杨云
- 作品数：6 被引量：40H指数：3
- 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金：中国热带农业科学研究院科技基金中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 乙烯利诱导胶乳基因HbEtIe的克隆与表达分析被引量：1
- 2008年
- 在成功构建巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)胶乳差异表达cDNA消减文库的基础上,利用RACE技术成功克隆了一个新的乙烯利诱导表达胶乳基因HbEtIe。分析表明,该基因含有1个158 bp的内含子和2个长度分别为92 bp和178 bp的外显子;cDNA全长551 bp,包含1个270 bp的完整阅读框,174 bp的3′-UTR和107 bp的5′-UTR,推导氨基酸序列中含有一个未知功能结构域DUF581。HbEtIe基因在乙烯利刺激条件下的胶乳中特异性表达并受到乙烯利的调控,其表达量随处理时间的延长而增强。HbEtIe基因与拟南芥衰老相关基因SAG102具有较高的同源性暗示,HbEtIe可能参与了乙烯利诱导巴西橡胶树乳管衰老的分子调控。
- 张治礼刘宽灿朱家红杨云
- 关键词：巴西橡胶树乙烯利诱导胶乳
- 一种快速、高效的橡胶树胶乳总RNA提取方法被引量：24
- 2007年
- 胶乳是橡胶树(Hevea brasiliensis)乳管中特殊的细胞质,主要由橡胶粒子、黄色体、F-W粒子和普通细胞质成分构成,其中橡胶粒子占20%-40%,蛋白含量高达1%-2%。由于高比例橡胶粒子和蛋白质的干扰,目前使用的胶乳RNA提取方法都具有步骤繁琐、胶乳需求量大、操作技巧性强不易掌握等缺点。为快速、高效地获取高质量的胶乳RNA,我们在现有方法的基础上摸索出一套步骤简单、容易操作、快速、高效提取橡胶树胶乳总RNA的简易方法,获得了较好的实验效果。紫外分光光度计、RT-PCR和RACE分析结果表明,使用该方法提取的胶乳RNA质量完全能够满足相应的分子操作,但所需时间仅为目前常用方法的50%,RNA获得率提高了2-3倍,操作难度大大降低。
- 张治礼杨云刘宽灿苏火生
- 关键词：橡胶树胶乳RNA提取
- 橡胶树胶乳再生对乙烯利刺激的分子响应
- 张治礼朱家红徐靖彭世清畅文军张全琪刘宽灿杨云
- 该项目建立了一套高效的橡胶树胶乳RNA提取技术体系，和已有的方法相比，该方法具有步骤简单、容易操作、快速、高效等特点；构建了乙烯利刺激条件下胶乳差异表达基因的cDNA文库，通过大规模筛选和测序获得376个对乙烯利刺激响应...
- 关键词：
- 关键词：橡胶树胶乳基因表达
- 长春花钙调素基因克隆及其假基因的识别被引量：3
- 2007年
- 以长春花[Catharanthus roseus(L.)G.Don]叶片cDNA和基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增得到了长春花钙调素基因447 bp的全长编码cDNA序列和2个大小不同的DNA片段.序列分析表明,DNA长片段全长1 551 bp,由2个外显子和1个内含子构成,为长春花钙调素基因编码区DNA片段;DNA小片段全长447 bp,与447 bp的长春花钙调素基因cDNA核苷酸一致性高达87%,有56个碱基的差异,其中位于226 bp处的碱基A突变为T,即由AAG突变为终止密码子TAG使翻译提前终止.推测此447 bp的DNA小片段可能为长春花钙调素基因的假基因,命名为CCaMP1.
- 苏火生杨云刘宽灿张治礼
- 关键词：假基因
- 乙烯利诱导橡胶树胶乳cDNA消减文库的构建被引量：16
- 2007年
- 为解析乙烯利刺激巴西橡胶树橡胶增产的分子机制,应用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)成功构建了乙烯利刺激条件下橡胶树胶乳与未处理橡胶树胶乳差异表达的cDNA消减文库。经蓝、白斑筛选,共得到了118个阳性克隆。菌落PCR分析结果表明,92%左右的阳性克隆含有大小200～500bp的插入片段。随机选取25个克隆进行了测序,并用基因检索工具(Genbank)对获得的EST进行了Blastx分析,结果表明,5个EST属于无任何序列线索的未知序列,6个属于未知功能的推测蛋白基因,2个属于未知功能的蛋白基因,3个与已知功能基因具有较高的同源性。应用半定量PCR技术,对编号203片段进行的表达分析结果表明,该片段为乙烯利诱导特异表达基因,在乙烯利处理后24h范围内随处理时间的增加而表达量增强,叶片中没有检测到该基因的表达。
- 刘宽灿杨云赵丽红张治礼
- 关键词：乙烯利橡胶树胶乳
