杨利军
- 作品数：78 被引量：168H指数：7
- 供职机构：山西医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省青年科技研究基金山西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 重组人肝细胞生长因子α在大肠杆菌中的表达及活性检测被引量：2
- 2005年
- 目的 建立人肝细胞生长因子α链 (rhHGFα)高效原核表达体系。方法 以pRC/CMV hHGF为模板 ,扩增hHGFαcDNA ,继以XhoI酶切为 386和 95 4bp 2个片段 ,亚克隆入pBSKS,DNA测序后 ,将上述两个片段与pBV2 2 0连接 ,构建重组质粒。转化E .coliJM10 9、DH5α和BL2 1(DE3) ,筛选高效表达菌株。分离包涵体 ,8mol/L尿素溶解 ,梯度复性后利用反相和凝胶过滤层析纯化重组蛋白 ,经MTT法检测活性。结果 所克隆的hHGFα基因序列正确 ,筛选出高效表达菌株BY ,经SDS-PAGE显示在相对分子质量 5 2 0 0 0处出现特异的目的蛋白表达带 ,表达量约占全菌蛋白的 2 5 %。表达产物以不溶性的包涵体 (IBs)形式存在 ,复性后具有刺激原代大鼠肝细胞生长的作用。结论 已成功表达了rhHGFα蛋白 ,为研究rhHGFα结构与功能及中试生产奠定了基础。
- 杨利军杨涛牛勃程牛亮王惠珍赵建滨
- 关键词：HGFDH5ΑΑ基因大鼠肝细胞复性包涵体
- 一种特异识别血小板α<Sub>IIb</Sub>β<Sub>3</Sub>的抗栓药物RWR
- 本发明提供了一种小分子多肽，对RGD三肽进行改造，根据RGD特异结合α<Sub>IIb</Sub>β<Sub>3</Sub>的特点，在其N端增加疏水性氨基酸和碱性氨基酸，第四位增加一个疏水性氨基酸W，第五位增加一个碱性氨...
- 杨利军杨涛孙海飚刘海桃赵海霞常冰梅王惠珍
- 文献传递
- 一种靶向抑制血小板聚集的抗栓小肽ωKWR
- 本发明提供了一种小分子多肽，对RWR五肽进行改造。RWR是根据RGD特异结合αIIbβ3的特点，在其N端增加疏水性氨基酸和碱性氨基酸，第四位增加一个疏水性氨基酸W，第五位增加一个碱性氨基酸R，该小肽序列为Arg‑Gly‑...
- 杨利军张明升杨涛郑海锋孙海飚徐勇王宇涛闫丽红张利桃卢培芬陈俊俊代洁章毅
- 肾透明细胞癌VSIG4表达及其与免疫细胞浸润的相关性研究
- 2024年
- 目的:探究VSIG4在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及其与免疫细胞浸润和预后的关系。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中下载ccRCC的RNA-seq数据和患者相应的临床数据;通过Wilcoxon秩和检验分析ccRCC及正常肾组织中VSIG4 mRNA表达水平;Wilcoxon秩和或Kruskal-Wallis秩和检验分析VSIG4表达与临床病理参数的相关性;Kaplan-Meier法分析VSIG4表达与患者预后的相关性;基因集富集分析(GSEA)探究VSIG4在ccRCC中参与的信号通路;使用R软件运行CIBERSORT算法分析VSIG4表达与肿瘤浸润免疫细胞的相关性;Western blotting检测人正常肾上皮细胞系293T和人肾癌细胞系ACHN、A-498、786-O、OS-RC-2中VSIG4蛋白表达。结果:VSIG4在ccRCC中的表达水平显著高于正常组织(P<0.05);VSIG4的表达与患者远处转移分期和淋巴结转移分期显著相关(P<0.05);生存分析显示,VSIG4高表达组患者总体生存率显著低于低表达组患者(P<0.05);GSEA富集分析结果显示,VSIG4主要在凋亡、趋化因子信号通路、细胞黏附分子等信号通路富集;VSIG4表达与M1巨噬细胞呈负相关(r<0,P<0.05),而与M2巨噬细胞呈正相关(r>0,P<0.05);免疫印迹结果表明,肾癌细胞中VSIG4蛋白表达均高于人正常肾上皮细胞系。结论:VSIG4在ccRCC中高表达,且与预后呈负相关,可能成为ccRCC患者预后的生物标志物。
- 刘杭丰刘盛露段连瑞昝丽坤马彦杰杨利军
- 关键词：肾透明细胞癌生物信息学分析
- 我国医药领域知识产权发展战略的探讨被引量：3
- 2004年
- 几十年来中国的制药业都以仿制别国药品为主 ,虽有创新 ,但由于知识产权观念淡薄 ,知识产权保护体制不完善 ,为我国的医药产业带来了极大的损失。入世后 ,传统的仿制生产模式将无法继续生存 ,为了适应WTO对知识产权的要求和日新月异的生物制药发展速度 ,我们要树立知识产权保护意识 ,完善各种机制 ,走科技创新为主、仿创结合的道路 ;同时应从研发战略、经营策略的高度上重视和看待中药知识产权保护问题 。
- 杨利军牛勃杨琦张正
- 关键词：知识产权制药业
- 将RGD模体改变为RGDNM可减弱Echistatin对血小板聚集的抑制但增强血管新生的抑制作用被引量：1
- 2009年
- 为了研究去整合素echistatin RGD(Arg-Gly-Asp)模体周边氨基酸突变后对其生物学功能的影响,根据echistatin序列设计合成6个片段,利用重叠延伸PCR法合成cDNA,使echistatin RGD模体周边序列变为ARGDNM(D27→N),与载体pTXB1连接后转化E.coliBL21(DE3),建立echistatin(ARGDNM)的表达体系.工程菌经IPTG诱导后融合蛋白表达量占菌体总蛋白约30%,几丁质亲和纯化后,DTT裂解释放目的蛋白分子量约5.4kD.体外血小板聚集和体内鸡胚绒毛尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)血管新生实验结果表明,echistatin(ARGDNM)抑制血小板聚集的作用减弱,而其抑制血管新生的作用增强.RGD模体周围氨基酸的改变影响了去整合素的生物学功能,echistatin(ARGDNM)增强了与αⅤβ3结合的特异性,本工作为研究特异性更强的去整合素药物奠定了基础.
- 杨涛牛勃程牛亮解军张悦红杨利军
- 关键词：去整合素ECHISTATIN
- RWR通过与血小板表面整合素α_(Ⅱb)β_3受体作用对血栓形成的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨含RGD(Arg-Gly-Asp)序列的RWR小肽通过与血小板表面整合素αⅡbβ(3GPⅡb/Ⅲ)a结合,对血小板聚集抑制率、血栓重量、血管组织结构的影响。方法取10名无心脑血管疾病的健康志愿者的全血,分离富含血小板的血浆(platelet-rich plasma,PRP),采用血小板聚集仪检测不同剂量(6.25、12.5、25、50、100、200μmol/L)RWR对二磷酸腺苷二钠(ADPNa2)诱导的血小板聚集抑制率的影响;分别用0.3、0.6、1.2mg/kgRWR作用家兔及0.6、1.2、2.4 mg/kg RWR作用大鼠,建立兔动静脉旁路循环血栓模型和大鼠三氯化铁血栓模型,观察血栓重量的变化和血管组织结构的变化。结果随着RWR剂量增加,血小板最大聚集率降低,血小板聚集抑制率增加,RWR对血小板聚集抑制率的半数有效抑制浓度(IC50)为16.0μmol/L。随着RWR剂量的增加,血栓重量减少,血栓形成的抑制率增加,血管腔堵塞程度减弱,血管腔内孔隙增加。结论 RWR小肽通过与血小板表面整合素αⅡbβ(3GPⅡb/Ⅲ)a受体结合,抑制血小板聚集和抗血栓。
- 赵海霞杨涛杨利军
- 关键词：RGD序列血栓
- 肝细胞特异性表达体系的构建及肿瘤特异性表达体系的研究
- 杨琦牛勃解军向前张悦红洪焰王惠珍于保峰韩兵社胥显民郭拥军刘晓军杨利军刘晓玲陈显久
- 该课题组进行了肝细胞特异性表达体系的构建及肿瘤特异性表达体系的研究。选取了与肝细胞分化特异性相关的CPSI作为靶对象，通过Cat-assay、核runoff、Western-blot、Northern-blot、凝胶滞留...
- 关键词：
- 关键词：基因表达调控组织特异性表达
- 研究蚯蚓DNase的干琼脂糖薄膜覆盖法
- 2007年
- 目的研究蚯蚓脱氧核糖核酸酶(DNase)的测定方法。方法应用干琼脂糖薄膜覆盖法(DAFO)检测蚯蚓DNase。结果DAFO用于蚯蚓DNase的种类、数量的确定,新DNase类的筛选以及DNase活性的测定。结论DAFO是研究脱氧核糖核酸酶的一种重要方法。为蚯蚓DNase及其他DNase的测定提供了可行的实验方法。
- 樊慧杰康慧芳罗佳王建华杨利军牛勃
- 关键词：地龙酶活性测定
- 一种赤子爱胜蚓脱氧核糖核酸酶作用机制的研究被引量：3
- 2007年
- 目的研究赤子爱胜蚓组织中脱氧核糖核酸酶1(EWD1)作用于底物的机制。方法采用ZORBAX-Oligo柱-高效液相色谱法(HPLC)、琼脂糖电泳、紫外分光光度法等分析技术,进行了蚯蚓EWD1对环状、线状DNA、单链DNA的降解中间产物和终产物的观察和分析。结果EWD1对所有形式的DNA底物均有降解作用,对单链DNA的降解产物为较均一的、<18bp的寡核苷酸,并显示EWD1无降解RNA的作用。结论蚯蚓组织中发现的EWD1能够分解多种来源的遗传物质,属于脱氧核糖核酸内切酶。
- 康慧芳刘志贞樊慧杰张建林罗佳杨利军牛勃
- 关键词：地龙底物
