张迺蘅
- 作品数：29 被引量：36H指数：4
- 供职机构：北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- M－CAT盒在鸡AchR γ－亚基基因转录激活中的作用被引量：6
- 1996年
- 原代培养鸡胚肌细胞瞬时转染结合氯霉素乙酰基转移酶水平测试表明：鸡ＡＣｈＲγ－亚基基因缺失近起始点一对Ｅ盒（ＣＡＮＮＴＧ）的－２０４／－５０片段与含Ｅ盒的－２０４／＋３６片段一样，均可独立激活ｔｋ启动子的转录活性，证明了该片段的增强子样作用，利用鸡胚肌肉核抽提物与－２０４／－５０片段进行胶阻滞分析，检出了明显的迁移位移条带的发生；迁移条带不仅可被未标记的－２０４／－５０片段消除，而且还可被含Ｍ－ＣＡＴ盒（ＣＡＴＴＣＣＴ）的２３ｂｐ寡核苷酸竞争阻断，说明胶阻滞分析中出现的迁移条带系由核内因子特异结合－２０４／－５０片段中的Ｍ－ＣＡＴ序列所致，上述结果证明，Ｍ－ＣＡＴ盒对鸡ＡＣｈＲγ－亚基基因－２０４／－５０片段的转录激活功能起作用。
- 王军贾弘褆张迺蘅
- 关键词：乙酰胆碱受体
- 人神经母细胞瘤株中β-淀粉样前体蛋白基因IL-1反应元件的研究被引量：1
- 1997年
- 细胞团子IL-1β可以诱导SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞中APP基因的转录．为了研究APP基因启动子区的IL-1β反应元件，用含不同长度APP启动子片段的报告基因载体，瞬时转染SH-SY5Y细胞，发现APP启动子在SH-SY5Y细胞中有较强活性，其中-488到-303区为IL-1β诱导APP转录活性增加所必需，这个区域包括1个AP1结合位点和1个HSE元件．
- 王少文马康涛张迺蘅
- 关键词：淀粉样前体蛋白基因
- IL-1对β-淀粉样前体蛋白基因在人神经母细胞瘤株中表达的调节作用被引量：2
- 1997年
- β-淀粉样前体蛋白及白介素-1β与老年性痴呆病的发生发展有密切关系．用SH-SY5Y细胞株研究了rh-IL-1β对细胞中APPmRNA表达的影响．Northern杂交结果显示，IL-1β可诱导SH-SY5Y细胞中APPmRNA的表达增加，且有时间剂量反应关系．通过转录延伸实验证实，IL-1β对APP基因表达的诱导作用主要发生在转录水平．
- 王少文马康涛张迺蘅
- 关键词：淀粉样前体蛋白基因IL
- 重组人乙型肝炎病毒E抗原(HBeAg)的基因扩增与表达
- 1992年
- 本文从两例临床确诊为乙型肝炎患者的2mg肝穿刺标本中利用基因扩增方法,设计扩增出缺失羧基端34个氨基酸的乙型肝炎病毒C抗原(HBcAg)基因的0.45kb基因片段,将此片段克隆入表达载体,导入大肠杆菌中表达,结果获得每毫升培养液含有100万酶联反应单位的HBgAg,也存在1万酶联反应单位的HBcAg。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,其表达产物占菌体总蛋白的30～37％,分子量为155kD。HBeAg基因结构及表达形式有待进一步研究和探讨。
- 智刚王东李波安献禄王军楼王利兵张迺蘅
- 关键词：基因扩增基因表达乙型肝炎病毒抗原
- 培养细胞RNA与DNA的同时提取被引量：1
- 1993年
- RNA与DNA的提取技术,从微量分离到大规模制备,已日趋完善。但有时样品数量较少如处理细胞标本时,则有必要同时提取RNA与DNA。目前一般采用CsCL超速离心获取具有不同密度离心速率的DNA和RNA。该法简单且收率高,但受设备条件限制。我们在提取人肺高转移巨细胞癌细胞系RNA用于构建cDNA文库时,将现有方法稍加改良,可以同时制备纯度较高的基因组DNA。
- 汪洛张迺蘅赵建新
- 关键词：RNADNA细胞培养
- 人α心钠素多拷贝基因在大肠杆菌中的高效表达
- 1999年
- 目的：选用合适的质粒表达载体，以多拷贝基因的形式在大肠杆菌中高效表达人α心钠素，为人α心钠素的下游纯化工作及基因工程菌的中试打下基础。方法：采用ＰＣＲ，克隆及连续亚克隆，序列分析，原核温度诱导表达等方法。结果：ＰＣＲ方法扩增αｈＡＮＰ基因，克隆至原核表达载体ｐＭＳ３１ｂ，热诱导表达融合蛋白。结论：在大肠杆菌中获得了人α心钠素的高表达。
- 赵明马康涛张迺蘅
- 关键词：心钠素大肠杆菌基因扩增
- 人淀粉样前体蛋白基因C端在SH-SY5Y细胞系中的稳定表达及其对细胞生长发育的影响被引量：1
- 1999年
- 淀粉样前体蛋白（ＡＰＰ）是阿尔茨海默氏病（ＡＤ）病因学中重要的分子，但其正常的生理功能尚不清楚．为了研究细胞内过量产生其各种片段对细胞生理机能的影响．将人ＡＰＰ６９５ｃＤＮＡ中编码Ｃ端１０５个氨基酸残基的ＤＮＡ片段重组到真核表达载体ｐＤＯＲｎｅｏ中形成重组质粒ｐＤＯＲ－ｎｅｏ－ＣＴ．然后用脂质体将其转染到人神经母细胞瘤细胞ＳＨ－ＳＹ５Ｙ中．用８００μｇ／ｍｌＧ４１８筛选获得了在ｍＲＮＡ和蛋白质水平均表达相应片段的稳定细胞系．ＭＴＴ和ＬＤＨ分析表明，ＡＰＰＣ端的表达未能对ＳＨ－ＳＹ５Ｙ细胞产生明显的毒性作用．
- 乌永中马康涛张迺蘅
- 关键词：APP基因C端片段SH-SY5Y细胞细胞毒性
- P_4噬菌体——一种卫星噬菌体的特性及其DNA的研究被引量：3
- 1989年
- 本实验观察了P4噬菌体在大肠杆菌C117中的增殖过程。该噬菌体在60℃几乎完全被灭活,对紫外线有抗性,对乙醇和EDTA溶液敏感。用电镜和琼脂糖凝胶电泳对其DNA进行分析提示,P4噬菌体中除含一般的双链开环和线性DNA外,在未完全成熟时它的头部衣壳中还有一种复杂的不均一打结DNA,这种特殊构型DNA的发现将为DNA拓扑异构酶Ⅱ的鉴定及酶活力测定奠定基础。
- 钱毅曾桂超张迺蘅韩复生
- 鸡胚骨骼肌组织M-CAT结合因子的初步鉴定被引量：5
- 1999年
- 采用偶联ＣＡＴＴＧＣＴ寡核苷酸的ＤＮＡ亲和层析柱从发育１３ｄ鸡胚骨骼肌核抽提物中分离到两种核蛋白．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明，被ＤＮＡ亲和柱滞留的两种核蛋白分子量分别为３０ｋＤ和３２ｋＤ．凝胶阻滞结合竞争分析显示，纯化的核蛋白可与Ｍ－ＣＡＴ共有序列ＣＡＴＴＣＣＴ特异结合．Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印迹技术确定仅３０ｋＤ分子可直接识别、结合ＣＡＴＴＣＣＴ元件，但３２ｋＤ分子却不能．结果提示，３０ｋＤ分子为依赖ＤＮＡ的Ｍ－ＣＡＴ结合因子。
- 倪菊华党喜同贾弘褆张迺蘅
- 关键词：元件
- 老年性痴呆相关的β-淀粉样蛋白基因的剂量研究被引量：1
- 1990年
- 用编码老年性痴呆脑中老年斑核仁成分β-淀粉样蛋白(β-Amyloiol Protein,β-AP)的cDNA探针测定老年性痴呆及正常老人的该基因剂量,结果显示老年性痴呆患者的β-AP基因剂量较正常人高。
- 易华芳姚岫岚曾桂超张迺蘅
- 关键词：痴呆Β-淀粉样蛋白
