李靖一
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：河北农业大学更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 展示在巴斯德毕赤酵母细胞表面的内切-1,4-β-葡聚糖酶的酶学性质
- 2015年
- 本研究目的是利用毕赤酵母细胞表面展示技术来改善内切-1,4-β-葡聚糖酶的酶学性质。结果显示,SDS-PAGE显示展示酶（DEG）的分子量为34.1kDa,对CMC-Na有底物专一性。与游离酶（FEG）相比,DEG的最适作用温度和最适作用pH值未发生变化,分别为70℃和4.0;对底物的亲和力降低;pH 2.5~8.5时酶活残留率为60%,比游离酶高0.5倍;温度70℃时酶活无损失,残留率为102%,同等条件下比游离酶高1.5倍;DEG重复使用10次以后保留活性仍为65%;而且展示酶对Co2＋、Mn2＋、Hg2＋等重金属离子的耐受力也大大增强。本研究结果表明,展示内切-1,4-β-葡聚糖酶的酶学性质得到大幅度改善,其酸热稳定性、重金属离子耐受性和操作稳定性均有所提高,DEG作为一种酵母全细胞生物催化剂在各种纤维素降解领域具有很广阔的应用前景。
- 李靖一赵男谢晶于宏伟马雯郭润芳
- 关键词：毕赤酵母细胞表面展示酶学性质
- 以pir-N端为锚定序列构建巴斯德毕赤酵母通用表面展示载体被引量：1
- 2012年
- 为了构建巴斯德毕赤酵母通用表面展示载体,本研究利用DNA重组技术从酿酒酵母EBY100中克隆了与酵母细胞壁共价连接的甘露糖蛋白PIR的N端重复序列(pir-N),体外连接到毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K中,得到新型巴斯德毕赤酵母表面展示的通用载体pPIC9K-Pir-N,并将β-葡萄糖苷酸酶基因与pir-N端融合。结果表明β-葡萄糖苷酸酶已成功展示到巴斯德毕赤酵母细胞表面,使巴斯德毕赤酵母细胞具有了β-葡萄糖苷酸酶催化活性,研究成果为其他生物催化剂的酵母表面展示提供技术平台。
- 谢晶于宏伟李宁李靖一郭润芳
- 关键词：巴斯德毕赤酵母细胞表面展示
- pGAP调控下的内切纤维素酶组成型表达及酶制剂的制备
- 毕赤酵母表达系统是一种利用甲醇为唯一碳源和能源，高水平表达外源蛋白的真核表达系统。甲醇有毒，且易燃、易爆，在大规模生产过程中很不安全，而且发酵产物中易有残留，这对毕赤酵母表达系统在工业、食品等方面上的应用产生一定影响。 ...
- 李靖一
- 关键词：内切纤维素酶基因表达发酵工艺
- 文献传递
- 利用添加剂提高内切纤维素酶制剂的热稳定性
- 2014年
- 为了提高内切纤维素酶的热稳定性,利用单因素试验和正交试验对多元醇类、糖类、金属离子以及蛋白质对酶热稳定性的影响进行了研究。结果表明,半乳糖、明胶、糊精能显著提高该内切纤维素酶的热稳定性,正交试验获得最佳复合稳定剂配比为:半乳糖4%、明胶1%、糊精8%。在该复合稳定剂作用下,65℃保温2 h后,酶活保留率达250.67%,显著提高了内切纤维素酶的热稳定性。
- 李靖一于宏伟赵男马雯郭润芳
- 关键词：内切纤维素酶稳定剂热稳定性
