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方三华: 作品数：68 被引量：86H指数：6; 供职机构：浙江大学医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>; 相关领域：医药卫生文化科学生物学理学更多>>

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大型仪器共享平台运行机制综合创新探析被引量：4: 2023年; 大型仪器不仅是高校科学研究和社会服务的物质基础,也是高校研究生实验技能培养的重要载体。推进大型仪器共享平台运行机制创新是服务于高校创新驱动发展战略的重要举措。文章以浙江大学医学院大型仪器共享平台为例,阐述平台在组织构架、大型仪器调研和论证、研究生操作技能培养、实验技术队伍建设、安全管理等五个方面的创新举措。该校通过综合创新,建立高效、安全的大型仪器共享平台运行体系,提升平台服务能力和水平,促进平台内涵式发展,为高校科学研究、研究生培养和社会服务提供了良好的技术支撑。; 方三华李艳伟黄莹莹刘双双

大型仪器共享平台网络预约系统的优化和提升被引量：7: 2021年; 医学院公共技术平台从成立之初就非常重视大型仪器预约系统建设,在借鉴兄弟院校建设经验基础上,Ⅰ期建设实现了仪器信息展示、预约、使用、维护、统计、计费等一体化管理;在Ⅱ期建设中,对仪器预约、计费、统计报表等模块进行优化,并新增培训和考核、配件管理、仪器电子档案等模块,拓展和优化了网络预约系统功能,显著提高了平台的运行效率。但在测试费缴纳、绩效考核信息化、用户评价体系和技术交流等方面仍然存在问题和不足,有待进一步优化和提升。; 方三华刘丽洪晓黎杨文娟李艳伟

米诺环素对大鼠和小鼠脑外伤的部分保护作用被引量：4: 2006年; 目的:研究半合成四环素类药物米诺环素对中枢神经损伤的保护作用。方法:在大鼠开放性脑外伤、小鼠闭合性脑外伤和脑冷冻伤3种脑损伤模型,于手术前2 d开始,每天2次预先给予米诺环素45 m g/kg ip;手术前30 m in及手术后1 h,各给药1次;手术后第1、2天,每天给药1次。观察手术后行为学变化,14 d后计算脑损伤面积及神经元数量。结果:米诺环素对大鼠开放性脑撞击伤,除了加快肢体功能(爬板角度)恢复外,对其他指标无明显作用;对小鼠脑闭合伤,能抑制神经元减少,但对行为学变化无明显作用;对小鼠脑冷冻伤,能减少死亡率及损伤面积,对神经元减少的作用不明显。结论:米诺环素对不同动物的不同脑外伤有部分保护作用。; 盛雯雯张纬萍王梦令张世红胡华储利胜周宇方三华余国良钱晓东陈科达徐慧敏刘路英张磊魏尔清; 关键词：脑损伤神经保护药

白三烯D_4体外诱导小胶质细胞激活的作用被引量：3: 2013年; 目的:观察白三烯D4(LTD4)激活小胶质细胞株BV2细胞的作用,探讨介导BV2细胞激活的半胱氨酰白三烯受体(CysLT受体)亚型。方法:以Western blotting和免疫组化鉴定BV2细胞上CysLT受体的表达;以LTD4及CysLT受体拮抗剂处理BV2细胞后,采用MTT还原法检测细胞活性,微珠示踪法(以流式细胞仪检测)观察细胞吞噬的变化,RT-PCR检测炎症因子IL-6 mRNA的表达变化。结果:LTD4不影响BV2细胞增殖,但随着LTD4浓度增高可增强细胞吞噬、增加IL-6mRNA的表达,100 nmol/L LTD4使细胞吞噬增高为对照的1.4倍(P<0.001),IL-6 mRNA的表达增高为对照的2倍(P<0.01);LTD4诱导BV2细胞上调表达IL-6 mRNA可被CysLT1受体选择性拮抗剂孟鲁司特和CysLT1/CysLT2非选择性拮抗剂BAY u9773抑制,而CysLT2受体选择性拮抗剂HAMI 3379对此无明显影响;HAMI 3379和BAY u9773(100 nmol/L)能进一步增强LTD4诱导的BV2细胞吞噬。结论:体外LTD4可激活BV2细胞,LTD4诱导细胞IL-6 mRNA上调表达由CysLT1受体介导,LTD4诱导的细胞吞噬增强受CysLT2受体负性调节。; 张壮骆江云黄静刘志娴方三华张纬萍魏尔清卢韵碧; 关键词：白三烯D4 小胶质细胞半胱氨酸

半胱氨酰白三烯受体1拮抗剂普鲁司特调节SK-N-SH细胞分化被引量：5: 2007年; 目的:观察半胱氨酰白三烯受体激动剂LTD4以及受体1(CysLT1)拮抗剂普鲁司特对人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞分化的影响。方法:以维A酸为阳性对照,观察LTD4、普鲁司特、LTD4+普鲁司特诱导SK-N-SH细胞形态学变化;用免疫印迹法观察SK-N-SH细胞CysLT1和CysLT2受体的表达;用免疫荧光法观察神经元分化标记物微管相关蛋白(MAP-2)的表达。结果:免疫印迹显示,SK-N-SH表达CysLT1受体和CysLT2受体,CysLT2受体表达较多。形态学结果显示,维A酸、普鲁司特、LTD4+普鲁司特诱导SK-N-SH细胞发生形态学改变,表现为胞体变小,有明显的突起生长;而LTD4无明显作用。免疫荧光结果显示,在对照组和普鲁司特组MAP-2主要分布于胞体;在维甲酸组MAP-2除了分布于胞体外,还分布于突起。普鲁司特增加MAP-2阳性细胞数。结论:CysLT1受体拮抗剂普鲁司特参与SK-N-SH细胞分化的调节。; 彭芳方三华郑晓亮张纬萍卢韵碧魏尔清; 关键词：半胱氨酰白三烯受体白三烯D4

去甲二氢愈创木酸部分抑制大鼠局灶性脑缺血后炎症反应被引量：1: 2010年; 本实验旨在观察去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid,NDGA)对大鼠局灶性脑缺血后炎症细胞聚集的作用及其机制。在大鼠大脑中动脉阻塞30min后进行再灌注72h,在再灌注30min,2、24、48h时分别腹腔注射一次NDGA(5、10mg/kg)。再灌注72h后检测脑损伤、内源性IgG渗出、中性粒细胞和巨噬细胞/小胶质细胞聚集、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA和蛋白表达,并在再灌注3h后检测脑内5-脂氧酶(5-lipoxygenase,5-LOX)的催化产物白三烯B4(leukotriene B4,LTB4)和半胱氨酰白三烯(cysteinyl leukotrienes,CysLTs)含量。结果显示:NDGA能显著改善脑损伤,减少内源性IgG渗出、中性粒细胞浸润、ICAM-1mRNA和蛋白表达,同时降低脑内LTB4和CysLTs含量,但对巨噬细胞/小胶质细胞聚集没有影响。上述结果提示,NDGA对脑缺血亚急性期炎症反应的抑制主要表现为减少中性粒细胞浸润,机制可能与抑制5-LOX激活有关。; 储利胜方三华周宇印媛君柯庆陈伟燕魏尔清; 关键词：去甲二氢愈创木酸脑缺血中性粒细胞小胶质细胞 5-脂氧酶

半胱氨酰白三烯受体2对脑损伤的调节作用及其信号转导: 脑缺血、脑外伤等脑损伤后,脑内继发炎症反应,加重脑损伤.花生四烯酸的5-脂氧酶产物半胱氨酰白三烯(LTC4,LTD4,LTE4),通过其受体(CysLT1和CysLT2受体)对炎症反应发挥重要调节作用.我们已经报道Cys...; 魏尔清张纬萍卢韵碧方三华; 关键词：半胱氨酰白三烯局灶性脑缺血小胶质细胞星形胶质细胞信号传导

P2Y样G蛋白偶联受体GPR17参与缺糖缺氧诱导BV2小胶质细胞激活: 目的探讨P2Y样G蛋白偶联受体GPR17是否参与缺糖缺氧/恢复(OGD/R)诱导BV2小胶质细胞的激活。方法以OGD诱导BV2小胶质细胞激活,以MTT 还原法检测细胞活性,以Western blotting和免疫细胞...; 张壮黄静赵冰张霞燕方三华张纬萍魏尔清卢韵碧

全内反射荧光显微术在G蛋白偶联受体研究中的应用: 2023年; G蛋白偶联受体是最大的细胞膜受体超家族,是许多临床治疗药物的靶点。放射性配体结合、酶联免疫吸附和免疫共沉淀是研究它们结构和功能的主要技术,但这些属于群体平均(ensemble average)研究,无法得到单个分子图像和动态变化。全内反射荧光显微镜利用隐逝波激发临界面下200 nm范围内荧光物质成像,具有信噪比高、Z轴分辨率高、速度快和对生物样本损伤小等优点,是常用的单分子荧光成像技术。本文在介绍全内反射荧光显微镜发展历史、原理、组成和成像优势的基础上,详细阐述全内反射荧光显微镜在研究G蛋白偶联受体构象变化、寡聚化、内吞和再循环以及信号转导等方面的应用,并提出未来展望。; 方三华杨丹刘丽肖桂凤; 关键词：荧光显微镜 G蛋白偶联受体

半胱氨酰白三烯受体对小鼠小胶质细胞吞噬功能的调节作用被引量：1: 2018年; 目的:研究半胱氨酰白三烯(CysLT)受体(CysLT_1R和CysLT_2R)对小鼠BV2小胶质细胞吞噬功能的调节作用。方法:以经典炎症激活剂脂多糖和CysLT受体激动剂LTD_4处理BV2细胞,采用免疫荧光计数法和流式细胞仪检测BV2细胞吞噬功能,免疫荧光共染法观察BV2细胞中CysLT_1R和CysLT_2R表达分布。结果:脂多糖和LTD_4均能增强BV2细胞吞噬功能,而CysLT_1受体选择性拮抗剂孟鲁司特和CysLT_2受体选择性拮抗剂HAMI 3379均能抑制脂多糖和LTD_4诱导的BV2细胞吞噬功能增强;脂多糖和LTD_4激活BV2细胞后可引起CysLT_1R和CysLT_2R在细胞内分布变化,两种亚型的受体分布变化趋势基本一致,且存在共表达。结论:CysLT_1R和CysLT_2R均可以调节BV2细胞的吞噬功能,且两者具有协同性。; 王晓蓉王晓蓉卢韵碧张纬萍魏尔清

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