孟娜
- 作品数：9 被引量：18H指数：3
- 供职机构：首都医科大学附属北京同仁医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金卫生部卫生公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 两性霉素B对人鼻腔上皮细胞纤毛摆动频率的影响
- 目的 近年来,随着抗菌药物及免疫抑制疗法越来越多地应用于临床,真菌性鼻-鼻窦炎的发病率也随之增加.两性霉素B作为多烯类抗真菌药物的代表药物,是目前用于治疗真菌性慢性鼻-鼻窦炎的首选抗真菌药物.在鼻腔局部用药时除关注药物疗...
- 孟娜矫健张罗
- 细胞培养中珍贵贴壁细胞污染挽救方法的评价被引量：4
- 2011年
- 目的细菌污染在细胞培养工作中在所难免,特别是珍稀细胞系受到细菌污染,污染后能否逆转,哪种方法可以挽救污染细胞既有效又对细胞生物学特性影响小,是本文探讨的目的。方法 分别采用抗生素除菌法、抗生素联合巨噬细胞吞噬法和裸鼠体内接种除菌法清除人喉鳞状细胞癌细胞系(laryngeal squamous carcinoma-1,LSC-1)的污染细菌,并对除菌效果做无菌检验,对细胞性状做免疫组织化学角蛋白染色和流式细胞仪DNA倍体分析,并与第3代细胞比较。结果 ①在3种敏感抗生素中,32mg/L的头孢哌酮/舒巴坦抗菌效果最好,细胞可传代3次;头孢哌酮/舒巴坦联合巨噬细胞吞噬法处理,细胞可传代5～6次,但抗生素撤离后上述2种方法培养的细胞液中均再次出现细菌,细胞逐渐死亡。裸鼠体内接种法的细胞形态最好,传代8次以上,冻存、复苏后仍能生长繁殖,并可在无抗生素培养基中生长,上清液细菌培养为阴性;②免疫组织化学角蛋白染色,抗生素法和抗生素联合巨噬细胞法所得细胞的角蛋白表达比例较低,而裸鼠体内接种法得到的细胞角蛋白表达较高,与该细胞系第3代比例基本相同;③DNA倍体分析,裸鼠体内接种法的细胞仍保持有二倍体和异倍体核型,与第3代细胞基本相同,而抗生素处理的细胞只保留有二倍体核型。结论 裸鼠体内接种除菌法能彻底清除喉癌细胞系中的污染细菌,并能保持肿瘤细胞的来源特征和增生活性,是细胞系去除污染细菌最为理想的方法。
- 王鸿张伟孟娜
- 关键词：污染
- IL-17对变应性鼻炎小鼠鼻粘膜纤毛及组织学结构的影响
- 目的 变应性鼻炎(AR)是一种由变态反应引起慢性黏膜炎性病变的气道变态反应性疾病,气道黏膜上皮细胞损伤、杯状细胞化生、细胞外基质沉着、黏膜增厚、纤毛上皮细胞减少以及大量嗜酸性粒细胞浸润是其典型的组织病理学变化.Th17细...
- 孟娜矫健张罗
- 人鼻腔纤毛上皮细胞组织块、酶消化浸没及酶消化气液界面培养的比较研究
- 目的 对比研究人鼻腔纤毛上皮细胞外植组织块,低温酶消化浸没及气液界面三种体外培养技术,为深入研究鼻腔粘液纤毛传输系统病理生理机制以及纤毛相关疾病提供体外培养模型.方法 外植组织块法,低温酶消化浸没及气液界面法培养人鼻腔黏...
- 孟娜张罗
- 人鼻腔纤毛上皮细胞的浸没培养被引量：2
- 2014年
- 目的：浸没培养法培养人鼻腔纤毛上皮细胞，为纤毛相关研究及经鼻药物安全性评价等研究提供可靠的细胞学模型。方法：采用低温酶消化法，浸没培养人鼻腔纤毛上皮细胞，倒置相差显微镜观察细胞生长状况，扫描电镜及免疫细胞化学方法观察细胞融合及纤毛分化状态，高速数字化显微视频成像系统检测纤毛摆动频率。结果：①相差显微镜下，纤毛细胞数量逐渐增加，至7～10d达到高峰后逐渐减少，纤毛细胞存活时间维持在14～21d；②细胞培养第7天，扫描电镜可见鼻腔上皮细胞表面覆盖纤毛或微绒毛，杯状细胞及无纤毛柱状上皮细胞相间排列；③细胞培养第7天，Ⅳ型β-微管蛋白、闭合小环蛋白-1免疫荧光结果显示细胞融合及纤毛分化良好，纤毛细胞比例可达20％～30％；④培养第7、14、21天纤毛摆动基础频率分别为（10．73±2．15）Hz、（9．92±1．97）Hz、（10．30±2．11）Hz，无明显统计学差异；⑤外源性刺激剂100μmol／L ATP可明显增加纤毛摆动频率。结论：应用酶消化法浸没培养人鼻腔纤毛上皮细胞，细胞融合及纤毛分化状态良好，纤毛摆动活跃，对外源性刺激反应灵敏，是应用于纤毛相关研究及经鼻药物安全性评价等研究的一个较为理想的细胞模型。
- 矫健孟娜张罗
- 关键词：鼻腔纤毛上皮细胞细胞培养
- 人鼻息肉上皮细胞的气液界面培养被引量：2
- 2014年
- 目的气液界面培养人鼻腔纤毛上皮细胞，为深入研究鼻腔黏液纤毛传输系统提供良好的细胞模型。方法采用低温酶消化法，气液界面培养人鼻腔纤毛上皮细胞，倒置相差显微镜观察细胞生长状况，扫描电镜和免疫细胞化学法观察细胞增殖、融合及分化情况，高速数字显微视频成像系统检测纤毛摆动频率及对外源性刺激剂三磷酸腺苷（adenosinetriphosphate，ATP）的反应性。采用Prism4．0软件进行数据分析。结果光镜下Transwell支持膜上细胞24h贴壁生长良好，浸没培养约1周后，单层细胞融合达80％-90％，细胞间衔接紧密成铺路石状结构，此时建立气液界面培养。气液界面培养7d，扫描电镜可见鼻腔上皮细胞表面覆盖纤毛或微绒毛，纤毛细胞分化良好，成簇状分布，杯状细胞及无纤毛柱状上皮细胞相间排列。气液界面培养14d，IV型β-微管蛋白（p—tubulinIV），闭合小环蛋白-1（Zonaoccludens-1，ZO-1）免疫荧光结果显示细胞融合及纤毛上皮细胞分化良好，纤毛细胞比例可达50％～60％。气液界面培养7、14、21、28、35d，上皮细胞纤毛摆动基础频率分别为（8．42±1．24）、（8．71±1．11）、（9．17±1．11）、（8．89±0．91）、（8．99±0．91）Hz，差异无统计学意义（F=1．451，P〉0．05）。外源性刺激剂100μmol／LATP可明显增加纤毛摆动频率。结论低温酶消化法，气液界面培养模式下可获得分化良好的人鼻腔纤毛上皮细胞，其形态和功能与体内接近，且能较长时间维持其正常形态及功能，可以为深入研究黏液纤毛传输系统提供细胞分化模型。
- 孟娜矫健张罗
- 关键词：细胞培养技术纤毛上皮细胞鼻腔鼻息肉
- 变应性鼻炎患者血清氧化应激状态研究被引量：7
- 2010年
- 目的 检测变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）患者外周血血清中氧化应激标志物,探讨氧化应激反应在AR发病机制中的作用.方法 留取23例健康人、48例AR患者外周血血清,分别检测氧化应激标志物一氧化氮（nitric oxide,NO）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、总一氧化氮合酶（total nitric oxide synthase,TNOS）,脂质过氧化产物丙二醛（malondidehyde,MDA）,以及体内主要抗氧化酶超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）水平.采用SPSS 13.0软件对数据进行分析.结果 AR患者血清NO水平（（x）±s,以下同）为[（97.92±73.42）μmol/L]较健康对照组[（64.04±29.54）μmol/L]明显升高（t=-0.281,P〈0.05）;iNOS与TNOS比值（0.51±0.11）较健康对照组（0.45±0.15）明显升高（t=-2.061,P〈0.05）;血清GSH-Px活性[（258.24±45.25）U/（ml·min）]较健康对照组[（215.11±47.62）U/（ml·min）]明显升高（t=-2.2349,P〈0.05））.而AR患者血清SOD活性、MDA含量较健康对照组分别有升高和降低趋势,但差异无统计学意义（Z=-1.656,t=1.922,P值均〉0.05）.结论 氧化应激反应参与AR病理生理过程,而iNOS-NO通路在AR的发病过程中可能发挥着更为重要的作用.
- 矫健张伟孟娜王鸿张罗
- 关键词：氧化性应激超氧化物歧化酶鼻炎变应性一氧化氮一氧化氮合酶
- L-精氨酸对兔气管上皮细胞纤毛运动的影响被引量：1
- 2009年
- 目的观察一氧化氮(nitric oxide,NO)前体L-精氨酸(L-arginine,L-arg)对兔气管上皮细胞纤毛摆动的影响。方法体外培养兔气管上皮组织块,采用高速数字化显微成像技术对纤毛摆动进行定量分析,观察10mmol/L L-arg及100μmol/L一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(N-nitro-L-arginine methylester,L-NAME)对上皮纤毛摆动的影响。结果①Hanks平衡盐溶液(Hank’s balanced salt solution,HBSS)对照组兔气管上皮细胞纤毛摆动在25min内无明显变化;②10mmol/L L-arg处理组纤毛摆动频率(ciliary beating frequency,CBF)随时间延长逐渐增加,其中加药20min及25min后,CBF与加药前相比差异有统计学意义;③100μmol/L L-NAME预孵育10min后再加入10mmol/L L-arg共同孵育25min,CBF在各个时间点与对照组相比无明显变化;④100μmol/L L-NAME单独作用35min内CBF无明显变化。结论L-arg可促进兔气管上皮细胞纤毛摆动,其作用机制是通过激活NOS产生NO而实现的。
- 矫健王鸿孟娜张罗
- 关键词：一氧化氮合酶纤毛运动气管上皮细胞组织块摆动频率
- 聋病分子遗传学快速诊断技术在临床上的应用被引量：3
- 2011年
- 目的:探索耳聋基因芯片快速诊断技术在聋病分子遗传学诊断中应用的可行性。方法:对110例重度感音神经性聋患者及其亲属,采外周静脉血样并采用"遗传性聋基因芯片检测系统"对4个热点突变基因共9个热点突变位点进行检测。结果:110例受检者中总阳性检出率为50.9%;54例聋病患者中有32例被检出携带致聋基因,检出率为59.3%;样本抽样测序验证符合率为100%。结论:①该"遗传性聋基因芯片检测系统"阳性检出率较高,具有快速、高通量、灵敏、特异性强等特点,适用于临床筛查和辅助诊断,是遗传性聋病因学检测的有效方法;②分子遗传学诊断对聋病的防治意义深远。
- 张伟张伟龚树生黄丽辉刘博赵丽萍
- 关键词：耳聋遗传学诊断基因芯片
