唐桥斐
- 作品数：22 被引量：106H指数：6
- 供职机构：沈阳医学院附属第二医院更多>>
- 发文基金：沈阳市科技计划项目辽宁省科学技术计划项目沈阳市科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- LncRNA PVT1通过竞争miR-149-5p上调CHI3L1并影响变应性鼻炎进展的研究被引量：1
- 2022年
- 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)PVT1对变应性鼻炎(AR)进展的影响及其相关作用机制。方法24只BALB/c小鼠,其中6只作为对照组,余18只采用卵白蛋白和氢氧化铝建立AR模型并采用随机数字表法均分为模型组、AR+NC组(尾静脉注射空载体慢病毒)、AR+shPVT1组(尾静脉注射LncRNA PVT1干扰载体慢病毒),每组6只。采用行为学评分评估各组小鼠过敏症状;HE染色观察各组小鼠鼻黏膜组织病理学改变;实时荧光定量PCR检测各组小鼠鼻黏膜组织中LncRNA PVT1、miR-149-5p和几丁质酶-3样蛋白1(CHI3L1)mRNA的表达;Western blot检测CHI3L1蛋白表达;ELISA分析各组小鼠血清IgE、白细胞介素(IL)-5、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。构建LncRNA PVT1和CHI3L1的野生型(WT)和突变型(MT)荧光素酶报告质粒,单独或同时与miR-149-5p mimic共转染293T细胞,采用双荧光素酶实验分析并计算各组细胞荧光素酶相对活性。结果与模型组相比,AR+shPVT1组小鼠行为学评分降低;血清中IgE、IL-5和TNF-α水平降低;鼻黏膜组织中LncRNA PVT1 mRNA表达水平降低,miR-149-5p mRNA表达水平升高,CHI3L1 mRNA及蛋白水平均降低,鼻黏膜组织炎症反应减轻。双荧光素酶实验证实LncRNA PVT1通过竞争性结合miR-149-5p,上调miR-149-5p靶基因CHI3L1的表达。结论在AR模型小鼠中异常高表达的LncRNA PVT1通过发挥竞争性内源RNA作用抑制miR-149-5p表达而上调CHI3L1的表达,引发小鼠鼻黏膜组织的炎性症状并促进过敏反应。
- 姜玉秋唐桥斐闫智永张爽
- 没食子酸与环丙沙星联用对小鼠慢性鼻-鼻窦炎模型的作用被引量：2
- 2015年
- 探讨没食子酸与环丙沙星联用对小鼠慢性鼻-鼻窦炎模型(CRS)的作用。收集难治性CRS患者鼻黏膜样本,分离铜绿假单胞杆菌(Pseudomonas aeruginosa)构建小鼠CRS模型,没食子酸(GA)与环丙沙星(CIP)单独或联合灌胃治疗,HE染色观察小鼠鼻黏膜病理变化,ELISA检测血清炎性因子TNF-α、IL-6、IL-8的表达、试剂盒检测SOD活性、MDA及ROS含量,Western blot检测鼻黏膜组织中TNF-α、IL-6、IL-8、IκB及NF-κB p65的表达。结果显示,GA与CIP可显著降低CRS小鼠TNF-α、IL-6、IL-8、MDA、ROS及NF-κB p65的含量,增加SOD活性及IκB的表达,且联合用药效果更显著。结果说明,GA与CIP联用治疗CRS效果优于单独用药,可能通过抑制NF-κB信号通路,下调TNF-α、IL-6、IL-8表达发挥作用。
- 姜玉秋唐桥斐张爽闫智永
- 关键词：慢性鼻-鼻窦炎没食子酸环丙沙星铜绿假单胞杆菌联合用药
- 肿瘤坏死因子α单克隆抗体对变应性鼻炎小鼠自噬影响的实验研究被引量：9
- 2019年
- 目的观察肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)单克隆抗体对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)模型小鼠自噬的影响。方法30只6周龄雌性BALB/c小鼠,随机数字表法分为对照组、模型组(即AR组)、TNF-α抗体干预组(即AR+TNF-α组)、自噬抑制剂3-甲基嘌呤(3-methylindole, 3-MA)干预组(即AR+3-MA组)、TNF-α抗体联合自噬诱导剂雷帕霉素(rapamycin, RAP)干预组(即AR+TNF-α+RAP组)5个组,每组6只。常规方法制作AR模型,于鼻腔激发致敏前给予相应试剂,并持续整个实验过程。对小鼠进行行为学评分,眼窝静脉采血,处死小鼠收集鼻黏膜组织,苏木精-伊红染色观察鼻黏膜病理学变化,酶联免疫吸附测定法检测血清中炎性因子及IgE的表达,实时定量聚合酶链反应结合蛋白印迹法检测自噬相关指标微管相关蛋白1轻链3B(microtubule-associated protein-1 light chain-3B,LC3B)、Beclin-1、死骨片重组蛋白1(sequestosome1,p62)、自噬相关基因5(autophagy-related 5,ATG5)、自噬相关基因7(autophagy-related 7,ATG7)的表达,免疫荧光观察LC3B蛋白点状聚集情况。应用SPSS 19.0软件进行统计学分析。结果同AR组比较,AR+TNF-α及AR+3-MA组小鼠AR症状较轻;鼻黏膜病理学变化较弱;血清IgE、TNF-α、白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)的表达显著减少[IgE:666.19±78.35(±s,下同)比692.38±64.29比1 059.05±146.44,TNF-α:112.06±12.95比113.17±15.43比161.22±17.96,IL-4∶54.05±7.14比58.26±5.67比79.95±6.33,IFN-γ:28.58±4.51比30.67±2.60比39.83±3.31,P值均<0.05];鼻黏膜组织中LC3B Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、ATG5、ATG7的表达明显降低,p62的表达明显升高。采用自噬诱导剂RAP干预后,TNF-α单克隆抗体对AR的治疗作用被拮抗。结论TNF-α单克隆抗体可抑制自噬水平,显著改善AR小鼠鼻部症状。
- 张爽闫智永王頔李赛楠徐智唐桥斐
- 关键词：肿瘤坏死因子Α自噬
- TNF-α单克隆抗体对小鼠变应性鼻炎的治疗作用及机制研究被引量：7
- 2015年
- 目的探讨TNF-α抗体干预对小鼠变应性鼻炎(AR)的治疗作用及潜在分子机制。方法 18只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、AR模型组和TNF-α抗体干预组;采用卵清蛋白诱导致敏建立AR模型,于鼻腔刺激前滴加TNF-α单克隆抗体进行治疗;对各组小鼠进行行为学评分,H-E染色观察鼻黏膜组织病理学变化,TUNEL法检测细胞凋亡,ELISA检测鼻黏膜液中TNF-α、IL-1β、Ig E表达水平,Western blotting检测NF-κB p65、IκB及凋亡相关蛋白表达变化。结果 TNF-α抗体干预组变应性鼻炎症状减轻,炎症反应程度降低,鼻黏膜液中TNF-α、IL-1β、Ig E含量及鼻黏膜组织中NF-κB p65、cleaved caspase-3、Bax表达水平较AR模型组显著降低,I-κB及Bcl-2表达增加。结论 TNF-α单克隆抗体干预对小鼠变应性鼻炎具有一定的治疗作用,可能通过抑制NF-κB信号通路激活、调节Th1/Th2平衡、降低炎性因子水平、抑制细胞凋亡发挥作用。
- 唐桥斐张爽程阳邰旭辉姜玉秋闫智永
- 关键词：变应性鼻炎NF-ΚB信号通路
- PD1/PDL1信号途径在小鼠变应性鼻炎发病中的作用被引量：4
- 2017年
- 目的探讨PD1/PDL1信号途径在小鼠变应性鼻炎发病中的作用。方法将24只BALB/c小鼠随机分为四组,每组6只。模型组、PDL1单克隆抗体组、PDL1重组蛋白组均给予卵清蛋白(OVA)诱发变应性鼻炎,PDL1单克隆抗体组和PDL1重组蛋白组再分别给予PDL1单克隆抗体、PDL1重组蛋白处理;对照组在相同时间点给予生理盐水。采用叠加量化记分法进行搔鼻、喷嚏及鼻溢症状评价;采用免疫组化检测鼻黏膜组织PD1、PDL1阳性细胞积分光密度值;采用ELISA法检测血清TGF-β、IL-10、IL-17水平;采用Western blotting法检测鼻黏膜组织调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞17(Th17)特异性转录因子Foxp3、RORγt表达。结果对照组、模型组、PDL1单克隆抗体组、PDL1重组蛋白组行为学评分分别为0、(6.17±0.98)、(7.33±0.82)、(3.17±1.17)分,四组间比较P均<0.01。与对照组比较,模型组、PDL1单克隆抗体组血清TGF-β、IL-10水平降低,血清IL-17水平升高,鼻黏膜组织Foxp3蛋白相对表达量降低、RORγt蛋白相对表达量升高,组间比较P均<0.01。与模型组比较,PDL1单克隆抗体组血清TGF-β、IL-10水平下降,血清IL-17水平增加,PDL1单克隆抗体组鼻黏膜组织Foxp3蛋白相对表达量降低、RORγt蛋白相对表达水平升高;PDL1重组蛋白干预组血清TGF-β、IL-10水平升高,血清IL-17水平降低,鼻黏膜组织Foxp3蛋白相对表达量升高、RORγt相对表达量降低;组间比较P<0.05或<0.01。结论 PD1/PDL1信号通路参与过敏性鼻炎的发生、发展,下调TGF-β、IL-10、Foxp3表达,上调IL-17、RORrt表达,可能是PDL1抑制过敏性鼻炎发生的机制之一。
- 闫智永唐桥斐李赛楠姜玉秋徐智张爽
- 关键词：变应性鼻炎调节性T细胞辅助性T细胞17
- MiR-155-5p介导Treg/Th17免疫失衡致变应性鼻炎机制研究被引量：15
- 2019年
- 为探讨miR-155-5p异常表达对变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)小鼠Th17/Treg免疫平衡的影响及机制,将6周龄BALB/c小鼠随机平均分成6组:A.对照组(Control)、B.模型组(AR)、C.miR-155-5p空载对照组(AR+Vector)、D.miR-155-5p过表达组(AR+miR-155-5p)、E.miR-155-5p阴性对照组(AR+NC)、F.miR-155-5p沉默组(AR+抗miR-155-5p抗体)。采用卵清蛋白(ovalbumin, OVA)诱导建立AR小鼠模型,鼻腔内给予miR-155-5p过表达或沉默慢病毒进行干预。实验末对各组小鼠过敏症状进行评分,HE染色观察鼻黏膜组织病理学变化,real-time PCR、Western blotting检测鼻黏膜组织中miR-155-5p、Foxp3、RORγt的表达水平,ELISA检测血清中IgE及炎性因子TGF-β1、IL-10、IL-17A、IL-6表达,流式细胞术检测外周血Treg和Th17百分比。结果发现,与对照组比较,模型组小鼠鼻炎症状评分明显增加,Foxp3、RORγt mRNA及蛋白表达水平明显升高,血清IgE、IL-17A、IL-6及Th17百分比显著上升,TGF-β1、IL-10及Treg百分比明显降低。MiR-155-5p过表达加重模型组小鼠鼻炎症状,同时促进IgE及Th17相关细胞因子的表达,抑制Treg相关细胞因子的表达,而miR-155-5p沉默后Treg/Th17免疫失衡得到缓解,小鼠鼻炎症状评分显著下降。MiR-155-5p可以显著加重AR小鼠的鼻炎症状,可能与影响Foxp3、RORγt表达,调节Treg/Th17免疫平衡有关。
- 唐桥斐张爽王頔李赛楠徐智闫智永
- 关键词：变应性鼻炎辅助性T细胞17
- 喉鳞状细胞癌组织中VEGF和MVD的表达及与颈淋巴结转移的关系被引量：14
- 2004年
- 目的 :探讨喉鳞状细胞癌 (LSCC)组织中血管内皮生长因子 (VEGF)mRNA及蛋白的表达和微血管密度 (MVD)与颈淋巴结转移的关系。方法 :用半定量逆转录 聚合酶链式反应 (semi RT PCR)技术和免疫组织化学方法检测 6 0例LSCC组织中VEGFmRNA及蛋白的定量表达及MVD。结果 :VEGF的表达无论在基因水平还是蛋白水平伴有颈淋巴结转移组都显著高于不伴有颈淋巴结转移组 (P <0 .0 1)。CD31免疫组织化学染色结果显示伴颈淋巴结转移组的MVD计数显著高于不伴颈淋巴结转移组 (P <0 .0 1)。LSCC组织中MVD计数升高与VEGF高表达呈正相关 (r =0 .94 8 4 ,P <0 .0 5 ) ,且二者与颈淋巴结转移相关。结论 :VEGF表达和瘤内MVD有良好的相关性 ,提示VEGF高表达对LSCC微血管生成起重要作用 ;VEGF高表达和瘤内高MVD与LSCC的颈淋巴结转移密切相关 ,二者有可能成为预测LSCC转移和预后的生物学指标 ;
- 王展平季文樾唐桥斐潘子民
- 关键词：鳞状细胞内皮生长因子淋巴转移
- Let-7e-5p调控Fas/FasL影响小鼠变应性鼻炎发病的机制研究被引量：1
- 2023年
- 目的探讨let-7e-5p对小鼠变应性鼻炎的影响及机制。方法将18只BALB/c小鼠按随机数字表法均分为对照(Control)组、变应性鼻炎(AR)组、let-7e-5p激动剂阴性对照(AR+agomir-NC)组、let-7e-5p激动剂(AR+agomir)组、let-7e-5p抑制剂阴性对照(AR+antagomir-NC)组和let-7e-5p抑制剂(AR+antagomir)组。除Control组外,其余组应用卵白蛋白(OVA)致敏建立AR模型,AR+agomir组和AR+antagomir组同时给予let-7e-5p agomir或let-7e-5p antagomir进行干预,末次激发致敏后对小鼠变应性鼻炎进行评分,HE染色观察鼻黏膜组织,统计嗜酸性粒细胞数量,real-time PCR检测let-7e-5p、Fas、FasL m RNA表达,Western blot检测Fas、FasL蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测血清免疫球蛋白E(IgE)、特异性IgE(sIgE)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12、IL-4、IL-13水平,双荧光素酶实验分析let-7e-5p和Fas、FasL的靶向关系。结果与Control组比较,AR组小鼠变应性鼻炎评分升高,鼻黏膜增生明显,嗜酸性粒细胞数量增加,let-7e-5p mRNA表达及IFN-γ、IL-12水平下降,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平升高(均P<0.05)。与AR+agomir-NC组比较,AR+agomir组小鼠变应性鼻炎评分降低,鼻黏膜结构清晰,嗜酸性粒细胞数量减少,let-7e-5p mRNA表达及IFN-γ、IL-12水平升高,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平下降(均P<0.05)。与AR+antagomir-NC组比较,AR+antagomir组小鼠变应性鼻炎评分升高,鼻黏膜增厚,嗜酸性粒细胞数量增加,let-7e-5p mRNA表达减少,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平升高(均P<0.05),IL-12、IFN-γ水平差异无统计学意义。与NC+3’UTR-WT组比较,let-7e-5p agomir+3’UTR-WT组荧光素酶活性下降(P<0.05)。结论Let-7e-5p通过靶向调节Fas/FasL影响1型辅助性T细胞(Th1)/2型辅助性T细胞(Th2)平衡,从而参与AR小鼠变应性鼻炎发病的进展。
- 唐桥斐曹建秋张爽
- 关键词：变应性常年性FASL
- SOM模型大鼠中耳黏膜及耳积液中TNF-α的表达及抗TNF-α治疗的机制研究被引量：3
- 2014年
- 目的探讨抗TNF-α单克隆抗体对大鼠分泌性中耳炎(SOM)的治疗作用及其机制。方法应用随机数字表法将90只健康成年SD大鼠分成三组:对照组、SOM组、抗TNF-α治疗组,每组又根据SOM制成后不同时点,再分为6 h、1 d、3 d、7 d和14 d组,每组6只动物。HE染色后观察中耳黏膜上皮组织病理变化,应用免疫组织化学法检测中耳黏膜上皮组织中TNF-α的表达情况,并采用酶联免疫吸附(ELISA法)检测大鼠耳积液(MEE)中TNF-α的表达水平。结果制模后各时相,对照组标本中无TNF-α的阳性表达,而SOM组和抗TNF-α治疗组中耳黏膜上皮细胞中TNF-α表达灰度值均呈逐渐升高趋势,且较对照组均显著增强(P<0.05)。制模后各时相SOM组和抗TNF-α治疗组之间比较,除6 h组外,抗TNF-α治疗组其余3个时相中耳黏膜上皮细胞中TNF-α表达灰度值均明显低于SOM组(P<0.05)。制模后各时相SOM组MEE中TNF-α的表达水平均高于对照组,呈逐步上升趋势,差异均有显著性(P<0.05)。制模后各时相抗TNF-α治疗组MEE中TNF-α蛋白含量的变化曲线与SOM组相似。两组间不同时间点比较,抗TNF-α治疗组MEE中TNF-α蛋白含量明显均低于SOM组(P<0.05)。结论抗TNF-α治疗通过拮抗TNF-α的炎症介导作用而抑制中耳炎症及免疫反应,有助于减轻急性期炎症反应和阻止慢性SOM的发生。
- 张爽唐桥斐
- 关键词：分泌性中耳炎SD大鼠
- Let-7e-5p对变应性鼻炎小鼠Treg/Th17细胞失衡的影响被引量：5
- 2020年
- 目的:探讨let-7e-5p对变应性鼻炎(AR)小鼠调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)失衡的影响。方法:12只BALB/c小鼠,3只为正常组,余9只小鼠采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)3]建立AR模型后随机均分为模型组(仅造模)、let-7e-5p激动剂对照组(鼻内滴注let-7e-5p agomir阴性对照)及let-7e-5p激动剂组(鼻内滴注let-7e-5p agomir);采用行为学评分考察各组小鼠的过敏症状,酶联免疫吸附法检测各组小鼠血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素17-A(IL-17A)和白细胞介素-10(IL-10)水平,HE染色观察各组小鼠鼻黏膜组织学变化,采用实时荧光定量PCR检测各组小鼠鼻黏膜组织let-7e-5p的表达、蛋白印迹法检测RORγt和Foxp3蛋白的表达,采用流式细胞术检测各组小鼠外周血CD4^+Foxp3^+Treg和CD4^+IL-17A+Th17细胞亚群变化。结果:模型组小鼠较正常组的行为学评分、血清IgE及IL-17A水平明显增高、IL-10水平明显降低(P<0.01),let-7e-5p激动剂组较模型组的行为学评分、IgE及IL-17A水平明显下降、IL-10水平明显升高(P<0.01);同模型组比较,let-7e-5p激动剂组小鼠鼻黏膜基底层结构清晰,炎性细胞浸润明显减少;模型组小鼠鼻黏膜组织let-7e-5p基因的表达较正常组减少,let-7e-5p激动剂组则较模型组升高(P<0.05);模型组小鼠鼻黏膜组织RORγt蛋白表达较正常组增加、Foxp3蛋白表达减少,let-7e-5p激动剂组小鼠鼻黏黏膜组织RORγt蛋白表达较模型组减少、Foxp3蛋白表达增加(P<0.05);模型组小鼠较正常组外周血中CD4^+Foxp3^+Treg细胞亚群比例明显降低,CD4^+IL-17A+Th17细胞亚群比例明显升高(P<0.01);let-7e-5p激动剂组小鼠较模型组的CD4^+Foxp3^+Treg细胞亚群比例显著升高,CD4^+IL-17A+Th17细胞亚群比例明显降低(P<0.01)。结论:Let-7e-5p可能通过调节AR小鼠Foxp3和RORγt蛋白的表达,介导Treg/Th17细胞平衡,减轻炎症反应,从而改善AR小鼠鼻部过敏症状。
- 闫智永张爽唐桥斐
- 关键词：小鼠变应性鼻炎辅助性T细胞17
