向春艳
- 作品数：8 被引量：21H指数：3
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- 肺炎衣原体ELISA抗原检测方法的建立和应用
- 2008年
- 目的采用ELISA技术,建立肺炎衣原体抗原检测方法。方法建立酶联免疫吸附法,检测标本中的肺炎衣原体。采用常见的呼吸道病原体进行特异检测。对来自本院的560份临床咽拭子样本和肺泡冲洗液样本进行检测。采用流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒进行特异性评价。结果本方法对流感病毒(甲型、乙型)、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、呼吸道腺病毒无特异性反应。对本院的临床样本检出13份,其中咽拭子4份,肺泡冲洗液9份。结论本肺炎支原体抗原检测方法可用于肺炎衣原体感染的辅助诊断。
- 谷祯梅向春艳袁忠周志超温淑娟
- 关键词：肺炎衣原体酶联免疫吸附抗原检测
- 乙肝患者血清前S1、前S2抗原的检测及临床意义被引量：4
- 2008年
- 采用ELISA法检测500例乙肝患者和120例健康体检者乙肝血清标志物(HBV M)、PreS1、PreS2抗原;采用PCR法检测HBV DNA。发现500例HBsAg阳性患者中,PreS1总阳性率为73.2%,PreS2总阳性率为72.2%;HBeAg(+)的各组中PreS1、PreS2抗原的阳性率均显著高于HBeAg(-)的各组;PreS1、PreS2抗原在HBV DNA(+)组中的检出率分别高于HBV DNA(-)组。认为PreS1、PreS2抗原与HBeAg具有很好的一致性,与HBV病毒颗粒密切相关,具有重要的诊断价值。
- 温淑娟籍会彩谷祯梅向春艳
- 关键词：乙型肝炎病毒乙肝血清标志物
- 幽门螺杆菌NCTC11639基因hpaA的克隆表达及鉴定
- 2008年
- 目的获取幽门螺杆菌(Hp)hpaA基因的序列,预测其编码蛋白hpaA作为候选疫苗的可行性,在大肠杆菌表达系统中表达hpaA。方法提取Hp标准株NCTC11639的基因组DNA,使用PCR扩增hpaA基因,克隆入pGEM-T载体中测序,并进行同源性分析。将hpaA克隆入表达载体pGEX-4T-1中,诱导表达,SDS-PAGE电泳鉴定。结果同源性分析表明hpaA具有很高的保守性,成功构建出可以高效、分泌型表达hpaA的原核表达系统。结论hpaA具有高保守性,在Hp各菌株中普遍存在,是有良好应用前景的Hp候选疫苗。
- 谷祯梅籍会彩向春艳温淑娟
- 关键词：HPAA基因克隆表达SDS-PAGE
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析及相关耐药基因的检测被引量：3
- 2008年
- 【目的】了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及相关耐药基因的存在状况。【方法】采用纸片扩散法对56株MRSA进行11种抗菌药物敏感性测定,采用PCR法检测相关耐药基因mecA基因和ermB基因。【结果】所有菌株对万古霉素均敏感;对青霉素G、苯唑西林普遍耐药;对红霉素、阿奇霉素、复方新诺明、环丙沙星也表现出很高的耐药性,耐药率达90%以上;对阿米卡星、庆大霉素、呋喃妥因和利福平的耐药率分别为46.4%、83.9%、5.3%和55.4%。mecA基因和ermB基因的阳性率分别为100%和78.6%。【结论】临床分离的MRSA多重耐药性十分严重,相关耐药基因表达率高,应引起临床重视。
- 温淑娟谷祯梅籍会彩向春艳
- 关键词：葡萄球菌金黄色甲氧西林抗药性
- 呼吸道合胞病毒抗原酶联免疫吸附测定检测方法的建立及应用被引量：1
- 2008年
- 目的建立呼吸道合胞病毒抗原酶联免疫吸附测定（ELISA）检测方法，应用其对来源于本院的临床样本进行检测。方法建立ELISA方法，检测标本中的呼吸道合胞病毒，与呼吸道合胞病毒细胞培养检测方法进行对照，并利用该方法进行该病毒2007年在广州市的流行性分析。结果本方法的灵敏度略高于呼吸道合胞病毒的细胞培养检测方法，对甲型流感病毒（H3N2亚型、H1N1亚型）、乙型流感病毒、副流感病毒（Ⅰ型、Ⅲ型）、呼吸道腺病毒（Ⅲ型、Ⅶ型）无特异性反应。结论本呼吸道合胞病毒抗原ELISA检测方法可用于呼吸道合胞病毒感染的临床诊断和鉴别诊断。
- 籍会彩林斌向春艳袁忠温淑娟
- 关键词：呼吸道合胞病毒酶联免疫吸附测定抗原检测流行病学
- 肺炎衣原体荧光PCR检测方法的建立和应用被引量：4
- 2008年
- 目的采用Taqman探针技术,组建肺炎支原体荧光PCR基因检测方法。方法对GenBank登录的肺炎衣原体的基因序列进行生物信息学分析,针对保守区域设计引物和探针,组建实时荧光PCR检测方法。对来自本院的560份临床咽拭子样本和肺泡冲洗液样本进行检测。采用流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒进行特异性评价。结果本实时荧光PCR方法对甲型流感病毒(甲型、乙型)、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、呼吸道腺病毒无特异性反应。本院的临床样本检出26份,其中咽拭子9份,肺泡冲洗液17份。结论肺炎支原体荧光PCR检测方法可用于肺炎衣原体感染的辅助诊断。
- 籍会彩温淑娟林斌向春艳崔红王海
- 关键词：肺炎衣原体实时荧光PCR基因诊断
- 利用亚细胞组分蛋白分离技术有效提取细胞骨架及其相关蛋白被引量：2
- 2013年
- 目的建立一种可用于后续双向电泳研究的细胞骨架及相关蛋白的提取方法。方法采用亚细胞组分蛋白分步提取方法,根据提取过程中细胞形态变化,提取后组分蛋白电泳图谱等优化提取条件。用双向凝胶电泳、免疫印迹分析、蛋白质点质谱鉴定等方法验证该提取方法的重复性和各组分蛋白提取纯度。结果各组分蛋白的双向电泳蛋白图谱差异明显,具备各自特征性的蛋白点分布,各组分标志蛋白FAK、Integrin-β1、Histone H1和cytokeratin 19分别只表达在细胞浆、细胞膜、细胞核和细胞骨架组分。细胞骨架蛋白组分中约90%以上的蛋白质点经质谱鉴定为细胞骨架及相关蛋白。结论亚细胞组分蛋白顺序提取方法具有较好的重复性,提取组分选择性较高,并且能够有效提高低丰度蛋白的检出效率,是一种比较理想的进行蛋白质组学研究的样本预处理方法。
- 蔡贞熊石龙周园籍会彩向春艳郑磊
- 关键词：细胞骨架蛋白双向凝胶电泳
- 检测肺炎支原体的实时荧光PCR方法的建立被引量：7
- 2008年
- 目的采用Taqman探针技术,组建肺炎支原体荧光PCR基因检测方法。方法对GenBank登录的肺炎支原体的基因序列进行生物信息学分析,针对16S核糖体蛋白基因的保守区域设计引物和探针,组建实时荧光PCR方法检测。采用流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒进行特异性评价。采用倍数稀释的方法进行灵敏度的评价。对来自南方医院的522份临床咽拭子样本进行检测。结果用实时荧光PCR方法检测甲型流感病毒(甲型、乙型)、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、呼吸道腺病毒均无特异性反应。该方法可以检测出稀释浓度约为103/mL的肺炎支原体样本。对本院的临床样本检出39份。结论实时荧光PCR检测肺炎支原体具有较高的特异性和灵敏度,可用于肺炎支原体感染的诊断。
- 谷祯梅向春艳袁忠温淑娟林斌王海
- 关键词：肺炎支原体实时荧光PCR
