张玉娟 作品数:13 被引量:57 H指数:3 供职机构: 河南农业大学牧医工程学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河南省高校科技创新团队支持计划 河南省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
潜伏感染期猪伪狂犬病病毒基因组甲基化预测及图谱测定 2015年 为研究DNA甲基化在PRV潜伏感染中的作用,本研究首先对PRV全基因组甲基化状态进行预测,再采用亚硫酸氢盐PCR测序的方法检测急性期及潜伏感染期IE180及EP0启动子区及转录起始位点附近区域的甲基化状态。结果显示,急性期及潜伏感染期IE180及EP0启动子区及转录起始位点附近区域均存在散在的甲基化位点,并未发现广泛的甲基化区域,与预测结果一致。结果表明,潜伏感染期间PRV基因组发生甲基化的可能性很小,进而可知DNA甲基化在PRV潜伏感染过程中未起到关键的作用。 郑关民 陈文定 余秋颖 陈陆 张玉娟 杨利 李双双 常洪涛 李永涛 赵军 王川庆关键词:猪伪狂犬病病毒 甲基化 2012-2013年新流行猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及其gE、TK、gD基因序列分析 2012年伊始,猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)在河南省部分地区再次暴发。为探寻其中缘由,对2012年3月至201 3年6月间采集的疑似PR病料接种Vero细胞并经PCR鉴定,分离到4株伪狂犬病病毒(Pseu... 余秋颖 陈陆 常洪涛 陈文定 明星 郑关民 张玉娟 韩莎 王川庆关键词:伪狂犬病病毒 TK GD基因 PRV感染Neuro-2a细胞中部分病毒基因组染色质状态与病毒增殖的相关性研究 伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)也称为Aujeszky’s disease virus(ADV)或suid herpesvirus type1,可引发伪狂犬病(PR)。PRV宿主谱广泛,可感染... 张玉娟关键词:伪狂犬病病毒 GE基因 组蛋白H3 类法尼醇X受体α基因的原核表达及多克隆抗体制备 2015年 根据NCBI上公布的序列设计引物,从Hep G2细胞系中克隆了FXRα的开放阅读框(ORF),构建原核表达载体p ET-28a-FXRα,转化E.coli BL21(DE3),经1.0 mmol·L-1IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测,成功诱导FXRα蛋白;以镍柱亲和层析纯化获得FXRα蛋白,免疫家兔,制备多克隆抗体。Western Blot分析表明:制备的多克隆抗体能够特异识别重组蛋白,为深入研究此受体的功能及新药发现奠定了基础。 李超燕 于琨 朱海华 张玉娟 顾伟祯 郑文明 许君关键词:核受体 原核表达 抗体制备 甲型流感病毒抗原表位融合多肽的原核表达及免疫原性分析 被引量:1 2014年 根据甲型流感病毒多个株系的血凝素蛋白(hemagglutinin,HA)、基质蛋白(matrix,M1)和核蛋白(nucleoprotein,NP)的核苷酸序列的保守序列,筛选、设计并合成串联的DNA片段hmn,体外扩增hmn DNA,将之亚克隆至原核表达载体pET28α(+)中,转化宿主菌大肠杆菌BL21(DE3),0.3mmol/L的IPTG诱导后,HMN以包涵体形式表达。重组蛋白HMN复性后经镍柱亲和层析纯化,纯化后的蛋白可与特异性抗血清发生反应,纯化蛋白皮下注射免疫6~8周龄雌性小鼠,Western-blot检测抗体效价,显微观察小鼠脾脏和胸腺组织结构,流式细胞仪测定T淋巴细胞亚类数量,结果显示与对照组相比,HMN蛋白可明显刺激淋巴细胞增殖。本试验是对通用型流感多疫苗进行的有意义探索。 马倩 张玉娟 史磊 郑文明 许君关键词:甲型流感病毒 抗原表位 原核表达 动物免疫 河南省2014-2015年猪流行性腹泻病毒流行株遗传进化分析 被引量:7 2017年 为监测和探究河南省猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)流行株变异情况,本试验对15株2014-2015年间河南省PEDV流行株S基因进行克隆及全序列测定,与河南省2011-2013年流行株以及国内、外代表毒株进行同源性及遗传变异分析,并对这些毒株S基因的N-糖基化位点及跨膜螺旋区域进行预测。结果表明:本试验得到的15株毒株之间S基因核苷酸同源性为97.0%~99.8%,氨基酸同源性为97.0%~99.5%;与2011-2013年河南流行株核苷酸同源性为97.1%~99.0%,氨基酸同源性为97.2%~98.8%,与其他地区流行毒株核苷酸同源性为92.2%~99.0%,氨基酸同源性为91.9%~99.0%;与经典毒株相比,S1区域N端存在15bp的插入和6bp的缺失,核苷酸同源性为91.7%~93.6%,氨基酸同源性为92.0%~93.6%。系统发育建树结果显示目前的流行毒株与经典毒株处于不同的2个群,流行毒株分处不同亚群。对N-糖基化位点及跨膜螺旋区域的预测得知2014-2015年河南省PEDV与经典株相比出现变异,与2010年暴发时相比存在部分突变,毒株之间存在部分差异,研制出有效的针对流行毒的疫苗依然是目前防控该病的重中之重。 韩莎莎 张玉娟 时庆贺 石昂 杨利 常洪涛 赵军 王川庆 陈陆关键词:猪流行性腹泻病毒 基因变异 猪IFITM基因分析及过量表达细胞系构建 干扰素(Inferons,IFN)是调节细胞生长、分化、免疫反应、抗肿瘤及抗病毒等多种重要生理功能的细胞因子,通过IFN诱导干扰素刺激基因编码的蛋白家族(ISGs)组成的信号网络完成其信号传导过程。干扰素诱导的跨膜蛋白I... 张玉娟关键词:干扰素诱导 跨膜蛋白 乙脑病毒 文献传递 绿茶儿茶素抗乙型肝炎病毒的分子机制研究 被引量:5 2012年 目的验证不同儿茶素单体对HBV的抑制作用,并初步研究对其抗乙型肝炎病毒的分子机制。方法采用稳定表达乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)表面抗原和E抗原的HepG2.2.15细胞系,不同浓度的儿茶素作用于细胞后,ELISA分析HBsAg和HBeAg的表达;以影响HBV转录的几个关键肝富集转录因子(liver-enriched transcription factors,LETFs)为对象,RT-PCR分析转录水平上,不同浓度的表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对HepG2.2.15细胞的关键LETFs的表达影响。结果几种儿茶素单体中,EGCG的抗HBV效果最明显;EGCG可明显下调视黄醇X受体α(retinoid X receptorα,RXRα)和胆汁酸受体(farnesoid X receptorα,FXRα)的表达。结论EGCG的抗HBV作用的分子机制可能与其下调HBV转录的关键肝富集转录因子RXRα和FXRα有关。 许君 高振兴 马倩 张玉娟 史磊 郑文明关键词:EGCG HBV HEPG2.2.15 急性感染期猪伪狂犬病病毒部分基因组染色质状态 被引量:2 2017年 为探究急性感染期猪伪狂犬病病毒(PRV)在宿主细胞内基因组染色质的状态,首先建立PRV实时荧光定量PCR(qPCR)方法并测定0.1 MOI PRV感染Neuro-2a细胞后病毒基因组的复制动态,然后收集PRV感染Neuro-2a细胞的样品进行染色质免疫共沉淀试验(CHIP),并通过qPCR测定病毒部分DNA与组蛋白H3结合形成的染色质状态。结果显示,PRV急性感染Neuro-2a细胞后,部分基因组以染色质结构存在,并与病毒复制有一定相关性。本研究成功建立用于研究PRV基因组染色质状态的CHIP试验方法,为PRV急性感染期表观遗传学研究提供依据。 张玉娟 韩莎莎 时庆贺 石昂 杨利 常洪涛 赵军 王川庆 陈陆关键词:猪伪狂犬病病毒 急性感染 抗甲型流感病毒新型通用表位疫苗及其制备方法 本发明公开了一种抗甲型流感病毒新型通用表位疫苗的制备方法,采用生物信息学方法,结合网络服务器和相关软件对流感保护抗原相关的NP、M1和HA功能表位进行了预测,获得来自H1N1、H3N1、H3N2、H5N1、H5N2亚型C... 许君 马倩 张玉娟 高振兴 郑文明文献传递