毛亚飞
- 作品数：62 被引量：191H指数：9
- 供职机构：浙江省舟山市妇幼保健院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省科技计划项目浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 问号钩端螺旋体rLTB/rCTB-LipL32/1免疫保护作用及野生株LipL32基因表达和患者抗体检测被引量：5
- 2005年
- 目的 构建LTB- LipL32/ 1和CTB- LipL32 / 1融合基因原核表达系统并鉴定其表达产物的免疫和佐剂活性及保护作用,了解问号钩端螺旋体(简称钩体)野生株LipL32基因携带、表达及钩体病人血清LipL32基因产物抗体产生频率。方法 采用常规分子生物学技术构建LTB- LipL32 / 1和CTB- LipL32 /1融合基因及其原核表达系统。采用SDS PAGE检测目的重组蛋白rLTB -LipL32 / 1及rCTB -LipL32 / 1表达情况。分别采用Westernblot和GM1 -ELISA检测rLTB -LipL32 / 1及rCTB -LipL32 /1的免疫反应性和佐剂活性。采用PCR和MAT分别检测97株问号钩体野生株LipL32基因及其表达情况。采用ELISA检测2 2 8例钩体病人血清LipL32基因产物的抗体。采用豚鼠保护试验检测重组蛋白的免疫保护作用。结果 与报道的相关序列比较,LTB -LipL32 /1和CTB- LipL32 / 1融合基因核苷酸序列相似性分别为99.12 %～99.71%和98.5 4 %～99.4 2 % ,氨基酸序列相似性分别为97.5 8%～99.6 3%和96 .77%～99.6 3%。rLTB- LipL32 1和rCTB- LipL32 /1表达产量均约为细菌总蛋白的10 % ,并主要以包涵体形式存在。rLTB -LipL32 / 1和rCTB- LipL32 /1均分别能与LipL32 /1兔抗血清和牛GM1结合。97.9%(95 97)问号钩体野生株含有LipL32基因,95 .9% (93 97)问?
- 阮萍严杰毛亚飞周晓辉
- 关键词：问号钩端螺旋体LTB基因霍乱弧菌
- 磁珠-ELISA检测日本血吸虫循环虫卵抗原的研究被引量：3
- 2002年
- 循环抗原(circulating antigen,CAg)是宿主体内活虫(包括虫卵)所产生的具抗原性的代谢物质.
- 毛亚飞张悟澄潘劲草
- 关键词：日本血吸虫
- 舟山海岛21802例围产儿出生缺陷监测分析被引量：2
- 2005年
- 毛亚飞
- 关键词：围产儿疾病监测
- 舟山市妊娠妇女出生缺陷产前筛查结果分析被引量：1
- 2010年
- 毛亚飞陈海兰黄满仙
- 关键词：产前筛查产前诊断
- 梅毒螺旋体重组蛋白rTpN17或rTpN47为抗原的ELISA与TRUST和TPHA血清学检测效果的比较被引量：9
- 2008年
- 目的:克隆并构建梅毒螺旋体tpn17、tpn47基因原核表达系统,建立基于rTpN17、rTpN47的ELISAs,并对其用于梅毒血清学诊断的敏感性和特异性进行评价。方法:采用PCR扩增tpn17和tpn47基因并构建tpn17和tpn47基因原核表达系统。采用SDS-PAGE检测目的重组蛋白rTpN17和rTpN47表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯rTpN17和rTpN47,Western blot检测rTpN17和rTpN47免疫反应性。分别以rTpN17和rTpN47为包被抗原,建立检测血清标本中梅毒抗体的ELISAs(rTpN17-ELISA和rTpN47-ELISA),检测200例健康人、25例类风湿关节炎(RA)和17例系统性红斑狼疮(SLE)患者血清样本,并与甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体间接血凝试验(TPHA)检测效果进行比较。结果:克隆的tpn17和tpn47基因与GenBank中相关序列相似性为100%。rTpN17和rTpN47表达量分别为细菌总蛋白的37.2%和26.8%。提纯后的rTpN17和rTpN47能与梅毒抗体阳性血清发生明显的结合反应。TPHA检测阳性率最高(99.1%,P<0.001),rTpN17-ELISA和rTpN47-ELISA检测阳性率相近(85.3%和84.3%,P=0.427),TRUST检测阳性率低于rTpN17-ELISA(P=0.001),但与rTpN47-ELISA相近(P=0.014)。所有健康人血清、RA和SLE患者血清标本的rTpN17-ELISA、rTpN47-ELISA和TPHA检测结果均为阴性,但有7.1%(3/42)RA和SLE患者血清标本TRUST检测结果阳性。结论:以rTpN17和rTpN47为抗原的ELISAs可作为快速、简便、敏感性和特异性较高的梅毒血清学筛查方法,而且rTpN17和rTpN47仍保持原有免疫反应特异性。
- 孙爱华范兴丽毛亚飞彭敏峰范春红严杰
- 关键词：梅毒密螺旋体抗原
- 葡萄球菌肠毒素A基因的克隆、原核表达和鉴定被引量：3
- 2006年
- 目的克隆葡萄球菌肠毒索A(SEA)基因,构建其原核表达系统,鉴定重组蛋白(rSEA)免疫原性。方法采用PCR技术,从产SEA的葡萄球菌标准菌株ATCC13565基因组DNA中扩增全长SEA基因片段,T-A克隆后测序,构建pET32a-SEA表达质粒,转化入E.coli BL21DE3宿主菌,通过IPTG诱导表达,分离、纯化及Western印迹法鉴定。结果PCR获得SEA基因片段,DNA测序结果与已报道的SEA基因序列(GenBank No:L22566,AP004828)一致,构建了pET32a-SEA表达质粒,并成功地诱导、纯化了rSEA蛋白,rSEA表达量约为细菌总蛋白的40%。结论成功克隆了SEA全长基因,构建了rSEA原核表达系统,为进一步研制SEA的单克隆抗体及诊断试剂盒奠定了基础。
- 徐水凌毛亚飞颜丹红项洪琴
- 关键词：葡萄球菌肠毒素A基因克隆原核表达
- 孕前BMI及孕期BMI增加对妊娠并发症及新生儿出生体重的影响被引量：11
- 2014年
- 目的探讨孕前BMI及孕期BMI增长(BMI△)对妊娠结局及新生儿出生体重的影响。方法观察1530例舟山市妇幼保健院进行围产保健的孕产妇孕前BMI及孕期BMI△不同组别妊娠结局、新生儿出生体重的差异。结果超重肥胖组及孕期BMI△≥6 kg/m2时妊娠并发症、剖宫产、新生儿出生体重、巨大儿发生率均高于均衡组及4 kg/m2≤BMI△<6 kg/m2组(P<0.05),消瘦组及BMI△<4 kg/m2组低体重儿发生率高于均衡组及4 kg/m2≤BMI△<6kg/m2组(P<0.05)。结论孕前BMI及孕期BMI△与妊娠并发症及新生儿出生体重存在直接关系,要重视孕期体重增加的情况,控制在适宜的范围内。
- 徐海耿毛亚飞顾雷君花晓艳黄芳
- 关键词：妊娠并发症新生儿出生体重
- 舟山海岛6366例孕产妇及围生儿梅毒感染情况分析被引量：3
- 2011年
- 目的分析浙江省舟山地区妊娠合并梅毒及围生儿梅毒感染情况,为有效阻断母婴垂直传播提供依据。方法回顾性分析舟山市妇幼保健院2008-2009年分娩的6366例孕产妇梅毒检测结果和梅毒感染孕产妇所生新生儿结局与随访情况。结果 6366例孕产妇梅毒感染46例,感染率为0.72%,均为隐性梅毒;设梅毒感染孕产妇46例为感染组,6320例未感染孕产妇为对照组。妊娠梅毒感染孕产妇选择剖宫产的比例高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);在孕期对梅毒感染进行治疗的孕产妇,其新生儿梅毒筛查阳性的比例低(P<0.05);对梅毒感染孕产妇所生新生儿进行预防性抗梅毒治疗,经随访其梅毒检测结果均为阴性。结论利用婚检和孕前保健服务平台加大宣传力度,加强孕产妇早期检测及时发现梅毒感染者并对其进行规范治疗,可以降低先天梅毒婴儿发生。
- 毛亚飞徐君球黄芳
- 关键词：妊娠合并梅毒先天梅毒
- 问号钩端螺旋体属特异性外膜蛋白OmpL1和LipL21抗原表位预测及鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的筛选问号钩端螺旋体（简称钩体）属特异性外膜蛋白OmpL1和LipL21有效T和B细胞联合抗原表位，为研制多抗原肽（multiple antigenic peptide，MAP）疫苗提供基础。方法采用生物信息学方法预测OmpL1和LipL21分子中T和B细胞联合抗原表位。采用PCR扩增候选联合抗原表位片段并分别构建其噬菌体展示系统。分别以rOmpL1或rLipL21、黄疸出血群赖株、钩体患者抗血清为一抗，采用Western blot检测各抗血清与目的表位的免疫反应性及其强度。结果通过抗原表位预测，选择了高分值的4个OmpL1和2个LipL21联合表位。经扩增获得了预期的各抗原表位片段，各目的表位序列均准确插入噬菌体PⅢ蛋白N端并有效表达。各抗血清均能识别上述6个联合表位。其中LipL21的97-112和176-184表位对任-抗血清均显示相似强度的杂交条带。综合4个OmpL1表位对3种抗血清的不同Western blot结果及其实际意义，杂交信号从强到弱依次为173-191、87-98、297-320和59-78表位。结论所研究的6个联合表位均分别为LipL21和OmpL1的有效抗原表位，其中LipL21的97-112、176-184和OmpL1的87-98、173-191表位可应用于钩体MAP疫苗研制。
- 林旭瑷潘建平罗依惠毛亚飞李立伟严杰
- 问号钩端螺旋体血清群LipL41基因型分析及其表达产物的免疫学鉴定被引量：13
- 2004年
- 目的 确定我国 15群 15株问号钩端螺旋体 (简称钩体 )参考标准株和 2群 2株双曲钩体国际标准株携带LipL4 1基因情况 ,构建该基因的原核表达系统 ,鉴定表达产物的免疫原性。方法常规酚 氯仿法提取上述 17株钩体基因组DNA ,高保真PCR扩增全长LipL4 1基因片段 ,T A克隆后测序分型。构建LipL4 1基因原核表达系统 ,SDS PAGE检测重组目的蛋白 (rLipL4 1)表达情况。分别用钩体属特异性TR patocⅠ抗原、rLipL4 1兔抗血清的Westernblot鉴定其免疫反应性和抗原性。分别用显微镜凝集试验 (MAT)、钩体黏附J774A .1细胞模型检测兔抗rLipL4 1血清的交叉凝集效价和黏附阻断作用。结果 15株问号钩体均有LipL4 1基因 ,并可分为LipL4 1 1和LipL4 1 2两种基因型 ,2株双曲钩体则否。 11个LipL4 1 1基因和 4个LipL4 1 2基因克隆之间的核苷酸和氨基酸序列相似性分别为88.6 1%～ 88.6 7%和 93.2 4 %～ 97.18%。所构建的原核表达系统rLipL4 1 1和rLipL4 1 2的表达量分别占钩体总蛋白的 30 %和 4 0 %。rLipL4 1 1和rLipL4 1 2均能与TR patocⅠ抗血清发生结合反应 ,免疫家兔能产生抗体。rLipL4 1 1和rLipL4 1 2兔抗血清对上述 15株问号钩体MAT效价为 1∶8～ 1∶12 8、1∶16～1∶2 5 6稀释时均能有效地阻断钩体对细胞的黏附。结?
- 丁威严杰毛亚飞
- 关键词：问号钩端螺旋体基因原核表达系统免疫学鉴定免疫反应性血清群
