张金亚 作品数:13 被引量:24 H指数:2 供职机构: 中国兽医药品监察所 更多>> 发文基金: 北京市科技新星计划 国家高技术研究发展计划 北京市科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
布鲁氏菌病CF-ELISA抗体检测试剂盒 本发明涉及一种布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验(CF‑ELISA)诊断试剂盒,本试剂盒将补体结合试验(CFT)中的反应系统与酶联免疫吸附试验(ELISA)中的酶标记放大系统相结合。本试剂盒较传统补体结合试验诊断试剂而言... 毛开荣 张金亚 王楠 徐磊 王苗苗 丁家波 蒋玉文 朱良全 程君生 蒋卉 蒋菲文献传递 一种布鲁氏菌病温敏凝胶剂型疫苗 本发明公开了一种布鲁氏菌病温敏凝胶剂型疫苗。本发明提供一种布鲁氏菌病凝胶剂型疫苗,为以泊洛沙姆为凝胶基质,布鲁氏菌病活疫苗为活性成分的凝胶剂型疫苗。本发明将布鲁氏菌病活疫苗与温敏凝胶结合应用于布鲁氏菌病的粘膜免疫(点眼、... 毛开荣 王苗苗 王楠 徐磊 张金亚 张贺 万仁玲 于晓辉 丁家波 朱良全 彭晓微 蒋卉文献传递 PRRSV HEB-2013株的分离与全基因序列分析 2015年 2013年9月从河北某发病猪场分离到1株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),将该毒株命名为HEB-2013株,在进行全基因组测序后发现,HEB-2013株基因组全长为15336 nt,包含9个开放阅读框,其中5’UTR长189 nt,3’URT长165 nt;随后将该毒株的全基因序列与NCBI上可查的历年华北地区PRRSV基因组序列进行了比对分析,发现其与2006年分离的TJ株同源性最高,为99.80%,而与2000年分离的BJ-4株同源性最低,仅为88.39%,进一步综合NSP2、GP3和GP5的氨基酸序列比对结果,系统分析了潜在毒力位点与病毒致病性的关系,并且提出了5个新的有可能与病毒致病性相关的潜在毒力位点。 张东东 刘灿 龚文芝 宁宜宝 范学政 张金亚关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 全基因序列分析 分子特征 豚鼠补体C1q-B单克隆抗体60G4的制备与应用 本发明涉及一种豚鼠补体C1q‑B单克隆抗体60G4(60G4单抗)。60G4单抗是通过用大肠杆菌的工程菌重组表达豚鼠的补体C1q‑B,再以表达的C1q‑B免疫小鼠,将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选后获得了抗体分泌性... 毛开荣 张金亚 王楠 徐磊 王苗苗 丁家波 蒋玉文 朱良全 程君生 蒋卉 蒋菲文献传递 豚鼠补体C1q‑B单克隆抗体60G4的制备与应用 本发明涉及一种豚鼠补体C1q‑B单克隆抗体60G4(60G4单抗)。60G4单抗是通过用大肠杆菌的工程菌重组表达豚鼠的补体C1q‑B,再以表达的C1q‑B免疫小鼠,将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选后获得了抗体分泌性... 毛开荣 张金亚 王楠 徐磊 王苗苗 丁家波 蒋玉文 朱良全 程君生 蒋卉 蒋菲2308、M28、S1330、16M四株布鲁氏菌灭活参数研究 被引量:2 2015年 【目的】比较不同灭活方法对布鲁氏菌灭活的效果,确定灭活参数,为制备布鲁氏菌灭活抗原提供参考。【方法】将4株布鲁氏菌参考强毒株2308(牛种)、M28(羊种)、S1330(猪种)以及16M(羊种)分别经大豆酶消化蛋白胨(TSA)培养基培养繁殖后,用生理盐水制成(4-8)×1010 CFU/m L的菌悬液,分成等份于80 oC灭活不同时间,另将同样浓度的菌悬液分别用不同浓度甲醛于37 oC灭活不同时间,通过灭活检验,确定灭活效果。取经甲醛和热灭活的16M抗原,分别以1×1010 CFU/只剂量皮下注射1.5-2.0 kg家兔2只,免疫6周内,每周采血用虎红平板凝集试验(RBT)和试管凝集试验(SAT)测定抗体效价。【结果】80 oC、5 min可灭活2308、S1330和16M三种菌株,80 oC、10 min可灭活全部4种菌株。0.2%甲醛灭活7 d,4种试验菌株均不能被彻底灭活;0.4%甲醛在12 h内只能灭活16M,72 h可灭活M28;0.4%甲醛灭活2308和S1330两次试验结果差异较大。0.6%甲醛可在72 h内灭活4种试验菌。不同方法灭活的16M抗原免疫家兔后,其血清抗体虎红平板凝集和试管凝集效价消长趋势基本一致,甲醛灭活的抗原免疫原性略高于热灭活抗原。【结论】80 oC热灭活和0.6%甲醛灭活均可用于对布鲁氏菌的灭活,且不影响布鲁氏菌的免疫原性。 朱良全 王芳 吴竞 冯宇 张金亚 王楠 朱鸿飞 丁家波关键词:布鲁氏菌 灭活 甲醛 布鲁氏菌A、M因子血清的研制 2014年 研制牛种布鲁氏菌A因子血清和羊种布鲁氏菌M因子血清,用于光滑型布鲁氏菌特异性种属鉴定。将灭活牛种布鲁氏菌2308株及羊种布鲁氏菌16M株免疫1.5~2 kg家兔各5只制备高免血清。对高免血清采用抗原交叉吸附的方法,制得A、M因子血清,分装冻干后置-20℃保存。微量试管凝集试验结果显示:研制的A因子血清对16M抗原在1∶2.5时无凝集现象,对2308抗原凝集价为1∶320;研制的M因子血清对2308抗原在1∶2.5时无凝集现象,对16M抗原凝集价为1∶160。玻片凝集试验结果显示:研制的A、M因子血清对异种抗原无凝集现象。试验表明,研制的A、M因子血清具有特异性强、效价高的特点,可辅助光滑型布鲁氏菌特异性种属鉴定。 张金亚 程君生 冯宇 丁家波 王楠 皮向成 吴竞 张东东 朱良全 毛开荣关键词:布鲁氏菌 一株犬种布鲁氏菌的鉴定及毒力测定 被引量:2 2017年 对分离到的一株疑似犬种布鲁氏菌进行生物特性和基因型鉴定,并用宿主实验动物(比格犬)测定了最小感染量和脾含菌量。形态与染色特性、培养特性、血清学特性、生化特性鉴定以及Multi-PCR和16S rRNA测序结果表明,该分离株为犬种布鲁氏菌,其对比格犬的最小感染剂量为10~5 CFU/m L,对应的脾含菌量为4×10~5~3×10~6 CFU/g。 张贺 徐磊 王苗苗 王楠 张金亚 丁家波 朱良全 周桂兰 毛开荣 周双海关键词:犬种布鲁氏菌 布鲁氏菌病CF‑ELISA抗体检测试剂盒 本发明涉及一种布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验(CF‑ELISA)诊断试剂盒,本试剂盒将补体结合试验(CFT)中的反应系统与酶联免疫吸附试验(ELISA)中的酶标记放大系统相结合。本试剂盒较传统补体结合试验诊断试剂而言... 毛开荣 张金亚 王楠 徐磊 王苗苗 丁家波 蒋玉文 朱良全 程君生 蒋卉 蒋菲文献传递 布鲁氏菌病弱毒活疫苗经不同黏膜途径免疫奶牛的排菌程度及免疫反应 被引量:9 2017年 为探究布鲁氏菌病疫苗经不同黏膜途径免疫奶牛后对体液免疫与细胞免疫水平及疫苗体外排菌方面的影响,将80头10~12月龄的奶牛平均分为四组,通过眼部滴注(A组)、口腔喷注(B组)、阴道灌注(C组)三种黏膜免疫途径对奶牛接种布鲁氏菌病弱毒活疫苗(A19株),并与皮下注射免疫组(D组)进行比较,测定了免疫后7 d内黏膜免疫组的排菌情况,180 d内四组免疫奶牛的抗体效价和60 d内四组免疫奶牛的外周血淋巴细胞细胞因子分泌(IFN-γ、IL-2和IL-4)水平。结果显示:黏膜免疫组在免疫后5 d内均有不同程度的排菌,以免疫后1 d内排菌量为最高,并且在黏膜免疫组中阴道灌注组排菌量最低;各组奶牛在免疫后20 d时MSAT测定抗体效价平均值均上升至最高,之后持续下降,黏膜免疫组的抗体水平显著低于注射免疫组,且在黏膜免疫组中阴道灌注组的抗体水平最高;A组和B组奶牛在免疫后120 d RBT检测无阳性,C组在免疫后150 d RBT检测无阳性,D组在免疫后180 d RBT检测阳性率35%;B组、C组在免疫后7 d,A组、D组在免疫后20 d IFN-γ分泌量达到最高值,各组IL-2和IL-4分泌量未见明显变化,黏膜免疫组中阴道免疫组的IFN-γ分泌量为最高,仅次于注射免疫。结果表明,阴道灌注是一种较优的奶牛布鲁氏菌病黏膜免疫方式。 王苗苗 徐磊 王楠 张贺 张金亚 曹如周 郭志刚 杨宏军 毛开荣关键词:黏膜免疫 排菌 细胞因子