杜文明
- 作品数：24 被引量：37H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院作物科学研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种适用于多种基因型小麦小孢子培养的方法
- 本发明公开了一种适用于多种基因型小麦小孢子培养的方法。本发明所提供的培养小麦小孢子获得再生植株的方法，包括：(1)将待培养小麦的小孢子接种于胚状体诱导培养基，进行诱导培养，得到小孢子胚状体；(2)将所述小孢子胚状体接种于...
- 夏兰琴杜文明孙永伟
- 文献传递
- 一种抑制麦蚜唾液腺体分泌多肽基因表达的dsRNA及其应用
- 本发明公开了一种抑制麦蚜唾液腺体分泌多肽基因表达的dsRNA及其应用。本发明提供了一种双链RNA分子，如序列表的序列2所示。本发明还保护编码所述RNA分子的DNA分子。本发明还保护所述RNA分子或所述DNA分子的应用，为...
- 夏兰琴王大海孙永伟杜文明
- 文献传递
- 用于获得无标记转基因植物的农杆菌专用载体组合物及其应用
- 本发明公开了用于获得无标记转基因植物的农杆菌专用载体组合物及其应用。本发明提供了一种用于获得无标记转基因植物的农杆菌专用载体组合物，由独立包装的重组载体A和重组载体B组成；所述重组载体A为将目的基因插入pClean系列载...
- 夏兰琴王根平杜文明孙永伟
- 文献传递
- 麦长管蚜唾液蛋白C002的基因克隆与RNA干扰研究被引量：12
- 2014年
- 【目的】蚜虫唾液相关蛋白C002是一种水溶性唾液蛋白,在蚜虫取食过程中发挥着重要作用。本研究探讨了蚜虫唾液相关蛋白基因C002在麦长管蚜Sitobion avenae(F.)取食过程中的作用和功能。【方法】根据豌豆蚜基因C002序列,同源克隆了麦长管蚜C002基因,并应用荧光定量PCR和RNA干扰(RNAi)技术分别对该基因的表达规律和功能进行了研究。【结果】结果表明:麦长管蚜C002基因c DNA开放阅读框长663 bp,编码220个氨基酸,命名为Sv C002。转录水平的表达时序分析发现,Sv C002在蚜虫各个时期都有表达,在2龄若蚜时期表达量最高。ds RNA饲喂结果显示,麦长管蚜取食ds C002 4 d和6 d后,C002基因的表达量分别下降54%和69%,差异极显著(P<0.01),麦长管蚜存活率较对照组下降了32.2%和53.3%。将饲喂ds C002的麦长管蚜接种到感蚜小麦(北京837),蚜虫在短时期内出现大量死亡现象,第6天和第8天存活率分别为44.4%和35.6%,低于对照组并达到极显著水平。【结论】C002基因在麦长管蚜的取食行为中发挥着重要作用,可以作为麦长管蚜防治的潜在RNAi靶标基因。
- 李雪峰范佳孙永伟王根平陈红梅闫婷杜文明夏兰琴
- 关键词：麦长管蚜RNA干扰荧光定量PCR
- 一种抑制麦蚜腺体蛋白MYS2基因表达的dsRNA及其应用
- 本发明公开了一种抑制麦蚜腺体蛋白MYS2基因表达的dsRNA及其应用。本发明提供了一种双链RNA分子，如序列表的序列2所示。本发明还保护编码所述RNA分子的DNA分子。本发明还保护所述RNA分子或所述DNA分子的应用，为...
- 夏兰琴王大海孙永伟杜文明
- 文献传递
- 植物安全转基因技术研究现状与展望被引量：21
- 2014年
- 转基因技术是进行基因功能研究和作物遗传改良的重要工具。根癌农杆菌介导转化法和基因枪轰击法是两种主要的遗传转化方法。从1996年首例转基因作物商业化种植以来,2012年全球有28个国家和地区种植转基因作物,种植面积已达1.7亿公顷。随着全球转基因作物的大面积商业化种植,转基因植物的安全性越来越多地受到公众关注。安全转基因技术的研发对于转基因植物的商业化生产具有重要意义。文章详细介绍了目前已报道的安全转基因技术原理及其应用现状。按其作用原理和目的将其分为4类:安全选择标记、标记基因删除及基因叠加、基因漂移防控法和基因定点编辑整合技术。其中,安全选择标记按其筛选原理分为糖代谢相关标记、氨基酸代谢相关标记、激素相关标记和抗逆相关标记。与抗生素和除草剂抗性标记相比,这类标记基因及其表达产物对人和其他生物更安全。标记基因删除及基因叠加技术包括共转化法、位点特异性重组法、转座子法、同源重组法以及基于位点特异性重组的基因叠加技术,其中共转化法又包括农杆菌介导的共转化法和基因枪介导的表达盒共转化法。基因叠加技术为复合性状转基因植物研发奠定了基础,有望成为未来多性状转基因植物研发的重要技术之一。基因漂流防控法包括叶绿体转化法和基因拆分法。基因定点编辑和整合技术包括锌指核酸酶、TALEN和CRISPR/Cas9系统介导的基因定点编辑和整合技术。其中,TALEN和CRISPR/Cas9技术,设计简单,成本低,易操作,靶点分布广泛,有望成为安全转基因研发和应用的重要技术。文章对这些技术原理及其应用现状进行了综述,讨论了其优缺点,并展望了安全转基因技术研发重点和发展趋势。
- 王根平杜文明夏兰琴
- 关键词：转基因植物安全标记基因
- 一种利用CRISPR/LbCpf1系统实现目的基因在植物中同源重组的方法
- 本发明公开了一种利用CRISPR/LbCpf1系统实现目的基因在植物中同源重组的方法。本发明以水稻ALS基因为研究对象，构建了同源重组载体。载体甲采用OsU3作为启动子，启动crRNAs的转录，且载体中的修复模板只含有左...
- 夏兰琴李少雅赵云德李晶莹张佳慧杜文明
- 文献传递
- 不同杀菌剂对小麦真菌毒素污染防控及农药残留风险评估分析被引量：4
- 2021年
- 为了解不同杀菌剂及施药次数对小麦赤霉病所造成的真菌毒素防控效果及所用杀菌剂带来的潜在安全问题,对信阳、襄阳两地区小麦主栽品种连续两年分别喷施不同种类、不同次数的杀菌剂,通过LC-MS/MS测定小麦中真菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)及各杀菌剂残留量,分析不同杀菌剂对小麦中DON累积量的影响,并对小麦籽粒中杀菌剂的残留量进行风险评估。结果表明,4种杀菌剂(50%多菌灵WP、25%氰烯菌酯SC、25%咪鲜胺EC、70%甲基托布津WP)均能不同程度降低小麦中DON含量。随着施药次数的增加小麦中DON含量呈下降趋势(除多菌灵外)。喷施50%多菌灵1次小麦籽粒中DON含量明显增加,较对照增加7%(信阳)、18%(襄阳),当喷施次数增加至2、3、4次,籽粒中DON累积量分别降至对照的55%~65%、24%~39%及20%~27%。25%咪鲜胺EC喷施3次后籽粒中DON含量较对照显著降低(P<0.05),继续增加喷施次数,DON含量并未显著降低。25%氰烯菌酯SC对DON防控效果最佳,喷施1、2、3、4次小麦籽粒中DON毒素降至对照的42%~58%、29%~49%、12%~21%及6%~10%。喷施70%甲基托布津WP对籽粒中DON的影响与25%氰烯菌酯SC效果相差不大,喷施4次可使DON降至6%~12%。4种杀菌剂在小麦籽粒中的残留量均随施药次数的增加而增加。其中多菌灵的残留量最大,当施药4次后,信阳、襄阳两地小麦中多菌灵残留量分别为502.54μg·kg^(-1)、547.38μg·kg^(-1),均超过国家粮食安全限量水平,而其余三种农药残留量较低,均在安全限量范围内。研究结果还发现,小麦籽粒中的杀菌剂残留量与毒素DON的累积水平呈现一定程度的负相关性,施药次数与其残留量成正相关关系。因而,长江流域及江淮地区等小麦赤霉病易流行地区,建议于小麦扬花期及时喷施2~3次防控效果良好的杀菌剂,既能达到防控真菌毒素污染又可避免杀菌剂残留过高带来的安全隐患,以保证小麦安
- 吴丽孙娟张慧杰张慧杰胡学旭李为喜孙丽娟张妍杜文明
- 关键词：小麦赤霉病杀菌剂残留量
- 一种CRISPR/Cpf1系统介导的以RNA转录本为修复模板的同源重组方法
- 本发明公开了一种CRISPR/Cpf1系统介导的以RNA转录本为修复模板的同源重组方法。本发明以水稻ALS基因为研究对象，构建了同源重组载体。将RCR1‑RCR2‑RDR片段进行体外转录，通过RNP方法，以RNA转录本作...
- 夏兰琴李少雅赵云德李晶莹杜文明张佳慧
- 文献传递
- 一种抑制麦蚜丝氨酸蛋白酶I基因表达的dsRNA及其应用
- 本发明公开了一种抑制麦蚜丝氨酸蛋白酶I基因表达的dsRNA及其应用。本发明提供了一种双链RNA分子，如序列表的序列2所示。本发明还保护编码所述RNA分子的DNA分子。本发明还保护所述RNA分子或所述DNA分子的应用，为如...
- 夏兰琴王大海孙永伟杜文明
- 文献传递
