王淑玲
- 作品数：11 被引量：60H指数：5
- 供职机构：北京大学基础医学院干细胞研究中心更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 酶消化结合差时贴壁的方法体外分离培养人子宫内膜细胞被引量：2
- 2013年
- 目的探讨酶消化结合差时贴壁培养的方法对人子宫内膜细胞进行体外培养的培养效果,以寻找一种简单高效的人子宫内膜细胞体外分离培养的方法。方法采用胶原酶消化结合差时贴壁的方法,对人正常子宫内膜细胞进行体外分离培养,并传代、冻存及复苏。光镜下观察其培养效果,通过免疫荧光法对腺上皮细胞及间质细胞进行鉴定,并分析其纯度。结果共培养人子宫内膜38份,成功培养35份,培养成功率92%,冻存后成功复苏率达97%;子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞分别经角蛋白单抗和波形蛋白单抗免疫荧光显色为阳性,腺上皮细胞和间质细胞原代纯度均达90%以上。结论酶消化结合差时贴壁的培养方法,操作简单、培养成功率高、污染机会少、省时、维持细胞活性好,是子宫内膜细胞体外分离培养的简单高效方法。
- 刘明慧晁贺张亚兰王鹏李建梅王淑玲刘英
- 关键词：子宫内膜
- 骨髓细胞移植上调血管内皮生长因子及其受体的表达并改善缺血心脏功能被引量：21
- 2003年
- 目的 :通过骨髓细胞移植对心肌梗死大鼠模型血管内皮生长因子及其受体表达的影响 ,探讨骨髓细胞移植改善缺血心脏功能的可能机制。方法 :利用左前降支冠状动脉结扎术制备大鼠心肌梗死模型 ,然后行异体骨髓细胞移植 ;分别于术后 1d ,3d ,7d ,14d和 2 8d取材 ;利用免疫荧光和RT -PCR技术分析细胞移植对血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体 (Flk 1)表达的影响和移植细胞的分化情况 ;通过免疫组化计算血管数量 ;应用血流动力学检测大鼠心脏功能在术后各时间点的变化。结果 :VEGF和Flk 1在移植组动物的心肌梗死区残存细胞、梗死周边区细胞以及部分移植细胞内表达。移植组VEGF和Flk 1的mRNA表达明显高于对照组 ,分别于术后 3d和 14d达到高峰 ,以后逐渐减弱。术后 7d ,14d和 2 8d移植组血管数量较同期对照组明显增加 ,移植组心脏功能较对照组明显改善。术后 14d可在部分移植细胞中检测到心肌细胞或血管内皮细胞特异性蛋白的表达。结论 :骨髓细胞移植通过上调移植细胞及受者内源性VEGF和Flk 1的表达 ,促进血管新生 ,进而改善缺血心脏功能。
- 张少衡贾竹青郭静萱张马康涛王淑玲刘永刚李凌松北京大学干细胞研究中心周春燕
- 关键词：骨髓细胞移植血管内皮生长因子受体
- 获得源于同一动物祖细胞的同步化干细胞的技术
- 本发明公开了一种获得源于同一动物祖细胞的同步化干细胞的技术,该方法是将动物的祖细胞注入呈全身免疫缺陷状态的哺乳纲啮齿目鼠科动物的体内,所述祖细胞在鼠科动物的脾内分裂增殖,然后经在鼠科动物体内的同步化处理,得到由同一祖细胞...
- 沈丽南燕王淑玲王珂
- 文献传递
- 诱导胶质纤维酸性蛋白阳性神经前体细胞系向神经元分化
- 2003年
- 目的 :探讨来源于人胚胎脑室下区 (SVZ)的胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)阳性神经前体细胞系向神经元分化的潜能。方法 :分别采用定量RT PCR、Western印迹分析及免疫荧光染色检测被全反式视黄酸诱导前后GFAP阳性神经前体细胞系中神经干细胞和神经元特异性标志物表达量的变化情况。采用免疫荧光染色检测GFAP阳性神经前体细胞系移植到动物体内后神经元特异性标志物表达情况。结果 :在体外诱导后 ,GFAP阳性神经前体细胞系中神经元特异性标志物在mRNA和蛋白水平的表达量上升 ,而神经干细胞标志物表达量下降。移植动物体内 ,GFAP阳性神经前体细胞系可分化产生神经元。结论 :GFAP阳性神经前体细胞系在体内外可以向神经元诱导分化。
- 白云林昌盛扈启宽李肖霞陆爱丽王淑玲李凌松沈丽
- 关键词：神经前体细胞神经元细胞分化胶质纤维酸性蛋白
- 神经干细胞脑脊液移植后存活及迁移规律研究被引量：15
- 2005年
- 目的观察神经干细胞(NSC)经侧脑室穿刺法移植入小鼠脑内脑脊液(CSF)循环后其存活、迁移规律及接受移植小鼠的生长发育状况。方法将绿色荧光蛋白(GFP)标记的1×105 新鲜人源胚胎NSC悬液经侧脑室穿刺法移植入小鼠CSF循环,观察移植后小鼠的生长发育情况,并在移植后24 h、48 h、2周及10 周分别取脑行连续切片,通过荧光显微镜观察细胞存活及分布情况。结果在移植后的不同时间点,脑室内均可见到大量GFP阳性细胞,部分移植细胞向脑实质迁移,穹窿海马伞、海马、胼胝体、隔区、室管膜下区及血管壁旁均可见到GFP阳性细胞。此外,在穿刺针道周围也可见GFP阳性细胞。所有接受NSC移植的小鼠的生长发育良好,未见任何行为学异常表现,经10周观察未发现移植的NSC有成瘤现象。结论经侧脑室穿刺法移植的NSC可在宿主小鼠CSF循环良好存活,并具有向局部脑实质内迁移的能力。NSC移植对小鼠的生长发育无明显影响,具有较好的安全性。
- 王力平樊东升王荫华沈丽王淑玲王惠芳宋红松张俊
- 关键词：神经干细胞脑脊液存活迁移小鼠
- 巢蛋白和神经元素3在人胚胎胰腺中的表达和分布被引量：8
- 2005年
- 目的探讨胰腺干细胞标志巢蛋白(nestin)和神经元素3(Ngn3)在人胚胎胰腺组织中的表达及其与内分泌细胞、导管细胞和外分泌细胞标志的共表达情况.方法以因病理因素行药物引产的12周～14周前人胚胎胰腺14例为材料,应用免疫荧光染色和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测nestin和Ngn3的表达情况,免疫荧光染色检测胰腺内分泌标志胰岛素、胰高血糖素和外分泌标志CK-PAN和CK-19.结果 nestin和Ngn3在12～14周人胚胎胰腺组织均广泛表达.nestin和Ngn3阳性细胞中均无胰岛素及胰高血糖素表达;在胰岛中未见到nestin与Ngn3共表达,但在导管中可见共表达.RT-PCR 结果显示12～14周人胚胎胰腺中均有nestin和Ngn3的表达.结论Ngn3和nestin在人胚胎胰腺未分化细胞中表达,而具有分泌功能的内分泌细胞无表达.
- 郑宗梅陈东明李凌松李健宁沈丽陆爱丽王淑玲鲍卫汉
- 关键词：胰腺胰岛干细胞巢蛋白
- 血管内皮生长因子对胚胎干细胞来源神经干细胞增殖的促进被引量：2
- 2006年
- 目的:观察血管内皮生长因子对胚胎干细胞来源的神经干细胞增殖的促进作用,为临床治疗提供实验依据。方法:实验于2003-10/2005-05在北京大学医学部干细胞研究中心完成。小鼠胚胎干细胞在不含有白细胞抑制因子的条件下形成类胚体,经过7d选择性培养得到神经干细胞,利用免疫荧光的方法检测神经干细胞标志物nestin以及sox-2的表达情况;将神经干细胞与血管内皮生长因子共培养,通过氚标记的胸腺嘧啶核苷掺入的方法测定细胞的增殖速度;在外源性血管内皮生长因子存在的情况下,利用受体2中和抗体或者血管内皮生长因子受体2特异性抑制剂阻断血管内皮生长因子受体,观察外源性血管内皮生长因子对神经干细胞的增殖作用。结果:经鉴定胚胎干细胞来源的神经干细胞(95±3)%以上表达神经干细胞标志物nestin以及sox-2,该细胞在体外可以传代。与血管内皮生长因子共培养后,发现随着血管内皮生长因子浓度的升高神经干细胞增殖速度明显加快。通过中和抗体或者血管内皮生长因子受体2特异性抑制剂阻断血管内皮生长因子受体2可以阻断外源性血管内皮生长因子对神经干细胞的增殖作用。结论:实验中诱导小鼠胚胎干细胞得到了高纯度的神经干细胞,血管内皮生长因子能够通过血管内皮生长因子受体2促进神经干细胞增殖。
- 杨树法王淑玲肖志峰
- 关键词：干细胞内皮生长因子血管内皮生长因子受体-1血管内皮生长因子受体-2胚胎干细胞来源神经干细胞增殖
- 子宫内膜基质细胞作为饲养层培养人胚原始生殖细胞被引量：6
- 2005年
- 目的探讨子宫内膜基质细胞作为饲养细胞培养人胚原始生殖细胞的可能。方法从5～9周人胚胎生殖嵴、中肾嵴、肠系膜中消化分离原始生殖细胞(PGCs),种植于经丝裂霉素C处理的人子宫内膜基质细胞饲养层上培养。结果PGCs可以在体外培养3个多月,传14代。这样培养的PGCs表达胚胎干细胞的多种标志,如碱性磷酸酶染色、SSEA和TRA抗原等。另外细胞保持正常的染色体核型。结论人子宫内膜基质细胞可以作为饲养细胞在体外培养人胚原始生殖细胞,保持未分化状态。
- 曲文玉谭季春李杨孙开来邱广蓉王淑玲蒋丽卓英梅
- 关键词：原始生殖细胞胚胎干细胞细胞培养人胚胎
- 人子宫内膜蜕膜化间质细胞与囊胚体外共培养建立人胚胎着床模型
- 2013年
- 目的建立有效的体外人胚胎着床模型,为体外研究人胚胎着床过程提供条件。方法将人子宫内膜蜕膜化的间质细胞与囊胚共同培养,光镜下观察囊胚在细胞上的定位、粘附及侵入过程;免疫荧光法测定共同培养系统中的角蛋白,以确定着床模型的建立。结果与蜕膜细胞共培养5-10h后,囊胚开始黏附在细胞层上,48h后侵入蜕膜细胞间;共培养48h后,胚胎及周围的内膜细胞表达角蛋白阳性。结论囊胚与蜕膜化细胞共同培养,可以成功建立体外胚胎着床模型,更好地模拟体内着床时状态,是较理想的体外研究模型。
- 晁贺刘英王树玉贾婵维余兰任国庆王丽李薇王淑玲
- 关键词：体外模型蜕膜化囊胚
- 从人胚胎胰腺中分离获得巢蛋白表达阳性的细胞被引量：6
- 2003年
- 目的 探讨从人胚胎胰腺组织分离巢蛋白 (Nestin)阳性细胞并进行体外传代培养的方法。 方法 取引产的16、18、2 0周人胚胎胰腺组织 ,分离胰岛样细胞簇 (Islet-likecellclusters,ICCs) ,进行体外培养。用免疫组织化学和逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)方法检测巢蛋白、胰十二指肠同源盒基因 - 1(Pancreaticandduodenalhomeoboxgene - 1,PDX - 1/IPF - 1)以及胰岛内分泌激素胰岛素和胰升糖素 (Glucagon)的表达。 结果 ICCs经体外培养可获得巢蛋白表达阳性细胞 ,这种细胞可进一步形成球状细胞簇 ,除有巢蛋白阳性细胞外 ,还有PDX - 1、胰岛素和胰升糖素表达阳性的细胞 ,并且细胞可连续传代。结论 从人胚胎胰腺组织中可分离获得巢蛋白表达阳性细胞 ,这种细胞可在体外增殖并有向胰岛内分泌细胞分化的能力。
- 夏修金鲍卫汉陈东明洪天配郑宗梅张玲陆爱丽王淑玲
- 关键词：胰腺干细胞
