杨志灵
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：北京林业大学生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 小立碗藓GPX家族的功能分化与催化特性研究
- 2015年
- 谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)在植物抵抗氧化胁迫中发挥重要作用。该研究从小立碗藓(Physcomitrella patens)基因组中挖掘到3个GPX基因,分别命名为PpGPX1、PpGPX2和PpGPX3。其中PpGPX1和PpGPX3只含有1个外显子,而PpGPX2含有6个外显子。表达模式分析发现PpGPX1和PpGPX2在检测的所有条件下均表达,而PpGPX3在检测的所有条件下均不表达。蛋白亚细胞定位分析发现,PpGPX1蛋白定位在细胞质,而PpGPX2蛋白定位在叶绿体。在大肠杆菌中表达并纯化了PpGPX1和PpGPX2蛋白,酶学性质分析发现,PpGPX1和PpGPX2蛋白均只能利用Trx电子供体系统,而不能利用GSH电子供体系统;PpGPX2蛋白对过氧化物底物的催化活性和催化效率均高于PpGPX1。基因结构、表达模式、亚细胞定位和蛋白酶学性质的差异预示小立碗藓GPX基因家族成员发生了功能分化,将PpGPX2蛋白的Pro158、Phe167和Phe172氨基酸残基均突变为Ala,发现突变体蛋白对底物催化活性降低,说明这3个氨基酸位点对PpGPX2蛋白具有重要催化活性。
- 王炜杨志灵杨海灵
- 关键词：谷胱甘肽过氧化物酶小立碗藓亚细胞定位酶学性质分析
- 植物多聚半乳糖醛酸酶基因家族的分子进化研究
- <正>果胶是植物细胞壁的重要组成部分,在植物的发育过程中往往需要果胶的系统性裂解,多聚半乳糖醛酸酶(PG)在果胶的裂解过程中发挥重要作用。大量研究表明PG基因主要涉及细胞分离的过程,如植物器官的脱落、果实成熟以及果荚和花...
- 杨志灵
- 关键词：多聚半乳糖醛酸酶基因家族基因组基因重复分子进化
- 文献传递
- 杨树ASE蛋白的生化功能研究
- 2016年
- [目的]谷氨酰胺磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶(ASE)在植物嘌呤合成中发挥着关键作用,本研究的目的是详细揭示杨树ASE蛋白的生化功能特性。[方法]通过半定量RT-PCR、蛋白质亚细胞定位以及测定纯化蛋白的催化活性等方法来研究其在体外的生化功能,进一步通过互补拟南芥缺失突变体(atase2)来研究杨树ASE基因的体内生物学功能。[结果]从杨树基因组中鉴别出2个ASE基因,序列分析发现它们之间有很高的蛋白质序列相似性。半定量RT-PCR分析发现两个杨树ASE基因在根、茎、叶和芽中均表达。蛋白质亚细胞定位分析发现杨树ASE蛋白均定位在叶绿体中,而且两个杨树ASE蛋白均能完全互补拟南芥atase2突变体的表型。酶学性质分析表明,杨树两个ASE蛋白均能催化5-磷酸核糖-α-焦磷酸生成5-磷酸核糖-β-胺。[结论]本研究预示着两个杨树ASE蛋白在嘌呤合成中均发挥着重要作用。
- 钱婷婷杨志灵曾庆银
- 关键词：突变体
- 毛白杨PtoGSTF4基因克隆及相关特性鉴定被引量：1
- 2013年
- 该研究从毛白杨中克隆到1个Phi类谷胱苷肽S-转移酶（GST）基因（PtoGSTF4），编码213个氨基酸。表达模式分析发现，PtoGSTF4在正常生长、Hzoz和莠去津处理后的茎、叶以及茎的韧皮部均表达，属于组成型表达基因。在大肠杆菌中表达并纯化了PtoGSTF4重组蛋白，酶学性质分析表明PtoGSTF4对CDNB、NBD-C1、NBC和Cum—OOH等4种底物均有活性。动力学分析发现，PtoGSTF4对GSH具有较高的亲和力，而对CDNB的亲和力相对较低。在不同pH及温度条件下对PtoGSTF4蛋白进行活性检测，发现PtoGSTF4在pH7．5～10．5范围内或30℃～60℃温度范围内有较高的活性。研究推测，PtoGSTF4可能在毛白杨的抗逆生理中发挥重要作用。
- 韩学敏杨志灵杨海灵
- 关键词：毛白杨酶学性质分析
- 江南卷柏Phi类谷胱甘肽S-转移酶的分子特性
- 2016年
- 谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-transferase,GST)在帮助植物抵抗各种胁迫中发挥重要作用。该研究从江南卷柏Selaginella moellendorffii中克隆到两个Phi类GST基因,分别命名为Sm GSTF1和Sm GSTF2,两个基因均编码215个氨基酸残基的蛋白质。表达模式分析发现,这两个基因在江南卷柏根、茎和叶中均有表达。将这两个基因在大肠杆菌中诱导表达重组蛋白并纯化,酶学性质分析表明Sm GSTF1和Sm GSTF2对CDNB、NBD-Cl和NBC等3种底物都有活性。Sm GSTF1对Fluorodifen和Cum-OOH也有活性,而Sm GSTF2对它们没有活性。酶动力学分析表明Sm GSTF1和Sm GSTF2对GSH有较高的亲和力,而对CDNB的亲和力都相对较低。在不同p H及温度条件下对Sm GSTF1和Sm GSTF2重组蛋白进行活性测定,发现这两个蛋白在p H 7-8.5,45-55℃温度范围内有较高的催化活性。研究推测,Sm GSTF1和Sm GSTF2可能在江南卷柏的抗逆生理过程中有重要的作用。
- 张元杰杨志灵杨海灵
- 关键词：江南卷柏谷胱甘肽S-转移酶基因表达酶学性质
