孙承文 作品数:12 被引量:29 H指数:2 供职机构: 江南大学附属医院 更多>> 发文基金: 无锡市科技发展指导性计划项目 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
LNX1通过调控TIAM1/ERK信号通路抑制肾透明细胞癌细胞的增殖、侵袭和迁移 2023年 目的:探讨泛素链接酶LNX1(ligand of numb-protein X 1)对肾透明细胞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其可能的分子作用机制。方法:利用基因表达谱交互分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)数据库分析LNX1 mRNA在肾透明细胞癌组织中的表达水平,及其与肾透明细胞癌患者预后的相关性。采用慢病毒感染的方法将携带特异性针对LNX1基因的shRNA(shLNX1)转入肾透明细胞癌细胞786-O和ACHN中;采用瞬时转染的方法将重组质粒flag-LNX1转入786-O和ACHN细胞中。分别采用CCK-8实验和细胞集落形成实验检测沉默或过表达LNX1对786-O和ACHN细胞增殖能力的影响,Transwell小室实验检测沉默或过表达LNX1对786-O和ACHN细胞侵袭和迁移能力的影响。采用生物信息学分析法筛选LNX1的下游靶基因,采用蛋白质印迹法检测沉默或过表达LNX1对T淋巴瘤侵袭和转移诱导蛋白1(T-lymphoma invasion and metastasis-inducing protein 1,TIAM1)及其下游ERK信号通路中ERK及其磷酸化蛋白表达水平的影响。用蛋白酶体抑制剂MG132处理过表达LNX1的786-O和ACHN细胞,并且蛋白质印迹法检测TIAM1蛋白的表达水平。最后在过表达LNX1的细胞中同时转入重组载体myc-TIAM1,再用蛋白质印迹法、细胞集落形成实验和Transwell小室实验检测ERK信号通路中各蛋白的表达水平,以及同时过表达LNX1和TIAM1对786-O和ACHN细胞的增殖、侵袭和迁移能力的影响。结果:肾透明细胞癌组织中LNX1 mRNA的表达水平降低(P<0.05),其表达水平与患者的生存时间呈正相关(P<0.001)。成功构建沉默LNX1基因的786-O和ACHN细胞,以及过表达LNX1的786-O和ACHN细胞。沉默LNX1基因后,786-O和ACHN细胞的增殖、侵袭和迁移能力明显增强(P均<0.05);过表达LNX1后,786-O和ACHN细胞的增殖、侵袭和迁移能力明显减弱(P均<0.05)。生物信息学分析发现TIAM1为LNX1的潜在靶蛋白。沉默LNX1基因后,TIAM1和磷酸化ERK(phospho-ERK,p 吴玉伟 向从明 孙承文 陈友干 高杰 吴升关键词:肾透明细胞癌 TIAM1 细胞增殖 ERK信号通路 微小RNA-15a-5p靶向蛋白质二硫键异构酶A6前体蛋白抑制前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭 被引量:2 2021年 目的探讨微小RNA-15a-5p(miR-15a-5p)是否可通过靶向蛋白质二硫键异构酶A6前体蛋白(PDIA6)而抑制前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭。方法选取2018年2月至2019年3月江南大学附属医院接受治疗的前列腺癌病人50例,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与蛋白印迹法(Western blotting)分别检测前列腺癌组织、癌旁组织中miR-15a-5p、PDIA6的表达量;体外培养人前列腺癌DU145细胞,将细胞分为miR-NC组、miR-15a-5p组、si-NC组、si-PDIA6组、miR-15a-5p+pcDNA组、miR15a-5p+pcDNA-PDIA6组;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验验证miR-15a-5p、PDIA6的靶向关系。结果与癌旁组织相比,前列腺癌组织中miR-15a-5p的表达水平降低[(1.00±0.17)比(0.68±0.11)],PDIA6 mRNA[(0.99±0.09)比(1.64±0.18)]和蛋白[(0.44±0.07)比(0.76±0.17)]表达水平升高;转染miR-15a-5p mimics或转染si-PDIA6可降低细胞存活率(P<0.05),减少迁移及侵袭细胞数(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-15a-5p可靶向结合PDIA6;PDIA6过表达可降低miR-15a-5p过表达对DU145细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论过表达miR-15a-5p通过降低PDIA6的表达对列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力有抑制作用。 向从明 陈友干 孙承文 张笑 吴国胜关键词:增殖 MSCTVC技术在膀胱癌诊断及分期中的价值 被引量:1 2014年 近些年,国内外对CT仿真膀胱境(CTvirtualcystoscopy,CTVC)的临床应用做了一些研究,本文拟探讨以氧气为对比剂的超高速多层螺旋CT多期增强扫描(multi-slicespiralCT)仿真膀胱镜技术(virturlcystoscopy)(本文简称MSCTVC)对膀胱癌术前诊断及临床分期的价值。 孙承文 向从明 李光 贺峰关键词:术前诊断 膀胱癌 螺旋CT多期增强扫描 CT仿真 多层螺旋CT仿真膀胱镜成像对膀胱癌术前诊断及临床分期的价值 被引量:7 2014年 目的探讨多层螺旋CT仿真膀胱镜(multi-slice spiral CT virtual cystoscopy,MSCTVC)对膀胱癌术前诊断及临床分期的价值。方法 22例经手术病理证实为膀胱癌的患者,术前分别行MSCT双期增强扫描,同时结合仿真内镜图像进行分析及普通纤维膀胱镜检查,比较两种方法的膀胱癌检出率,分析MSCTVC对膀胱癌术前分期的准确性。结果 22例患者共发现病灶25个,MSCT及MSCTVC总体检出率为100%(25/25),高于膀胱镜检查(92%,23/25)。单纯双期增强MSCT分期:T113例、T2a5例、T2b5例、T31例、T41例;结合仿真膀胱镜成像后分期:T113例、T2a4例、T2b5例、T32例、T41例;术后病理分期:pTl13例、pT2a5例、pT2b4例、pT32例、pT41例。MSCT多期增强扫描对膀胱癌术前分期总体准确率为72%(18/25),结合仿真膀胱镜成像对膀胱癌分期总体准确率为88%(22/25)。与术后病理分期相比,MSCTVC对膀胱癌术前分期的一致性(k=0.818)高于MSCT扫描术前分期一致性(k=0.574)。尤其当肿瘤浸润膀胱壁外结构时(≥T3期)时,MSCTVC的术前分期准确率为100%,与术后病理分期完全一致(k=1)。结论 MSCTVC是一种安全、无创、有效的检查方法,在膀胱癌术前诊断及临床分期中具有重要价值。 向从明 孙承文 贺峰关键词:膀胱肿瘤 多层螺旋CT 仿真内镜 基于FFPE组织切片的膀胱癌N-连接糖链原位酶解及分析 被引量:1 2022年 目的研究膀胱癌FFPE组织切片的N-连接糖链,发现膀胱癌FFPE肿瘤组织的异常N-连接糖链修饰情况。方法发展基于FFPE组织切片原位提取N-连接糖链的实验流程。通过PNGase F酶切FFPE组织解释放N-连接糖链。对N-连接糖链自由端进行全甲基化修饰。通过MALDI-TOF/TOF-MS检测N-连接糖链的相对含量。进行数据库匹配,确定N-连接糖链的可能糖型。ROC分析用于预测显著差异N-连接糖链作为预测膀胱癌生物标志物的准确度。结果MALDI-TOF/TOF-MS检测泛甲基化修饰N-连接糖链的数据显示,在16例膀胱癌患者的肿瘤和癌旁组织的3次重复实验中,肿瘤组织中蛋白质高甘露糖型N2H6、N2H7、N2H8、N2H9和复杂型N5H6F1糖链修饰水平显著上升,同时高甘露糖型N2H5、杂合型N3H5以及复杂型N3H4、N4H4、N5H6F1S2糖链修饰水平显著下降。ROC分析显示,双天线型N-连接糖链N3H4(AUC=0.90)和N4H4(AUC=0.91)在单独或者共同区分膀胱癌患者肿瘤组织和癌旁组织中都具有很好的可靠性,可能成为膀胱癌的潜在生物标志物。结论膀胱癌FFPE肿瘤组织中存在蛋白质异常N-糖基化修饰,N-连接糖链N3H4和N4H4或可成为膀胱癌的潜在生物标志物。 程颖 孙承文 秦艳 时帅 李岳阳 樊启高 杨刚龙 高晓冬关键词:膀胱癌 生物标志物 膀胱癌临床血清样本N-连接糖链的表达分析 被引量:1 2017年 膀胱癌是发生在膀胱黏膜上的恶性肿瘤,是最常见的泌尿系统肿瘤之一。国内外研究表明糖链表达的异常改变与肿瘤的发生、发展和转移紧密关联。分析膀胱癌临床样本糖链的表达变化可以为膀胱癌研究提供有效的分析手段,有助于发现潜在的临床早期诊断标志物。首先利用乙酰肼修饰糖链唾液酸,用PNGase F酶将糖蛋白质N-连接糖链释放出来,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)技术对20例膀胱癌血清,11例正常人血清中糖蛋白N-连接糖链进行相对定量分析。共鉴定出42种N-连接糖链结构,其中15种N-连接糖链在两组样本中含量差异明显。此外,通过分析不同类型的糖链在两组临床样本中的分布差异,发现唾液酸化、复合型的N-连接糖链在膀胱癌血清中呈现显著升高的趋势,而高甘露糖型、平分型N-连接糖链表达呈下降趋势,说明这些糖链结构的表达变化与膀胱癌的发生有关,从而有助于进一步阐明膀胱癌发生过程中糖链相关的分子机理,并可为膀胱癌的早期诊断、恶性演进和转移预测提供数据支持。 王雯雯 孙承文 杨刚龙 关锋关键词:膀胱癌 血清 生物标志物 一种易开口且密封良好的医用腔镜手术标本袋 本实用新型提供一种易开口且密封良好的医用腔镜手术标本袋,包括标本袋主体,收口线,排废管和排液阀门;所述的收口线胶接在标本袋主体的上部;所述的标本袋主体由后层袋体和前层袋体相互热合压塑在一起;所述的排废管镶嵌在标本袋主体的... 孙承文腹腔镜下前列腺癌根治术结合内分泌辅助治疗高危前列腺癌的效果 被引量:15 2017年 目的探讨腹腔镜下前列腺癌根治术结合内分泌辅助治疗高危前列腺癌的效果。方法选取50例局部晚期高危前列腺癌患者,均行腹腔镜下前列腺癌根治术治疗,根据术后是否进行辅助内分泌治疗(AHT)将其分为观察组及对照组,比较2组手术一般情况及2年生存率。结果 50例患者均成功手术。观察组的2年总体无生化复发率为76%,对照组为52.00%,观察组中进行AHT治疗的所有患者在随访过程中均能够耐受治疗。结论腹腔镜下前列腺癌根治术结合内分泌辅助治疗高危前列腺癌,能够显著提高患者的2年无生化复发率,控制疾病进展。 孙健 孙承文 丁锡奇关键词:腹腔镜 前列腺癌 内分泌 CO_2气膀胱压力对经尿道膀胱肿瘤电切术疗效的影响 被引量:1 2015年 非肌层侵润性膀胱肿瘤一般都是采用经尿道膀胱肿瘤电切术(TURBT)治疗;但电切时出血影响手术视野及手术操作,目前临床上尚无特殊有效的解决办法。我院采用以CO2为介质实施TURBT,探讨不同膀胱CO2压力状态对TURBT手术效果的影响。资料与方法1.一般资料膀胱肿瘤患者25例,男16例,女9例,年龄43-78岁。 孙健 陈友干 孙承文 张邓新 李光 邓圆圆关键词:膀胱肿瘤 TURBT 肌层 移行上皮细胞 电切镜 以CO2为介质经尿道膀胱肿瘤电切术治疗膀胱肿瘤的初步研究 被引量:1 2017年 目的探讨以CO2为介质行经尿道膀胱肿瘤电切术(TURBT)治疗膀胱肿瘤的初步研究。方法以CO2为介质,采用充气膀胱镜技术,对26例膀胱肿瘤行经尿道膀胱肿瘤电切术,观察其对呼吸、循环系统的影响,评价其安全性、可行性,同时观察手术时间、术中出血量、住院天数、并发症、手术效果等。结果26例患者均操作顺利,平均手术时间17min(8-35min),术中微量出血,术中、术后无并发症发生。手术前、开始后10min及结束后30min的血压、心率、血氧饱和度值相比,差异无统计学意义(P〉0.05)。手术前、后对比血气分析中pH值、CO2分压值、O2分压值相比,差异无统计学意义(P〉0.05)。术后平均住院时间为5d(4-7d)。术后病理均为尿路上皮细胞癌。随访5-12个月肿瘤无复发。结论以CO2为介质对膀胱肿瘤进行TURBT治疗,视野清晰,出血少,安全有效,具有一定可行性。 孙健 孙承文 李光 丁锡奇 邓圆圆 张邓新关键词:膀胱肿瘤 二氧化碳