张建林
- 作品数：15 被引量：155H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96（H5N1）分离株全基因克隆及序列分析
- 1997年5月香港地区有18人感染H5亚型流感病毒，其中6人死亡，从患者和死者体内分离到了类似禽流感病毒的流感病毒，引起世人震惊。早此一年，本研究室从我国内地与香港毗邻的广东省发病鹅体分离到一株高致病力病毒A/Guang...
- 张建林
- 文献传递
- 禽流感病毒分离株A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)全基因克隆及序列分析被引量：48
- 2000年
- 本研究用无特定病原体 (SPF)鸡胚增殖禽流感病毒鹅体分离株A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1) (GD1/96 ) ,提取病毒基因组总RNA ,运用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)技术分别扩增该病毒分离株的 8个基因片段的cDNA ,分别克隆后进行序列测定。序列分析结果表明 ,所扩增到的 8个片段均包含相应的病毒基因的完整开放阅读框架。GD1/96株与 1997年香港禽流感事件中的 4株香港流感病毒分离株 (分别来自人、鸡、鸭和鹅 )的HA基因的高度同源性说明它们可能起源于同一种系 ,但NS基因的差异说明它们分属于不同的基因群系。GD1/96株与香港流感病毒分离株的核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性较低 ( 6 3.9%～ 98.1%) ,而香港流感病毒分离株之间的核苷酸和氨基酸序列的同源性很高 ( 96 .5 %～ 10 0 %) ,且香港各流感病毒分离株的NA均缺失 5 7个核苷酸 ( 19个氨基酸 )残基。因此 ,内地H5N1分离株GD1/96与
- 张建林于康震陈化兰唐秀英田国斌
- 关键词：分离株
- 禽流感病毒血凝素基因重组鸡痘病毒的免疫保护性
- 以脂质体转染技术构建了表达禽流感病毒血凝素基因重组鸡痘病毒rFPV-—HA,该病毒在鸡胚成纤维细胞内能稳定产生子代病毒,经翅皮下5×105PFU/羽免疫8周龄SPF鸡,免疫后第3周用100EID的HA基因同源AIV A/...
- 马文军陈化兰于康震张建林田国彬唐秀英
- 文献传递
- 表达禽流感病毒核蛋白基因重组禽痘病毒的构建及其免疫保护性研究被引量：14
- 2003年
- 从含有禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1)核蛋白 (NP)基因的质粒pUCNP中切下NP基因片段 ,将其亚克隆到pSY5 38质粒 ,再将带有痘苗病毒启动子P11的LacZ基因也平端克隆到pSY5 38质粒 ,然后切下同时含有NP及LacZ基因的片段 ,再亚克隆到禽痘病毒载体pSY6 81,从而构建出表达核蛋白基因的重组禽痘病毒转移载体pSY(NP +LacZ)。应用脂质体介导的方法将转移载体转染已感染禽痘病毒S FPV 0 17的鸡胚成纤维细胞 ,在X gal存在的条件下 ,利用蓝白斑筛选、数轮蚀斑纯化以及PCR、Western blot鉴定 ,结果证明 ,获得了能高效表达AIVNP蛋白的重组禽痘病毒rFPV NP。SPF鸡体内的免疫保护试验结果表明 ,它能够诱导机体产生较高水平的NP特异性抗体 ,并对H5N1和H7N1这 2种亚型高致病力禽流感病毒的攻击提供一定的保护。
- 乔传玲于康震姜永萍张建林邓国华孟庆文田国斌唐秀英
- 关键词：禽流感病毒核蛋白基因禽痘病毒基因构建免疫保护性
- 禽流感病毒血凝素基因重组鸡痘病毒的构建及其免疫保护性被引量：4
- 2000年
- 以脂质体转染技术构建了表达禽流感病毒（ＡＩＶ）血凝素（ＨＡ）基因的重组鸡痘病毒ｒＦＰＶ－ＨＡ，该病毒在鸡胚成纤维细胞内能稳定产生子代病毒，经翅皮下 ５ Ｘ１０５ＰＦＵ／羽免疫 ８周龄 ＳＰＦ鸡，免疫后第 ３周用 １００ＥＬＤ５０的 ＨＡ基因同源 ＡＩＶ Ａ／ＡｒｆｉＳｔａｒ／Ｅｎｇ－Ｑ／９８３／７９（Ｈ７Ｎ１）进行人工感染。 １周后用棉拭子于泄殖腔取样，进行病毒分离。免疫后第 ３周及攻毒后第 １、２周对所有动物进行翅静脉采血，检测血凝抑制（ＨＩ）抗体和免疫沉淀（ＡＧＰ）抗体。结果，攻毒前重组病毒免疫组可检测到很低的ＨＩ抗体，检测不到ＡＧＰ抗体，野生型病毒（Ｆ０１７）接种组和空白对照组ＨＩ抗体和ＡＧＰ抗体均为阴性。攻毒后重组病毒免疫组的ＨＩ抗体上升速度明显高于野生型病毒接种组和空白对照组。重组病毒免疫组有６／８的鸡为流感病毒分离阴性，野生型病毒接种组和空白对照组的试验鸡病毒分离全部为阳性。这些结果表明我们所构建的表达Ｈ７亚型ＡＩＶ ＨＡ基因的重组鸡痘病毒可诱导鸡产生有效的免疫保护反应，肠道排毒显著减少。同时也表明，重组禽痘病毒可作为一种预防禽流感候选标记疫苗，藉此可望较好地解决全病毒灭活疫苗成本高和疫苗免疫鸡与自然感染鸡?
- 马文军陈化兰于康震张建林田国彬唐秀英张建林
- 关键词：禽流感病毒血凝素基因重组鸡痘病毒
- 表达H5N1亚型高致病性禽流感病毒HA基因的DNA疫苗可保护SPF鸡抵抗同型病毒的致死性攻击
- 姜永萍陈化兰于康震张建林步志高唐秀英田国斌
- H7亚型禽流感病毒血凝素基因重组鸡痘病毒活载体疫苗免疫原性评估被引量：20
- 2004年
- 本研究以细胞感染＿转染技术构建了一株表达H7亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因的重组鸡痘病毒rFPV＿HA。以5×105PFU的rFPV＿HA经翅下刺种免疫8周龄SPF鸡,免疫后第3周用100CID50的HA基因同源AIVA/ArfiStar/Eng＿Q/983/79(H7N1)进行人工感染,1周后采集泄殖腔棉拭子进行病毒分离。免疫后第三周及攻毒后第1、2周对所有动物进行静脉采血,检测血凝抑制(HI)抗体和免疫沉淀(AGP)抗体。结果,攻毒前部分rFPV＿HA免疫鸡可检测到HI抗体,但检测不到AGP抗体,野生型病毒(F017)接种组和空白对照组HI抗体和AGP抗体均为阴性。攻毒后rFPV＿HA免疫组的HI抗体上升速度明显高于野生型病毒接种组和空白对照组。rFPV＿HA免疫组有6/8的鸡为流感病毒分离阴性,野生型病毒接种组和空白对照组的试验鸡病毒分离全部为阳性。结果表明rFPV＿HA可诱导鸡产生有效的免疫保护反应,阻止或降低消化道病毒排泄。rFPV＿HA的成功构建为研制开发H7亚型禽流感活载体疫苗奠定了良好的基础。
- 马文军陈化兰于康震张建林田国彬唐秀英
- 关键词：禽流感病毒H7亚型血凝素基因重组鸡痘病毒疫苗
- 表达H5N1亚型高致病性禽流感病毒HA基因的DNA疫苗可保护SPF鸡抵抗同型病毒的致死性攻击
- 将高致病力禽流感病毒分离株A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)(GD/1/96)的HA基因cDNA片段克隆于强启动子CMV下游,构建了DNA疫苗质粒pCIHA,对其免疫保护性进行了三批不同层次的动物保...
- 姜永萍陈化兰于康震张建林步志高唐秀英田国斌
- 文献传递
- 禽流感病毒血凝素与核蛋白在重组禽痘病毒中的共表达被引量：11
- 2003年
- 为克服禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)仅诱导机体产生亚型特异性免疫应答的不足,本研究拟将病毒核蛋白(NP)基因与HA基因在重组禽痘病毒中实现共表达。首先构建转移载体,从测序质粒pUCNP中切下目的基因克隆到载体pSY538早晚期启动子LP2EP2的下游,再将含有禽痘病毒早晚期启动子LP2EP2的NP基因片段亚克隆到已有的AIVHA基因重组禽痘病毒转移载体中,即得到同时含有HA和NP两种基因的重组转移载体pSY(HA+NP)。将转移载体脂质体转染已感染禽痘病毒亲本株S-FPV-017的鸡胚成纤维细胞。根据报告基因β-半乳糖苷酶(LacZ)基因的表达,蓝白斑法筛选重组病毒,经数轮蚀斑纯化,PCR鉴定及West-ern-blot分析,结果表明所获得的重组病毒能高效表达AIVHA及NP两种蛋白。此研究为进一步研制更为有效的禽流感基因工程活病毒载体疫苗奠定了基础。
- 乔传玲张建林贾永清邓国华姜永萍王秀荣孟庆文于康震
- 关键词：禽流感病毒血凝素基因核蛋白基因重组禽痘病毒基因共表达
- 禽流感病毒血凝素基因重组鸡痘病毒的免疫保护性
- 马文军陈化兰于康震张建林田国彬唐秀英
