不稳定.以6 磷酸葡萄糖酸和NADP+为底物,其Km值分别为Km1(NADP+)=19.8μmol/L和Km2(6 GPA)=22.6μmol/L.在5mmol/L～50mmol/L浓度范围内,Mg2+,Ca2+和Mn2+对酶有激活作用,Fe3+和Cu2+对酶有抑制作用,K+,Na+,Cl-,NO-3,SO-4对酶几乎没有影响.用PMSF,TNBS,NBS,DTT和BrAc对酶进行修饰,实验结果表明,丝氨酸、苏氨酸、赖氨酸和组氨酸残基可能是该酶活性中心的功能基团.; 秦岭刘克武莫宏春江琰国锦林刘祝君喻东; 关键词：枯草芽孢杆菌分离纯化

胚胎干细胞中DPPA2和DPPA4蛋白相互作用的研究: 2013年; 本文分别构建了小鼠胚胎干细胞的带FLAG多肽标签的DPPA和带HA多肽标签的DPPA4蛋白真核表达载体.将该质粒转入小鼠成纤维细胞HEK293中进行细胞体内表达,并利用免疫印记和免疫共沉淀技术证明了DPPA2和DPPA4蛋白在细胞内可以相互作用.因此,提出了在胚胎干细胞的自我更新和分化等过程中,DPPA2和DPPA4蛋白相互作用的结论.; 杨洁雷霆钧田平平吴传芳欧阳劲秦岭; 关键词：胚胎干细胞免疫印记免疫共沉淀

用中药渣生产蛋白饲料的方法: 一种用中药渣生产蛋白饲料的方法，工艺步骤依次为：(1)中药渣的预处理，即将中药渣进行干燥和粉碎；(2)配料与混料，固态物质与水按1∶1～1∶3质量比进行配料，固态物质所含组分及各组分的质量份数为：预处理后的中药渣100份...; 王向东王兵谭显东秦岭; 文献传递

HEXIM1蛋白与Alu SINE RNA相互作用的研究被引量：1: 2014年; 为了探讨Alu SINE RNA和HEXIM1蛋白之间是否存在相互作用.本实验构建了带有FLAG标签的HEXIM1真核表达载体,转染人胚肾293(HEK293)细胞,做anti-FLAG的RNA免疫共沉淀(RIP)后运用免疫印记和逆转录PCR(reverse transcription PCR,RTPCR)等方法检测.证明了Alu SINE RNA和HEXIM1蛋白之间存在相互作用,表明Alu SINE RNA和HEXIM1蛋白共同影响基因转录调控,以及细胞在应对外界刺激时能及时在基因水平做出有效反应的可能.; 田平平吴传芳欧阳劲秦岭; 关键词：ALU SINE RNA 免疫印迹基因转录调控

HEK293细胞中CDK10蛋白复合体的分离纯化被引量：1: 2013年; 通过半定量RT-PCR(reverse transcriptase PCR)检测了CDK10在人胚胎肾细胞(HEK293)、人宫颈癌细胞(HeLa)、人乳腺癌细胞(MCF7)中的表达水平,克隆并构建了全长CDK10基因的真核表达质粒.在HEK293中筛选得到了稳定表达CDK10-Flag的细胞系,大规模培养该细胞系,分离细胞核、细胞质提取物,在非变性条件下利用anti-Flag抗体免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP),银染及蛋白质免疫印迹检测结果表明分离到CDK10蛋白及与其可能结合的其它蛋白,为质谱(Mass Spectrum,MS)鉴定提供材料.; 赵长宏陈斌吴传芳欧阳劲秦岭; 关键词：蛋白纯化银染

果蝇P-TEFb与人源P-TEFb组成亚基间相互作用的研究被引量：1: 2014年; 本实验克隆了果蝇与人源P-TEFb(positive transcription elongation factor)组成亚基CycT、CDK9C末端分别带有Flag、HA标签的真核表达质粒,并在293细胞中验证了克隆所得质粒的有效表达.使用免疫共沉淀方法证实了两个种属P-TEFb组成亚基间结构的相似性;借助HIV-luciferase与Rellina的双荧光报告系统证实了两个种属P-TEFb组成亚基间功能上的相似性.; 陈斌吴传芳欧阳劲秦岭; 关键词：P-TEFB FLAG 免疫共沉淀

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

秦岭