段燕喻
- 作品数：9 被引量：11H指数：3
- 供职机构：广东出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目广东省农业攻关项目广东出入境检验检疫局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 广东省供港澳注册养殖猪场猪流感流行病学调查
- 2013年
- 为了解广东省辖区内84个活猪供港澳注册猪场中猪流感的感染情况,从2009年5月至2012年8月,收集各注册猪场的猪鼻拭子12 927份样品,采用荧光定量RT-PCR的方法进行A型流感病毒筛查,同时对A型流感样品采用H1和H3亚型流感病毒荧光定量RT-PCR的方法进行分型。结果 A型流感病毒核酸阳性样品396份,阳性率3.06%。其中H1亚型流感病毒核酸阳性样品142份,阳性率1.1%;H3亚型流感病毒核酸阳性样品12份,阳性率0.17%;H1N1亚型流感病毒核酸阳性样品有23份,阳性率0.32%。
- 吴晓薇陈茹刘志玲朱道中朱事康段燕喻林志雄
- 关键词：猪流感H3亚型
- 同步检测鉴定禽类、鱼类、反刍类三大类成分的多重液相基因芯片的核酸和方法及试剂盒
- 本发明提供一组同步检测鉴定禽类、鱼类、反刍类三种大类成分的多重液相基因芯片的核酸和方法及试剂盒，其中，核酸包括上述三大类物种中每种大类的通用上游引物、通用下游引物和通用探针。方法为：1)从样品中提取动物基因组核酸；2)对...
- 陈茹高小博梅明珠段燕喻刘志玲翁文川阳静
- 文献传递
- 病毒性神经坏死病病毒核酸检测用标准物质的制备被引量：5
- 2018年
- 利用基因克隆和体外转录技术,制备病毒性神经坏死病病毒(Nervous necrosis virus,NNV)核酸检测标准物质。设计NNV RNA2基因的特异性引物,通过RT-PCR获得目的片段并连接至p GEM-T载体;采用体外转录方法,获得大量纯品RNA。初步定量稀释至约10~8 copies/μL,均匀性检验结果显示样品间差异<5%;稳定性检验表明,室温(20~25℃)保存7 d、冷藏(2~8℃)保存1个月和冷冻(-20℃)保存6个月的含量均无明显变化。采用核酸浓度测定与拷贝数换算的方法,对转录的RNA片段进行定值,并根据委托单位的定值结果进行不确定度估算。核酸标准物质定值为(8.452±0.068)×10~8 copies/μL,可用作NNV核酸检测的标准质控品。
- 段燕喻陈茹吴晓薇朱道中林志雄田纯见刘志玲
- 关键词：病毒性神经坏死病实时定量RT-PCR标准物质
- 同步检测三种猪病毒的共有引物核酸扩增方法与试剂盒
- 本发明提供一种通过锁核酸（LNA）修饰碱基共有引物引导的同步快速检测猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒三种重要猪病原的新型核酸扩增检测方法及其检测试剂盒，设计筛选了一对含有LNA修饰碱基的共有引物和三对5＇端带有...
- 陈茹高小博宋长绪薛春宜于晓璐段燕喻李艳刘志玲陈芳
- 文献传递
- 同步检测三种猪病毒的共有引物核酸扩增方法与试剂盒
- 本发明提供一种通过锁核酸（LNA）修饰碱基共有引物引导的同步快速检测猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒三种重要猪病原的新型核酸扩增检测方法及其检测试剂盒，设计筛选了一对含有LNA修饰碱基的共有引物和三对5＇端带有...
- 陈茹高小博宋长绪薛春宜于晓璐段燕喻李艳刘志玲陈芳
- 文献传递
- 病毒性出血性败血症病毒RNA标准物质的研制被引量：3
- 2018年
- 利用基因克隆和体外转录技术制备病毒性出血性败血症病毒(VHSV)核酸检测标准物质。设计VHSV N基因的克隆引物,RT-PCR获得相应片段,连接至pGEM-T载体,测序后采用体外转录方法制备RNA纯品。初步定量稀释后,混合分装作为核酸标准物质候选物。采用核酸浓度测定与拷贝数换算的方法对转录的RNA片段进行定值。通过绘制荧光定量标准扩增曲线计算标准物质含量(拷贝数),并根据委托单位的定值结果进行不确定度的估算。均一性结果显示瓶间差异小于5%,稳定性试验表明室温20℃~25℃(相对湿度20%~25%)7 d,2℃~8℃保存1个月及-20℃保存6个月的含量均无明显变化。核酸标准物质定值为(6.625±0.149)×10~8copies/μL,可用作VHSV核酸检测的标准质控品。
- 刘志玲陈茹朱道中吴晓薇林志雄田纯见罗琼段燕喻
- 关键词：实时定量RT-PCR标准物质
- 动物疫病液相芯片与修饰碱基高通量检测技术平台构建
- 陈茹曹永长高小博薛春宜毕英佐李艳于晓璐段燕喻陈芳卓金焕
- 猪繁殖障碍性传染病、结核、副结核等动物疫病危害严重，养殖业及动物与遗传物质进出口贸易均重点防范。这些疫病涉及多种病原，临床诊断难度高。而现有诊断技术存在通量低、周期长、检出率低或假阳性率高等不足。基于提高口岸把关水平、通...
- 关键词：
- 关键词：动物疫病
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒双重液相基因芯片检测方法的建立被引量：3
- 2016年
- 为了实现快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)并同步鉴别高致病性PRRSV毒株(HPPRRSV),根据PRRSV囊膜蛋白GP2基因保守序列和HP-PRRSV特有的Nsp2基因区保守序列设计特异扩增引物和杂交探针,通过双重一步法RT-PCR不对称扩增和双重微球杂交反应,建立了双重液相基因芯片方法。对12株PRRSV以及其他12种猪病原体的检测显示,该法能特异性检测12株PRRSV毒株并准确鉴别其中7株HP-PRRSV,与其他病原体无交叉反应;对PRRSV、HP-PRRSV病毒液的检测低限均小于每个反应0.5TCID_(50);其组内、组间检测变异系数均<10%;检测55份疑似临床样品并与商品化荧光RTPCR试剂盒比较检测结果,符合率达98.2%(54/55)。研究结果为适应临床快速检测PRRSV提供了一种新的分子生物学检测方法。
- 陈茹于晓璐高小博薛春宜宋长绪邱杨刘志玲王莹段燕喻
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 利用类病毒脂质体抗原检测H5N1亚型禽流感病毒抗体ELISA方法的建立被引量：1
- 2015年
- 利用昆虫杆状病毒表达系统制备了H5N1亚型禽流感病毒(AIV)HA蛋白、类病毒脂质体和病毒样颗粒,分别作为包被抗原,建立了相应的检测H5N1亚型禽流感病毒抗体的ELISA方法。特异性试验、敏感性试验、重复性试验和稳定性试验结果表明,利用3种抗原包被所建立的ELISA方法均具有良好的重复性和稳定性,批间和批内变异系数均小于10%,但单独表达的HA蛋白和类病毒脂质体特异性更好,而且类病毒脂质体有更高的免疫反应性,与灭活全病毒相比安全性更高,故在H5N1亚型AIV抗体水平检测方面更具有应用前景。
- 杨倩朱道中薛春宜李晓明曹永长段燕喻王莹吴晓薇刘志玲
- 关键词：昆虫杆状病毒表达系统禽流感病毒
