李岳峰
- 作品数:5 被引量:4H指数:1
- 供职机构:西北农林科技大学动物科技学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 干扰Sema7A抑制C2C12成肌细胞的增殖和分化被引量:1
- 2014年
- 为研究脑信号蛋白家族(Semaphorins)成员Sema7A对成肌细胞增殖和分化的影响,本文设计并合成了Sema7A基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),用此siRNA转染C2C12成肌细胞.通过Hoechst核染和流式细胞术检测细胞增殖情况,免疫荧光检测肌管的形成情况,realtime qPCR和Western印迹技术检测成肌标记基因的变化.结果显示,干扰Sema7A后,C2C12成肌细胞增殖减慢,处在G2和S期的细胞所占的比例明显下降,而G1期细胞的比例升高.免疫荧光检测结果显示,干扰Sema7A后,肌管的直径及MyHC+细胞所占比例均显著降低.Real-time qPCR和Western印迹结果也显示,肌肉分化标志基因MyoD、MyoG、MyHC的mRNA及蛋白质表达均下降.进一步检测Sema7A受体下游信号通路发现,干扰Sema7A后,其下游信号分子PI3K和AKT的磷酸化水平被下调.以上结果表明,Sema7A可以调节C2C12成肌细胞的增殖和分化,可能是通过其受体作用于PI3K/AKT信号通路实现的,这为进一步研究Sema7A在骨骼肌发育中的作用提供实验基础.
- 贾龙李岳峰吴国芳路宏朝杨公社史新娥
- 关键词:C2C12成肌分化
- 一种高效细胞永生化载体的构建及其功能分析
- 宋子仪杨浩高倩李岳峰史新娥庞卫军杨公社
- 关键词:细胞永生化HTERT慢病毒猪前体脂肪细胞
- 干扰Semaphorin7A抑制C2C12成肌细胞的增殖及分化
- 贾龙李岳峰史新娥杨公社
- 关键词:C2C12成肌分化
- MiR-125a-5p抑制3T3-L1前体脂肪细胞分化被引量:2
- 2014年
- MicroRNAs(miRNAs)是一类在脂肪组织发育中发挥重要作用的小非编码RNA.为探明miR-125a-5p在3T3-L1前体脂肪细胞中的作用,采用实时qPCR检测了miR-125a-5p在小鼠各组织及3T3-L1前体脂肪细胞分化过程中的表达;使用经化学修饰的miR-125a-5p模拟物agomir及抑制剂antagomir转染3T3-L1前体脂肪细胞,采用实时qPCR和Western印迹检测成脂标志基因Pparγ和aP2的表达,油红O染色观察脂肪细胞脂质积累.结果显示,miR-125-5p在小鼠脂肪组织中高丰度表达,在3T3-L1前体脂肪细胞分化过程中表达下降.过表达miR-125a-5p,与对照组相比,成脂标志基因Pparγ和aP2在mRNA和蛋白质水平均明显下降;油红O染色及定量结果显示脂质积累减少.抑制剂处理结果显示,Pparγ和aP2在mRNA和蛋白质水平均有不同程度上升,但油红O染色及定量结果差异不显著.以上结果表明,miR-125a-5p在脂肪细胞分化中发挥负调控作用.
- 纪洪雷宋成创李优磊李岳峰郑雪莉杨公社
- 关键词:3T3-L1脂肪细胞分化