张景山
- 作品数：14 被引量：116H指数：6
- 供职机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 山东省沂源县无形体病实验室调查分析被引量：37
- 2009年
- 目的通过山东省沂源县人粒细胞无形体及其他立克次体病疫源地小样本试点调查,为全面深入开展立克次体病调查提供数据支持。方法对2004、2005、2006年该地区调查收集的26例可疑患者标本进行血清IgG抗体及PCR回顾性检测分析。2007年7月进一步现场流行病学调查,采集当地48名正常人、10只山羊及8只家狗的血标本以及170只蜱标本进行血清学及分子生物学检测分析。结果26例发热患者中,8例明确诊断为人粒细胞无形体感染,6例为可疑病例。当地正常人群人粒细胞无形体IgG抗体阳性率为26.7%,人单核细胞埃立克体IgG抗体阳性率为1.8%。检测的10份家养黑山羊血清标本9份阳性。8份家狗标本中,人粒细胞无形体抗体7份阳性,而人单核细胞埃立克体血清抗体全部阳性。来自发热患者、山羊及媒介蜱标本PCR扩增16S rRNA及部分序列分析结果显示高度同源性(100%)。结论沂源县农业人群普遍存在人粒细胞无形体、人单核细胞埃立克体及其他立克次体隐性感染状况。当地主要优势蜱种为长角血蜱及嗜群血蜱,两者可能是人粒细胞无形体的重要传播媒介。黑山羊可能是人粒细胞无形体的重要动物宿主,而家狗可能是人粒细胞无形体及人单核细胞埃立克体两者兼顾的重要动物宿主。
- 张丽娟崔峰王玲张玲张景山杨淑霞寒江
- 关键词：人粒细胞无形体立克次体
- 53例诺卡菌感染病例临床特征分析被引量：20
- 2015年
- 目的探讨诺卡菌感染的临床表现、实验室检查、影像学特点及诊断、治疗、预后。方法检索1998-2013年国内医学数据库所报道的53例诺卡菌感染病例的相关文献并对其进行回顾性分析。以既往患病的诺卡菌病例为研究组,既往体健的诺卡菌病例为对照组,对比分析两组的临床表现,影像学特征及治疗转归情况。结果 53例诺卡菌病例中,31例存在基础疾病。研究组与对照组临床表现除凹陷性水肿差异有统计学意义(χ2=4.442,P<0.05),其他无统计学意义。药敏试验结果提示菌株对复方磺胺甲恶唑-甲氧苄啶(TMP-SMX)、阿米卡星、米诺环素等敏感。两组病例间死亡率的比较差异有统计学意义(χ2=4.576,P<0.05)。结论诺卡菌感染部位多见于肺,其临床特点无明显异质性,预后存在明显异质性,复方磺胺甲恶唑仍然是治疗诺卡菌感染的首选药物,临床上对于可疑病例应及早进行相关病原学检查。
- 谢祎侯雪新徐帅张景山刘爱忠李振军
- 关键词：诺卡菌病例报告病例分析
- TaqMan MGB探针实时荧光定量-聚合酶链反应检测人粒细胞无形体Msp2基因方法的建立被引量：4
- 2012年
- 目的建立敏感、特异、实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative,FQ-PCR)方法,用于人粒细胞无形体病的检测。方法根据无形体特异外膜蛋白Msp2基因为靶基因设计引物以及TaqMan MGB探针,建立FQ-PCR方法,并对湖北省随州和河北省张家口地区的蜱标本进行了检测。结果本研究建立的TaqMan MGB探针具有良好的特异性,建立的FQ-PCR标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0.99),灵敏性评估发现每个20μl PCR反应管中只要有35个拷贝的目的基因即可被检测到,即最低检出浓度为2拷贝/μl,并且具有较好的重复性。共检测蜱标本426只,其中豪猪血蜱253只,共49组,阳性7份。结论本研究建立的FQ-PCR方法具有很高的特异性和敏感性,可用于人粒细胞无形体感染的快速检测。进一步证实了豪猪血蜱可能是粒细胞无形体的媒介宿主。
- 付秀萍王景泉贺金荣张景山
- 关键词：人粒细胞无形体REAL-TIMEPCR
- 基于基因组序列的副溶血弧菌两种分型方法比较研究
- 2021年
- 目的比较基于全基因组测序(WGS)SNP的分型方案和多位点串联重复序列分析(MLVA)分型方案用于我国副溶血弧菌分子分型的能力,并分析两种方法的优缺点及适用情况。方法选取我国分离的56株副溶血弧菌,使用6个数目可变串联重复序列(VNTR)位点的MLVA方案和基于全基因组序列SNP的方案对这些菌株进行分子分型分析,通过量化指标评价这两种方法对我国分离的副溶血弧菌的分型能力。结果56株副溶血弧菌经MLVA分型,获得31种MLVA型,D值为0.949。对56株副溶血弧菌进行全基因组测序,获得33个差异明显的基因型,D值为0.967。两种分型方法对菌株的分辨能力十分接近,分型结果高度一致。结论6位点的MLVA分型方案与基于全基因组测序SNP的分型方案具有相似的分型能力,其分型能力稍弱。
- 张景山赵文轩陈美玲杜小莉赵林王紫鉴肖文静张巍巍赵宏群李杰刁保卫阚飙逄波
- 关键词：副溶血弧菌数目可变串联重复序列单核苷酸多态性全基因组测序分型方法
- 首次实验室证实北京平谷地区恙虫病东方体暴发流行被引量：16
- 2011年
- 目的了解北京市平谷地区是否存在恙虫病东方体感染。方法采用巢式聚合酶链反应(nPCR),对平谷地区采集的30份临床标本进行恙虫病东方体热休克蛋白(groEL)基因和56×103蛋白扩增并测序分析。采用间接免疫荧光试验(IFA)对血清标本恙虫病东方体特异抗体检测。结果采用PCR共检测血液标本30份,均阳性(100%);用IFA检测28份患者血清抗体,25份阳性(89.3%);长片段PCR扩增,3份标本扩增阳性,阳性结果测序比对所有核苷酸序列相同,与Kawasaki的同源性为96%。结论首次从分子流行病学和血清流行病学的角度证实北京平谷地区存在恙虫病东方体。
- 付秀萍刘玉英张宝华王景泉张景山贺金荣张守印
- 关键词：恙虫病巢式聚合酶链反应间接免疫荧光试验
- 褐黄血蜱与铃头血蜱的分子生物学鉴定被引量：6
- 2012年
- 目的建立2种形态学特征非常相近的褐黄血蜱及铃头血蜱的分子生物学鉴定方法,探讨它们的系统发生关系。方法在湖北省从动物体表采集寄生蜱,形态学鉴定完毕后,采用PCR方法从2种血蜱基因组中扩增12SrDNA、16SrDNA及线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因,测序后进行同源性分析,用PAUP4.0软件分别构建系统发生树并进行系统进化分析。结果 2种血蜱12SrDNA、16SrDNA及COⅠ基因之间的同源性分别为90.8%、90.4%和86.8%,湖北省采集的褐黄血蜱3个基因片段与已知褐黄血蜱的同源性分别为100%、99.5%和99.7%。用这2种蜱的12SrDNA、16SrDNA及COⅠ基因的核苷酸序列分别构建系统发生树,湖北省采集的褐黄血蜱与已知的褐黄血蜱聚在一起,褐黄血蜱及铃头血蜱均形成独立的分支,但用3个基因构建的系统发生树中血蜱属不同种间的亲缘关系不同。结论对于形态学特征相近蜱种的鉴定,在传统形态学分类的基础上结合分子生物学鉴定方法能更准确地鉴定蜱的种类,也能更好地了解其进化关系,为蜱传播疾病的预防控制提供依据。
- 高东亚田俊华覃新程王剑波康雁君张景山周敦金张居农张永振
- 关键词：系统发生分析
- 广东连平县存在新的蜱传斑点热立克次体被引量：10
- 2006年
- 目的对采自广东省连平县的3种硬蜱进行蜱传斑点热立克次体检测分析。方法斑点热立克次体的ompA基因片段扩增并测定扩增片段的DNA序列。结果20只蜱分为17组,其中15组PCR检测阳性。对4个测序成功的标本进行聚类分析,证实其中3个序列单独聚为一类,与引起Flinders岛蜱传斑点热的弗诺立克次体(R.honei)、非洲蜱咬热的非洲立克次体(R.africa)、未定名斑点热的斯洛伐克立克次体(R.slovaca)以及西伯利亚立克次体BJ-90株等亲缘关系较近,另一序列与我国长白山地区检测到的JL-02具有较高的同源性。结论本研究提示该地区除了已证实的西伯利亚斑点热外,还存在新的蜱传斑点热。
- 张丽娟张景山付秀萍孪明春
- 关键词：斑点热群立克次体
- 4种病原菌特异基因片段阳性蜱的16SrRNA基因克隆文库分析
- 2009年
- 目的建立16SrRNA基因克隆文库分析蜱媒菌群的方法，观察该方法对蜱寄生病原菌的检测效率以及对细菌群落多样性分析和对病原菌的筛检能力。方法用伯氏疏螺旋体、汉赛巴通体、嗜吞噬细胞无形体和查菲埃立克体4种病原菌特异基因设计引物，扩增蜱标本提取的核酸，以上述4种病原菌特异基因片段扩增均阳性的蜱核酸提取物做模板，用16SrRNA基因的通用引物进行PCR扩增、纯化、连接、克隆和测序，建立16SrRNA基因克隆文库，将测序结果与数据库进行比对，计算克隆文库Coverage值和Shannon—Wiener多样性指数。结果测出103个有效序列，检出16种已知种属的细菌，其中8个是优势类型（克隆子数〉5个）；检测到伯氏疏螺旋体、汉赛巴通体和立克次体3种病原菌，但这3种病原菌均不是优势类型（克隆子数均〈5个）。Coverage值为96．11％，Shannon—Wiener多样性指数为2．40。克隆序列分析结果表明，蜱寄生细菌主要为仅、1变形菌纲，占56．25％（9／16）。结论16SrRNA基因序列分析可以对蜱标本进行菌群相对定量研究，可以同时检出多种病原菌．是一种较好的细菌菌群多样性分析和病原菌筛检方法。
- 张守印孙继民贺金荣付秀萍张景山张建华蔡虹马凤琴海荣俞东征
- 关键词：RRNA基因多样性
- 高通量半自动化细菌全基因组序列测定体系的构建
- 2020年
- 目的建立高通量、半自动化细菌全基因组序列测定体系,满足基于基因组序列的细菌性病原体监测的需求。方法使用自动化液体处理器、可丢弃性机械手枪头、96孔板型核酸提取试剂盒、自动测序文库构建系统以及测序仪,实现细菌基因组序列测定的半自动化。结果机械手枪头与加样孔底的距离、液体混合速度和每次混匀液体的体积比3个因素与样品之间的交叉污染密切相关,机械手枪头与加样孔底的距离为2 mm、液体混合速度为全速的15%、每次混匀液体的体积比为50%时污染率为0。与手工方法相比,高通量半自动化细菌全基因组序列测定体系的工作效率提高了4倍。结论建立的高通量、半自动化细菌基因组序列测定体系,能够满足基于基因组序列的细菌性病原体监测的需求。
- 张景山龙政王紫鉴肖文静王群赵宏群
- 关键词：交叉污染全基因组序列测定
- TaqMan-rRT-PCR检测猪霍乱沙门菌方法的建立和实验室评价被引量：2
- 2021年
- 目的基于猪霍乱沙门菌血清型特异性基因,建立TaqMan逆转录实时聚合酶链反应(TaqMan-rRT-PCR)检测猪霍乱沙门菌的方法。方法利用基因组序列比对筛选到猪霍乱沙门菌特有的基因SC0358,通过普通PCR及利用多种血清型沙门菌及非沙门菌菌株共计145株,评价该方法的菌株特异性,针对该基因设计TaqMan-rRT-PCR检测方法的引物,优化反应条件,建立针对该靶基因的TaqMan-rRT-PCR检测方法,以纯菌及血液模拟标本RNA为模板进行敏感性检测。结果利用该方法检测26株猪霍乱沙门菌均为阳性,其余菌株扩增均阴性,对纯菌RNA检测中,TaqMan-rRT-PCR的最低检测限度为5 fg/反应,约为10个拷贝/反应。对全血液模拟样品分析中,敏感性达25 cfu/mL。结论以猪霍乱沙门菌保守、特异基因SC0358建立的TaqMan-rRT-PCR方法,能够简便快捷区分猪霍乱沙门菌与其他血清型沙门菌,尤其能够区分与其有抗原式相同的丙型副伤寒沙门菌,此方法为猪霍乱沙门菌感染的快速诊断提供了简便的手段,可用于对猪霍乱沙门菌的早期诊断。
- 张景山李旭闫梅英阚飙樊粉霞
- 关键词：猪霍乱沙门菌TAQMAN
