张宗德
- 作品数：367 被引量：1,014H指数：15
- 供职机构：首都医科大学附属北京胸科医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- RASSF1A基因甲基化与非小细胞肺癌预后的相关性研究被引量：9
- 2010年
- 背景与目的研究发现在很多肿瘤中均存在RASSF1A基因启动子区域高甲基化状态导致基因表达失活的现象,本研究就RASSF1A基因启动子的甲基化状态与非小细胞肺癌预后的关系进行探讨。方法采用甲基化特异的PCR检测150例非小细胞肺癌和20例肺部良性病变RASSF1A启动子甲基化状态。结果150例非小细胞肺癌中58例发现RASSF1A启动子存在甲基化(58/158,38.7%),20例肺部良性病变中无一例发现RASSF1A启动子甲基化。存在RASSF1A启动子高甲基化的病例预后较未发现RASSF1A甲基化的病例差(P=0.004),Cox回归分析显示RASSF1A启动子的甲基化状态是非小细胞肺癌术后的一个预后相关因素(RR=1.584,95%CI:1.040-2.411,P=0.032)。结论MSP法检测RASSF1A启动子甲基化状态可以作为非小细胞肺癌术后的一个预后评价指标。
- 张卉张树才张宗德贾红彦古淑香赵丹
- 关键词：肺肿瘤甲基化预后
- 结核分枝杆菌北京基因型菌株rpoB基因突变特征研究被引量：1
- 2010年
- 目的分析结核分枝杆菌临床分离株北京基因型的rpoB基因突变特点。方法同时采用IS6110-限制性片段长度多态性（1S6110-RFLP），间隔区寡核苷酸分型（Spoligotyping）方法对102株结核分枝杆菌临床分离株进行基因分型，确定北京基因型。采用反相斑点杂交方法检测rpoB基因突变。结果735％（75／102）的临床分离株是北京基因型，62株（60．8％，62／102）利福平耐药株中有52株（83．9％，52／62）为北京基因型，10株为非北京基因型：40株利福平敏感株中北京基因型23株，非北京基因型17株。47株北京基因型和7株非北京基因型存在rpoB基因突变，最普遍的点突变发生在526位点。结论尽管北京基因型与非北京基因型在rpoB基因突变特征上无显著性差别，但北京基因型菌株利福平耐药率和rpoB基因突变率显著高于非北京基因型菌株；以PCR为基础的反相斑点杂交方法具有较高的敏感度和特异度，适用于大批量结核分枝杆菌利福平耐药性的初筛。
- 刘洋郭艳玲姜广路邢爱英李传友张宗德傅瑜
- 关键词：分枝杆菌结核北京基因型RPOB基因
- 微小RNA在感染性疾病及结核病中的研究进展被引量：3
- 2014年
- 微小RNA（miRNA）属于非编码RNA大家族，是内源性含22个寡核苷酸的小分子RNA序列，从病毒、线虫、植物到动物体内都存在miRNA，并在细胞生长、分化、凋亡、代谢及病毒感染、肿瘤发生等生理、病理过程中发挥至关重要的作用。目前发现，循环miRNA异常表达出现在肿瘤、肝炎、糖尿病和心肌梗死等患者中。循环miRNA或可作为肿瘤无创诊断的新靶标，然而，miRNA在细菌感染性疾病，尤其是结核病发生、发展中的作用尚不明确。
- 刘菲张宗德
- 关键词：细菌感染性疾病结核病微小RNA非编码RNA肿瘤发生RNA序列
- 超声引导下单点和两点胸椎旁神经阻滞对胸腔镜手术患者血流动力学和应激反应的影响
- 2019年
- 目的比较单点和两点椎旁神经阻滞对胸腔镜手术患者血流动力学和应激反应的影响。方法选择拟在本院行胸腔镜下肺癌切除患者60例,男26例,女34例,年龄55~75岁,BMI 18~25 kg/m^2,ASA Ⅰ—Ⅲ级。随机分为单点椎旁注射组(S组)、两点椎旁注射组(D组)和对照组(C组),每组20例。S组患者超声引导下在T4-5椎旁间隙注射0.75%罗哌卡因15 ml和2%利多卡因5 ml混合溶液,D组患者分别在T3-4和T5-6椎旁间隙注射0.75%罗哌卡因7.5 ml和2%利多卡因2.5 ml混合溶液,C组患者不予穿刺给药。记录三组患者术中麻醉诱导前(T0)、单肺通气1h(T1)、单肺通气结束时(T2)、术毕(T3)、术后1 h(T4)、4 h(T5)和24 h(T6)的HR和MAP;釆集三组患者T0、T1、T2和T3时梯动脉血,检测血液中血糖(Glu)、皮质醇(Cor)和8-异前列腺素F2a(8-iso-PGF2a,8-iso)浓度;随访记录术后1、4、24和48 h静息和咳嗽时VAS评分;记录穿刺部位血肿、气胸、感染等阻滞相关并发症发生情况;记录术后48h内恶心呕吐、头晕、低血压、皮肤瘙痒等镇痛不良反应发生情况。结果三组不同时点HR和MAP差异无统计学意义。与C组比较£和T3时D组Glu明显降低(P<0.05),T,时D组8-iso明显降低(P<0.05),术后1、4、24、48 h S组和D组静息和咳嗽时VAS评分明显降低(P<0.05),S组和D组不同时点静息和咳嗽时VAS评分差异无统计学意义。三组无一例发生穿刺部位血肿、气胸、感染等阻滞相关并发症。三组术后48 h内恶心呕吐、头晕、低血压发生率差异无统计学意义,无一例皮肤瘙痒发生。结论超声引导下两点胸椎旁神经阻滞较单点胸椎旁神经阻滞更能阻断胸腔镜手术中外周伤害性刺激向中枢的传导,减少应激类物质的产生,降低应激反应程度。
- 罗太君李坤高广阔刘涛陈坊王春张宗德刘伟
- 关键词：椎旁阻滞血流动力学应激反应
- 对氨基水杨酸（PAS）耐药与结核分枝杆菌thyA基因突变的研究被引量：4
- 2008年
- 目的 检测结核分枝杆菌临床分离株对氨基水杨酸（PAS）耐药和胸苷酸合成酶基因（thyA）突变的关系，以探讨结核分枝杆菌PAS耐药的分子机制。方法95株结核分枝杆菌临床分离株中的51株PAS敏感株和44株PAS耐药株的PAS耐药相关基因thyA基因进行PCR扩增，扩增产物纯化后进行序列测定，与结核分枝杆菌标准株H37Rv的野生型岫，A基因序列进行对比，判断这些临床分离株的thyA基因有无突变。结果51株PAS敏感株thyA基因未检出突变。44株PAS耐药株中有16个临床分离株的thyA基因检测到突变，突变检出率为36．4％（16／44）。突变类型包括置换、颠换、插入、缺失，均为单碱基改变或单碱基缺失，其中2株为thyA基因2个位点联合突变。结论结核分枝杆菌tyA基因突变是其产生PAS耐药的重要原因之一。结核分枝杆菌胸苷酸合成酶是PAS作用的重要靶位。
- 张宗德赵雁林李自慧贾红艳刘宇红陈曦刘忠泉杜博平古淑香邢爱英马玙
- 关键词：胸苷酸合成酶抗药性
- 结核分枝杆菌休眠菌复苏初期与活跃期的差异表达基因分析被引量：4
- 2008年
- 目的 寻找休眠结核分枝杆菌复苏的关键基因，探讨结核分枝杆菌复苏的机制。方法 取7H9培养20天的H37Rv作为对数生长期的活跃结核分枝杆菌，并提取RNA。取一部份对数生长期的H37Rv加入亚甲兰作为无氧标志，37℃密封培养，无氧状态下生长的H37Rv会随着培养基中的氧气耗尽而进入休眠状态，继续无氧培养1个月的陈旧菌即为休眠菌，取休眠菌，加入适量5个复苏因子蛋白质组合，37℃有氧培养三天，提取RNA。用mRNA纯化试剂盒纯化RNA。利用抑制性消减杂交（SSH）技术分析复苏因子蛋白刺激三天的休眠结核分枝杆菌和对数生长期结核分枝杆菌的基因组mRNA的表达差异。并通过基因克隆技术、基因测序和序列分析，寻找差异表达基因。结果我们通过SSH杂交，以活跃结核分枝杆菌cDNA为Tester的正相杂交和以复苏因子蛋白刺激三天的休眠结核分枝杆菌cDNA为Tester的反相杂交的各自Tester高表达或特异性表达的片段都得到了选择性扩增，杂交产物经连接pTA2载体、转化DH5α、蓝白斑筛选，正相获得78个阳性菌落，反相获得46个阳隆菌落。阳性单个菌落经液体LB培养基培养，以菌液为模板，T7、M13为引物，扩增插入片段，能扩增到明显的带，且带大于350pb的为阳性。则正相得到66个阳性扩增带，反相得到39个阳性扩增带。这105个阳性扩增带的菌液经测序分析，将序列完全相同的特异性序列筛选合并，正相获得41个不同的特异性序列，反相获得32个不同的特异性序列。再去掉因消减杂交不完全而使正、反相中都获得的相同序列，则正相有30个特异性序列，反相有21个特异性序列。51个序列通过Genbank检索，因有不同序列检索得到对应同一基因的情况，因此，正相30个特异性序列经检索后对应22个不同的基因，反相21个特异性序列经检索后对应9个不同的基因。在我们的�
- 刘忠泉张宗德邢爱英陈曦李自慧古淑香贾红艳杜博平马玙
- 关键词：抑制性消减杂交基因表达
- 细胞色素P450基因多态性与肺癌易感性的相关性分析
- 2008年
- 目的 探讨代谢活化酶细胞色素P4501A1（CYP1A1）、2D6（CYP2D6）、2E1（CYP2E1）和代谢解毒酶谷胱甘肽硫转移酶（GSTM1）与肺癌易感性的关系。方法采用PCR、PCR—RFLP技术检测原发性肺癌组（279例）及对照组（684例）的CYPlAI、CYP2D6、CYP2E1、GSTM1代谢酶基因型，对不同基因型在两组分布频率的差异进行OR值的统计分析。结果CYPlAl突变等位基因（m）、GSTMl功能缺失型（-）分别可使患肺癌的危险性增加1．64（OR=1．64，95％CI为1．21—2．22，P=0．001）和1．58倍（oR=1．58，95％CI为1，19—2．11，P=0．002）。其中CYPlAl与肺鳞癌、小细胞癌，GSTMl与肺鳞癌及肺腺癌明显相关（均P〈0．05）。同时携带GSTMI（-）和CYPlAl（m）可使患肺癌的危险性明显增加（OR=2．75，95％CI为1．73～4．39，P=O．OOO）。在重度吸烟人群携带GSTMl（-）、CYPlAl（m）、CYP2D6（W）或CYP2ElA基因型均可使患肺癌的危险性显著增加5．71—11．67倍（辟O．000）。结论携带GSTMI（-）及CYPlAl（m）等位基因型者患肺癌的危险性上升，二者有协同作用。在重度吸烟人群，CYP及GSTMl的检测有利于发现肺癌的高危人群。
- 顾艳斐张宗德张树才郑素华贾红彦古淑香
- 关键词：肺肿瘤细胞色素P-450
- 肺结核患者环腺苷酸反应元件结合蛋白与γ-干扰素基因启动子区的关系
- 2010年
- 目的 研究活动性肺结核患者环腺苷酸反应元件结合蛋白（CREB）与γ-干扰素基因近端启动子的关系.方法 2007年1-12月北京胸科医院结核科收治的25例肺结核患者（肺结核组）和18例PPD阳性健康人（对照组）为研究对象.分离外周血中CD3＋细胞,采用凝胶电泳迁移率变化（EMSA）和竞争性EMSA分析CREB及γ-干扰素基因近端启动子结合情况,染色质免疫共沉淀（ChIP）技术研究MTB抗原在体内状态下能否诱导CREB产生并与γ-干扰素基因近端启动子结合.Western blot法检测CREB表达水平及MTB抗原诱导CREB磷酸化.结果 肺结核组25例中有18例缺失低迁移率条带,说明其缺少与γ-干扰素基因近端启动子结合的蛋白,竞争性EMSA试验结果证实该蛋白复合体中含CREB;对照组中10例有204 bp的PCR产物,肺结核组中有12例缺失该产物,提示其缺少与γ-干扰素基因近端启动子结合的CREB;肺结核组有20例未见CREB表达,且所有病例CD3＋T细胞在MTB抗原刺激时不能诱导磷酸化CREB蛋白的产生.结论 CREB蛋白可与γ-干扰素基因近端启动子区结合,肺结核患者缺少与γ-干扰素基因近端启动子结合的CREB蛋白.
- 刘洋张继增王甦民傅瑜张宗德
- 关键词：结核CAMP反应元件结合蛋白质
- 肺结核患者氧化／抗氧化失衡的初步研究被引量：3
- 2008年
- 目的 探讨肺结核患者氧化航氧化失衡的特点及相关影响因素，观察肺结核患者抗氧化治疗的疗效和意义。方法用分光光度法对20例正常对照者和120例肺结核患者血清的超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）、丙二醛（MDA）进行检测，同时对20例肺结核患者经N-乙酰半胱氨酸（NAC）治疗前后的SOD、GPX、MDA进行测定和观察。结果①与正常对照组相比，肺结核患者血清SOD、GPX活性降低，MDA含量增加（P〈0．01）。②伴有空洞、纤维化和／或毁损肺的肺结核患者以及血沉增快的患者SOD、GPX进一步降低（P〈0．01），但MDA无显著性变化。③合并肺气肿、肺心病患者的SOD、GPX、MDA与无合并症的患者相接近（P〉0．05）。④在应用N-乙酰半胱氨酸后，患者的SOD、GPX增高（P〈0．05），但MDA无显著性变化。结论肺结核患者存在着氧化／抗氧化失衡；肺结核病变的影像学特点及结核的活动性与肺结核患者氧化／抗氧化失衡的进一步加重有关；联合应用NAC对肺结核患者进行抗氧化治疗可提高肺结核患者的抗氧化能力。
- 梁清涛李琦张宗德操敏马玙
- 关键词：N-乙酰半胱氨酸
- Lab meeting在医学科研型研究生培养和教学过程中的实践及思考被引量：9
- 2015年
- 医学科研型研究生的培养是医学科学发展的基础,是我国高等医学教育的重要组成部分。只有不断提高研究生的科研素质、科研能力才能促进我国医疗卫生事业的持续、健康的发展。实验室学术例会(Lab meeting)是实验室内汇报、交流和探讨科学问题的平台。Lab meeting可以促进研究生和导师,研究生之间的探讨和交流,有利于培养科研兴趣,开拓科研视野,提高科研技能和科研素质。在医学研究生培养阶段,利用好Lab meeting这个平台具有十分积极的意义。
- 刘洋张宗德
- 关键词：研究生教育
