卫沛楠
- 作品数：7 被引量：28H指数：3
- 供职机构：石家庄市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：石家庄市科学技术研究与发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因检测和基因分型研究
- 目的:
1建立食源性金黄色葡萄球菌14种肠毒素基因的多重PCR检测方法，调查石家庄地区食源性金葡菌中肠毒素基因的分布状况。
2设计食源性金葡菌的MLVA分型方法，比较MLST、MLVA、PFGE三种基因分型方...
- 卫沛楠
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素基因PCR检测方法基因分型
- 食源性金黄色葡萄球菌溶血素基因的多重PCR检测和聚类分析被引量：6
- 2012年
- 目的建立多重PCR方法检测金黄色葡萄球菌α-溶血素、β-溶血素、h-溶血素基因以及16S rDNA,了解食源性金黄色葡萄球菌中3种溶血素基因的分布情况和溶血表型,并对菌株进行聚类分析。方法建立多重PCR方法检测148株食源性金黄色葡萄球菌的hla、hlb和hemolysin基因,并研究其分布情况,同时用血平板法检验其溶血表型,对数据进行汇总分析。结果148株菌中131株检出hla基因(88.51%),90株菌检出hlb基因(60.81%),28株菌检出hemolysin基因(18.92%);表型溶血的有131株(88.51%),不溶血的有17株(11.49%);以溶血素基因型和溶血表型为聚类因素,将148株菌以100%相似度为界分为A～L共12个型,其中以A型为主,有58株(39.19%),B型37株(25.00%),C型18株(12.16%)。结论该四重PCR方法特异性高,快速简便,能满足高通量菌株筛选的要求;食源性金黄色葡萄球菌普遍携带hla基因,聚类分析以A型和B型为主。
- 卫沛楠吕国平徐保红
- 关键词：金黄色葡萄球菌聚类分析
- 食源性金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素和葡萄球菌A蛋白的多重PCR检测法被引量：1
- 2012年
- 目的建立食源性金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素luk-F、luk-S和葡萄球菌A蛋白SPA基因的多重PCR检测方法。方法设计luk-F、luk-S和SPA基因的引物,利用单重PCR方法和测序验证引物的特异性;建立多重PCR快速检测方法,并对方法的特异性进行评价。结果利用单对引物对实验室的多个菌株进行盲筛,出现的条带均为单一条带,且与目的片段长度一致。多重PCR反应体系:25μl套装反应液2,上、下游引物(20μmol/L)各0.4μl,0.25μl套装反应液1,基因组模板6μl,加超纯水至50μl。扩增条件:94℃预热2 min;94℃保持30 s,54℃保持60 s,72℃保持60 s,34个循环;72℃延伸5 min。结论该方法对金黄色葡萄球菌有很好的特异性,快速简便,可以同时对大量菌株进行筛选。
- 吕国平卫沛楠徐保红
- 关键词：杀白细胞毒素葡萄球菌A蛋白
- 多位点序列分型在食源性金黄色葡萄球菌分型中的应用研究被引量：7
- 2013年
- 对食源性金黄色葡萄球菌进行多位点序列分型(MLST)分析,了解其基因型特征,并与流行病学资料进行对比分析。应用MLST方法对2012年石家庄市分离出的18株食源性金葡菌进行基因分型,并对该地区食源性金葡菌分子特性和流行病学特性进行分析。18株食源性金葡菌通过MLST分析得到10个ST序列型,其中ST5序列型最多,共5株;其次为ST464序列型,共3株;ST7型和ST15各2株;ST6型、ST9型、ST59型和ST2138型各1株,有2个菌株是2个新的ST型其ST码分别为287-1-1-8-1-1-1和10-14-8-6-278-3-2。本地区食源性金葡菌的ST型别丰富,主要流行克隆系为ST5和ST464,ST6、ST7、ST9、ST15、ST59和ST2138等克隆系也有分布。
- 吕国平卫沛楠徐保红芦飞
- 关键词：金黄色葡萄球菌食源性致病菌分子流行病学
- 多重PCR检测食源金黄色葡萄球菌毒素基因的建立及应用被引量：2
- 2013年
- 建立了快速检测食源性金黄色葡萄球菌(SA)16SrDNA、纤维蛋白结合蛋白(clfa A和clfa B)、纤连蛋白结合蛋白(fnbp A和fnbp B)的多重PCR方法.利用GenBank SA的16SrDNA,clfa A,clfa B,fnbp A和fnbp B基因序列,设计5对特异性引物,建立鉴定SA及分析SA毒素基因的五重PCR方法,并对160株食源SA进行属鉴定和毒素基因检测.结果显示,供试的160株食源SA中葡萄球菌属16SrDNA鉴定均为阳性;4种SA毒素基因检出率由高到低依次为clfa A(91.88%),fnbp A(21.88%),clfa B(19.38%),fnbp B(8.13%).该方法简便、快捷、准确,为食源SA的属鉴定和毒素基因分析提供了快速检测方法,同时可作为食源性疾病事件处理的溯源技术.
- 李云魏秀萍卫沛楠吕国平
- 关键词：金黄色葡萄球菌食源性致病菌多重PCR
- 基于毛细管电泳的MLVA分型方法在金黄色葡萄球菌食物中毒中的应用被引量：3
- 2013年
- 目的利用毛细管电泳技术和多位点可变数目串联重复序列分析方法(MLVA)对引起一起食物中毒的金黄色葡萄球菌进行分子分型,了解毒株的肠毒素类型,为金黄色葡萄球菌的流行病学调查和溯源提供参考数据。方法以食物中毒分离出的10株金黄色葡萄球菌的基因组为模板,选用8个可变数目串联重复序列(VNTR)位点进行PCR扩增,扩增产物进行毛细管电泳分析,利用BioCalculator软件对电泳图谱进行分析,产生的数据与MLVA数据库提供信息进行比对。同时测定毒株的肠毒素类型。结果 10株菌的8个VNTR位点的PCR扩增产物一致,VNTR09_01、VNTR61_01、VNTR61_02、VNTR67_01、VNTR21_01、VNTR24_01、VNTR63_01和VNTR81_01扩增出的条带大小分别为373、361、328、279、845、354、394和658 bp。其VNTR重复数目为15、2、2、2、35、8、2和7。10株菌的MLVA型(MT)与目前MLVA数据库公布的3892个MT均不相同,是一种新的MLVA型别,10株不同来源金黄色葡萄球菌均产肠毒素A和肠毒素B。结论 10株金黄色葡萄球菌的肠毒素特性和MLVA分型结果均一致,此次食物中毒分离出的10株菌具有高度同源性。
- 吕国平魏秀萍卫沛楠王苋芦飞
- 关键词：MLVA毛细管电泳食物中毒金黄色葡萄球菌葡萄球菌肠毒素
