王淑荣 作品数:34 被引量:75 H指数:4 供职机构: 吉林大学第二医院 更多>> 发文基金: 吉林省科技厅国际合作项目 吉林省科技发展计划基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
SPACR原核表达载体的构建和表达 2011年 目的构建Sialoprotein associated with cones and rods(SPACR)原核表达载体并高效表达。方法根据基因文库中SPACR基因的cDNA序列设计引物,采用PCR方法扩增SPACR cDNA片段,并克隆进原核表达载体pGEX-6P-1中,转化于大肠杆菌BL21,测序鉴定后,用IPTG诱导表达出目的蛋白,经谷胱甘肽琼脂糖柱柱层析纯化,收获表达产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western blot鉴定。结果 PCR后扩增得到的目的片段,经酶切鉴定及DNA序列测定,证实重组载体pGEX-6P-1-SPACR构建正确,表达蛋白分子量约为分别为21.2、22.6、36.2及20.8kDa。结论在大肠杆菌中获得了SPACR片段的高效表达,为研究其蛋白功能奠定了基础。 赵劲松 黄岚峰 王淑荣关键词:原核表达 融合蛋白 应用组织块培养法对大鼠视网膜干细胞进行分离培养及鉴定 被引量:2 2010年 目的:应用组织块培养大鼠视网膜干细胞的有效性。方法:机械分离出生10d大鼠睫状体组织,剪成细小组织块,置入20μg/L碱性成纤维细胞生长因子、20μg/L表皮生长因子及1×B27添加剂的无血清DMEM/F12培养液中培养,同时取大鼠胚胎脑组织,应用常规机械-酶消化法进行神经干细胞的分离培养作为阳性对照。应用免疫荧光染色检测神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白(nestin)的表达,应用含100mL/L的胎牛血清的培养基促进其分化以确定其神经干细胞特性。结果:原代培养48h后在组织块边缘开始出现细胞团,折光性强,呈球形或者桑葚状悬浮生长。培养4~5d后,悬浮生长的细胞团数量增多,出现较大的细胞团,原代培养7d后传代,传代后细胞能重新形成细胞团。应用免疫荧光方法可检测到细胞内nestin阳性表达,且视网膜干细胞可在以血清为诱导条件下变为贴壁生长,并分化出具有神经细胞形态的细胞。其形态、增殖及可分化特性与作为阳性对照的神经干细胞相似。结论:组织块培养法对细胞损伤小,操作简便,可成功对大鼠视网膜干细胞进行分离培养。 齐首楠 苏冠方 王晨光 王淑荣 穆毓关键词:组织块培养法 视网膜干细胞 纳米控释系统在眼科给药方面应用的研究进展 被引量:4 2015年 纳米材料在眼部给药方面的应用主要集中在纳米控释系统,由于纳米材料的特有属性,使用纳米材料运载治疗眼部疾病的药物与传统给药方式相比具有很大的优越性,主要表现在药物的纳米制剂具有更高的生物利用率和更低的副作用。因此纳米控释系统在眼科具有良好的应用前景。目前,已经有多种不同类型的纳米控释系统被用于提高眼部给药效率的研究,包括纳米胶束、纳米颗粒、纳米混悬剂、脂质体和树突状分子等。本文就纳米控释系统在眼科给药方面应用的研究进展作一综述。 王淑荣 王选重 崔学军 张妍关键词:纳米材料 控释系统 药物治疗 大鼠视网膜干细胞转染绿色荧光蛋白的实验研究 被引量:1 2012年 目的观察蛋白质粒转染大鼠视网膜干细胞后蛋白的表达及细胞生长、分化情况。方法应用机械-酶消化法将出生10d大鼠的睫状体组织制成单细胞悬液,并应用含20μg/L表皮生长因子、20μg/L碱性成纤维细胞生长因子和1×B27添加剂在无血清DMEM/F12培养基中培养。取第2代细胞应用免疫细胞化学染色检测神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白(nestin)及细胞分裂增殖标志物5-溴脱氧尿核苷(5-bromodeoxyuridine,BrdU)的表达。应用脂质体转染法将含有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的质粒pGCsilencerTM U6/Neo/GFP转染到RSCs内,转染后应用荧光显微镜观察细胞生长情况,转染后应用G418筛选,一周后对转染后的细胞应用含50ml/L的胎牛血清的培养基进行诱导分化,并应用免疫细胞化学染色方法对于分化后的细胞进行神经元标志物神经元特异性烯醇酶(neurone specific enolase,NSE)、神经胶质细胞标志物神经胶质酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)检测。结果原代细胞培养2d后在培养基内可以观察到悬浮的折光性强的小细胞团,4-5d后细胞团数量增多且体积变大,7-9d后细胞传代,应用免疫细胞化学方法可检测到细胞表达神经标志物nestin及增殖标志BrdU,基因转染1d后即可在细胞内观察到荧光的表达,于转染2-3d后荧光逐渐增强并可维持较长时间。筛选一周时细胞基本均表达GFP。转染后细胞的生长特性未发生明显变化,在以血清为诱导条件下仍可分化出神经样细胞。诱导第7日免疫化学染色分别检测出神经元及胶质细胞标志物NSE及GFAP的表达。结论来源于睫状区的大鼠视网膜干细胞经基因转染后可在一定时间内稳定表达,并且细胞增殖及分化未受到明显影响,实验为下一步进行RSCs内表达或抑制特定的目的基因的实验研究奠定了基础。 王淑荣 王晨光 齐首楠 苏冠方关键词:视网膜干细胞 荧光蛋白 基因转染 视野缺损对蝶鞍区肿瘤诊断及治疗的意义 被引量:4 2005年 目的:探讨视野缺损对蝶鞍区肿瘤诊断及治疗的意义。方法:对22例(44只眼)蝶鞍区肿瘤患者的视野检查结果,其中包括眼科门诊患者8例(16只眼)、住院患者14例(28只眼),进行回顾性分析。结果:蝶鞍区肿瘤以垂体瘤居多(81.8%)。在首发症状中视力下降占大多数,为77.3%,并可伴有头痛或者其他症状如内分泌异常等。眼底检查视盘苍白者占多数(81.8%)。视野改变以垂直性偏盲为主要表现,其中典型的表现为双眼或单眼颞侧偏盲。常用手术治疗方式为经额颞幕上开颅手术及经蝶骨入路手术,术后视力、视野均有不同程度恢复。结论:蝶鞍区肿瘤中垂体瘤占大多数。视野改变可表现为垂直性偏盲、不规则视野缺损、视野向心性缩小等。 王淑荣 王晨光 王宏丽 鲍美英关键词:视野缺损 蝶鞍区肿瘤 角膜生物力学特性的测量方法研究现状 被引量:11 2016年 角膜是人眼的主要屈光介质。作为一种黏弹性生物组织,角膜具有非线弹性、黏弹性和各向异性的复杂生物力学特性。角膜的生物力学特性对维持角膜的正常形态及功能具有重要作用。在许多眼部疾病中,角膜生物力学的改变常常早于临床症状的出现。因此对角膜生物力学特性的定量测量有利于疾病的早期诊断和治疗。目前测量角膜生物力学有多种方法,包括经典的体外实验,已应用于临床的在体测量法和其他的一些具有临床应用潜力的在体测量法。各种方法测量原理不同并有其相应的优缺点。 汪倩 王琳琳 张妍 王淑荣关键词:角膜生物力学 眼反应分析仪 大鼠视网膜干细胞与神经干细胞体外增殖、分化特点比较 2011年 目的 通过对大鼠视网膜干细胞和神经干细胞体外增殖、分化特点进行比较,进一步明确视网膜于细胞自我更新及向神经细胞方向分化的能力.方法 实验研究.分离出生10 d大鼠睫状体区组织及新生大鼠脑组织,分别应用酶消化法将两种组织制成单细胞悬液,放入含有20 μg/L碱性成纤维细胞生长因子、20μg/L表皮生长因子及1×B27添加剂的无血清DMEM/F12培养液中培养,观察并比较视网膜干细胞及神经干细胞体外增殖的特点.分别取第2代细胞,应用免疫细胞化学染色法检测干细胞特异性抗原神经巢蛋白(nestin)及细胞分裂增殖标志物5-溴脱氧尿核苷(BrdU)的表达.同时,应用含50 ml/L的胎牛血清及1×N2添加剂的培养基促进其分化,观察两种细胞向神经细胞方向分化的特点:分别应用免疫细胞化学染色法对分化后的细胞nestin、神经无标志物神经元特异性烯醇酶(NSE)、神经胶质细胞标志物神经胶质酸性蛋白(GFAP)进行检测,并应用卡方检验对两种干细胞分化后的NSE及GFAP阳性细胞数比例进行比较.结果 两种细胞原代培养48 h后均可见小的球状细胞团悬浮生长,折光性强.原代培养约7 d后传代,传代后细胞能重新形成球状细胞团,应用免疫细胞化学染色方法均可检测到细胞内nestin及BrdU的阳性表达,视网膜干细胞体外增殖的能力较神经干细胞弱.两种细胞均可在血清诱导条件下转变为贴壁生长,并分化出具有神经细胞形态的细胞.诱导第7天进行免疫细胞化学染色,检测出两种干细胞表达nestin阳性细胞数比例分别为(9.5±3.5)%及(9.1±0.7)%.视网膜干细胞分化后NSE及GFAP的阳性细胞数比例分别为(11.2±2.8)%及(18.9+2.1)%,低于神经干细胞分化后两种标志物阳性细胞数比例[(34.1±63)%及(41.9±3.3)%],NSE、GFAP在两组表达的差异均有统计学意义(x2=103.23,P<0.05;x2=74.36,P<0.05).结论 来 王晨光 刘早霞 齐首楠 王淑荣 苏冠方关键词:干细胞 细胞培养技术 WISTAR 过敏性结膜炎致角膜形态改变及视力下降1例 2023年 患者,女,33岁,房地产销售。因"双眼视物模糊2 d",于2019年5月29日来吉林大学第二医院眼科就诊。我院检查结果如下:2019年5月29日13时52分电脑验光:右眼-14.25 DS-6.50 DC×10°;左眼-8.75 DS-5.00 DC×170°。显然验光:右眼-14.00 DS-6.00 DC×5°=0.16;左眼-14.25 DS-6.50 DC×180°=0.3。双眼眼前节及眼底检查未见异常。 张双晴 王淑荣 何宇茜 张妍关键词:房地产销售 电脑验光 眼底检查 眼前节 飞秒激光小切口透镜取出术治疗屈光不正后的角膜形态变化研究进展 被引量:3 2018年 飞秒激光小切口透镜取出术(small incision lenticule extraction,SMILE)作为目前最前沿的治疗屈光不正的激光手术方式,因其耗时短、并发症少、疗效好等优势而被广泛应用。SMILE在我国的开展已超过5 a,有很多针对其术后角膜形态变化的研究以检验手术的可靠性。本文将对SMILE术后的角膜形态变化进行综述。 刘邓君 王淑荣 张妍关键词:屈光手术 飞秒激光小切口透镜取出术治疗屈光不正后的角膜形态变化研究进展 飞秒激光小切口透镜取出术(small incision lenticule extraction,SMILE)治疗屈光不正手术作为目前最前沿的治疗屈光不正的激光手术方式,因其耗时短、并发症少、疗效好等优势而被广泛应用.S... 张妍 王淑荣关键词:屈光手术 角膜形态