熊升林
- 作品数：14 被引量：4H指数：2
- 供职机构：南华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省高等学校科学研究项目湖南省科技厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 微小RNA与动脉粥样硬化
- 2011年
- 微小RNA（microRNAs，miRNAs）是一种内源性调节因子，最近几年发现其在调节动脉粥样硬化的发生过程中占有重要的地位。许多有关miRNAs的研究涉及血管内皮细胞的衰老和功能紊乱、血管平滑肌细胞的迁移和增殖、动脉脉粥样硬化相关炎症以及脂质代谢和胆固醇逆向转运等方面。
- 刘行熊升林张青海易光辉
- 关键词：动脉粥样硬化微小RNA血管平滑肌细胞胆固醇逆向转运血管内皮细胞MIRNAS
- HDL上调脐静脉内皮细胞COX-2表达依赖鞘氨醇激酶2和1-磷酸鞘氨醇受体途径
- 目的:1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)是由磷酸化的鞘氨醇激酶(sphingosine kinase 1/2,SphK1/2)催化鞘氨醇合成。在血浆中主要结合在高密度脂蛋白(high...
- 熊升林
- 关键词：1-磷酸鞘氨醇环氧化酶2免疫共沉淀
- 文献传递
- PKC在S1P激活大鼠心肌细胞核转录因子-κB中的作用
- 2011年
- 目的探讨蛋白激酶C在1-磷酸鞘氨醇(Sphingosine 1-phosphate,S1P)激活大鼠心肌细胞核转录因子(Nuclear transcription factor,NF)-κB信号传导通路中的作用。方法心肌细胞NF-κB的核内浓度采用夹心ELISA的方法检测;免疫印记观察S1P作用前后核内NF-κB的改变;RT-PCR及免疫印记检测转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)变化。结果 S1P刺激可诱导心肌细胞下游NF-κB活化,两者之间存在浓度与时间的依赖关系;免疫印记显示S1P作用后,细胞核内NF-κB表达明显增加;而特异性PKC抑制剂(Staurospo-rine)和NF-κB阻断剂(PDTC)均能在不同程度上抑制S1P的这种作用。S1P作用心肌细胞使TGF-β1表达上调,S1P的这种作用可被Staurosporine和PDTC所抑制。结论 PKC作为NF-κB活化的上游信使,参与了S1P激活NF-κB的信号传导通路。通过以上途径使TGF-β1合成增加,从而诱导心肌细胞纤维化,导致心肌肥厚。
- 李跃艳熊升林
- 关键词：蛋白激酶C1-磷酸鞘氨醇核因子ΚB
- 内脂素对人脐静脉内皮细胞通透性的影响及机制
- 背景与目的 内脂素是一种来源于内脏脂肪的新脂肪因子,具有复杂的生物学功能,除具有类似胰岛素的降血糖效应外,还可能作为炎症介质参与体内炎症反应.大量证据表明内脂素可能在心脑血管疾病、糖尿病、代谢综合征和肾脏疾病等动脉粥样硬...
- 曾颖张青海李晨曦李媛彬熊升林莫中成易光辉
- 关键词：缝隙连接蛋白磷酸肌醇3激酶P38丝裂原活化蛋白激酶
- 1-磷酸鞘氨醇受体途径诱导的心肌肥大及蛋白激酶C的调节作用被引量：3
- 2011年
- 目的研究1-磷酸鞘氨醇受体途径在1-磷酸鞘氨醇(S1P)诱导乳鼠心肌细胞肥大反应中的作用。方法原代培养乳鼠心肌细胞,测定心肌细胞体积和[3H]-亮氨酸掺入量作为心肌细胞肥大的指标。实验分对照组(不加任何干预因素)、S1P组(S1P直接作用于心肌细胞)、VPC23019组(S1P1和S1P3受体抑制剂进行干预30 min后,加入S1P刺激心肌细胞)、JTE组(S1P2受体抑制剂进行干预30 min后,加入S1P刺激心肌细胞)及Staurospo-rine组(蛋白激酶C抑制剂进行干预30 min后,加入S1P刺激心肌细胞),[3H]-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白合成速率;用qPCR和Western blot法检测心肌细胞β-肌球蛋白重链的mRNA和蛋白表达水平。结果 10、100和1000 nmol/L的S1P均能增加乳鼠心肌细胞的细胞体积和[3H]-亮氨酸掺入量,尤以1000 nmol/L S1P最为明显,因而选择1000 nmol/L S1P作用心肌细胞48 h为成功的心肌细胞肥大模型。1000 nmol/L S1P处理心肌细胞48 h,可使[3H]-亮氨酸掺入量明显增加,该作用可被S1P2受体抑制剂或蛋白激酶C抑制剂明显抑制。与对照组相比,S1P组心肌细胞β-肌球蛋白重链的mRNA和蛋白表达水平显著增加。与1000 nmol/L S1P组相比,S1P2受体抑制剂组和特异性蛋白激酶C抑制剂组β-肌球蛋白重链的mRNA和蛋白表达水平显著下降。结论 S1P介导的心肌肥大主要依赖S1P2途径介导。S1P2介导心肌肥大反应的机制可能部分通过激活蛋白激酶C途径而实现。
- 李跃艳熊升林
- 关键词：蛋白激酶C心肌细胞肥大1-磷酸鞘氨醇
- HSP27对雌激素诱导的内皮保护作用的影响
- 2011年
- 目的观察雌二醇(E2)及雌激素受体拮抗剂他莫昔芬对HUVEC HSP27表达的影响,以及HSP27 siRNA对雌激素内皮保护作用的影响。方法分别用不同浓度(10-9、10-8和10-7mol/L)E2处理HUVEC 24 h;10-7mol/L雌二醇及10-6mol/L他莫昔芬处理HUVEC 24 h。以空白组为阴性对照,RT-PCR和Western blot检测HSP27的表达。分别转染HSP27 siRNA和mockRNA48 h后,再与10-7mol/L E2孵育24 h。空白组做为阴性对照,RT-PCR和Western blot检测HSP27的表达;分别用硝酸还原酶法和ELISA检测培养基中NO和内皮素1的含量;ELISA检测细胞表面细胞间黏附分子1(ICAM-1)的含量。结果 E2处理HUVEC可上调HSP27的mRNA和蛋白表达水平,并且具有剂量依赖性,表达的峰值在10-7mol/L。10-6mol/L他莫昔芬可阻断10-7mol/L E2的作用。RT-PCR、Western blot检测HSP27 siRNA序列能明显下调HSP27mRNA及蛋白的表达。HU-VEC转染HSP27 siRNA48 h后再与10-7mol/LE2孵育24 h,能显著减弱E2对内皮细胞分泌NO和ICAM-1的影响,而对内皮素1没有明显影响。结论雌二醇呈剂量依赖性诱导HUVEC产生HSP27增加,雌激素受体途径参与HSP27诱导的内皮细胞ICAM-1和NO的改变。
- 周琴张青海李媛彬熊升林刘行张智超易光辉
- 关键词：人脐静脉内皮细胞雌激素热休克蛋白27细胞间黏附分子1
- SR-B1依赖PI3K-Akt-eNOS信号途径的激活介导HDL诱导内皮细胞PGI2释放
- 2011年
- 目的观察SR-B1介导HDL诱导内皮细胞PGI2生成的信号激活途径。方法分别转染pcDNA3.1(-)-hSR-B1重组表达质粒或SR-B1 siRNA48 h后,30 mg/L HDL孵育24 h;30 mg/L apoA1与ECV304内皮细胞共孵育24 h;分别用25μmol/L PI3K特异性抑制剂LY294002或50μmol/L eNOS特异性抑制剂L-NAME预处理3 h后,30 mg/L HDL孵育24 h。空白组作为阴性对照,30 mg/L HDL处理组为阳性对照,RT-PCR和/(或)Western blot检测PGIS、COX-2、CREB及磷酸化CREB的表达;免疫细胞化学法检测内皮细胞中COX-2蛋白的表达;ELISA法检测培养液中6-keto-PGF1α的生成。结果不管是mRNA水平还是蛋白水平,在过表达SR-B1后,HDL均不能显著上调COX-2的表达,然而,有趣地是siRNA沉默SR-B1后,可见HDL诱导内皮细胞COX-2的表达明显减少,且免疫细胞化学检测能得到相似的结果。30 mg/L apoA1孵育内皮细胞24 h后,COX-2表达亦出现增加。但是,不管是HDL单独处理还是过表达或沉默SR-B1,PGIS的表达都没有明显变化。抑制剂单独处理细胞对PGI2的生成没影响,但抑制PI3K或eNOS活性后可明显减少HDL诱导的PGI2生成,其中以抑制PI3K活性后,PGI2生成减少更为显著;同样,LY294002或L-NAME对HDL诱导内皮细胞COX-2、磷酸化CREB表达的影响与影响PGI2的生成呈相同效果,特异性抑制PI3K和特异性抑制eNOS活性均能下调HDL诱导的COX-2表达及CREB磷酸化,且同样以抑制PI3K后下调幅度更为明显。结论 HDL诱导内皮细胞PGI2释放依赖SR-B1与其介导的胞内PI3K-Akt-eNOS信号途径的激活有关。
- 张青海李媛彬熊升林刘行周琴张智超易光辉
- 关键词：磷酸肌醇3-激酶内皮型一氧化氮合酶环氧合酶2
- PPARδ特异性激动剂GW501516对HUVEC tPA和PAI-1表达的影响
- 2009年
- 李霞江淼王静张清海李媛彬熊升林易光辉阮长耿
- 关键词：纤溶酶原激活物抑制剂1
- 载脂蛋白AI介导内皮细胞鞘氨醇-1-磷酸释放及其信号机制
- 背景与目的 鞘氨醇-1-磷酸(S1P)是由鞘氨醇激酶1/2 (SphK1/2)磷酸化鞘氨醇而合成.血管内皮细胞、红细胞和血小板等是血液S1P的主要来源.S1P释放到细胞外通常受到细胞内或细胞外的刺激.载脂蛋白AI (Ap...
- 刘行熊升林张智超张青海张大棣莫中成易光辉
- 关键词：高密度脂蛋白载脂蛋白AIATP结合盒转运体A1
- 阿托伐他汀在1-磷酸鞘氨醇诱导心肌细胞肥大中的作用
- 2012年
- 目的研究阿托伐他汀对1-磷酸鞘氨醇(S1P)诱导乳鼠心肌细胞肥大反应中的作用。方法原代培养乳鼠心肌细胞,测定心肌细胞体积和[3H]-亮氨酸掺入量作为心肌细胞肥大的指标。乳鼠心肌细胞使用不同浓度的阿托伐他汀(atorvastatin),加入S1P,[3H]-亮氨酸掺入量作为心肌细胞蛋白摄取量;分别用qPCR和Western blot法检测心肌细胞的β-肌球蛋白(β-MHC)的mRNA和蛋白质表达水平;用qPCR检测心肌细胞的心房利钠肽(ANF)的mRNA表达水平。结果与S1P组比较,阿托伐他汀10μmol/L处理组[3H]-亮氨酸掺入率减少[(234.89%±31.23%)比(342.23%±31.60%),P=0.205],β-MHC的mRNA和蛋白表达水平下降[(0.59±0.14)比(0.84±0.20),P=0.318]和[(0.55±0.09)比(0.98±0.15),P=0.223],ANF的mRNA表达水平降低[(0.51±0.13)比(0.76±0.19),P=0.445];与S1P组比较,阿托伐他汀20μmol/L处理组[3H]-亮氨酸掺入率明显减少[(189.07%±17.69%)比(342.23%±31.60%),P<0.01],β-MHC的mRNA和蛋白表达水平显著下降[(0.50±0.12)比(0.84±0.20),P<0.01]和[(0.35±0.08)比(0.98±0.15),P<0.01],ANF的mRNA水平明显降低[(0.47±0.12)比(0.76±0.19),P<0.01]。结论阿托伐他汀可抑制S1P诱导的心肌细胞肥大,并可减少S1P诱导的β-MHC和ANF表达。
- 熊升林刘行莫中成易光辉
- 关键词：阿托伐他汀1-磷酸鞘氨醇心肌细胞肥大心房利钠肽
