刘猛六
- 作品数：7 被引量：20H指数：3
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省应用基础研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 血清与精浆磷脂酶A2的活力测定与初步应用被引量：7
- 1996年
- 用自行合成的２－硫代十六酰乙基磷酸胆碱（２－ｔｈｉｏ－ｈｅｘａｄｅｃａｎｏｙｌｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｃｈｏｌｉｎｅ，ＨＥＰＣ）作底物建立了磷脂酶Ａ２（ＰｌＡ２）的活力测定法。健康人血清（ｎ＝８０）ＰｌＡ２活力的９５％可信限为０～５．６Ｕ／Ｌ，健康人精浆（ｎ＝２５）ＰｌＡ２活力９５％可信限为０～２．９Ｕ／Ｌ。以＞５．６Ｕ／Ｌ为血清ＰｌＡ２活力升高。急性胰腺炎患者，４名急性期者均升高，５名临床好转者为正常。其他疾病患者除个别外血清ＰｌＡ２活力均在正常范围内。以＞２．９Ｕ／Ｌ为精浆ＰｌＡ２活力升高，不育症男性（ｎ＝５１）中，４９％高于正常范围。
- 张文辉李晓军武建国刘猛六胡卓逸
- 关键词：磷脂酶A2急性胰腺炎血清精浆不育症
- 棉酚抗生育新机制——对磷脂酶A_2活力的抑制作用(英文)被引量：2
- 2001年
- 采用微孔比色法及荧光分析法 ,研究抗男性生育化合物棉酚与猪胰腺磷脂酶A2 (phospho lipaseA2 ,PLA2 ,EC3 1 1 4 )温育并透析前后对酶活力及荧光的影响 .结果表明 ,棉酚与PLA2 不可逆地结合明显地降低了PLA2 活力及荧光强度 .棉酚对酶活力抑制作用的IC50 为 35μmol L ;当其浓度达到 80 μmol L时 ,能够完全抑制PLA2 ( 4 11μmol L)对合成底物 2 硫代十六酰乙基磷酸胆碱(HEPC ,0 .2 5mmol L)的水解作用 .PLA2 的最大激发波长与发射波长分别为 2 75nm ,34 3nm ,荧光强度与酶浓度呈良好的线性关系 .棉酚对PLA2 的荧光具有较强的淬灭作用 .由于PLA2 与男性生育密切相关 ,棉酚对PLA2
- 刘猛六徐卉平胡卓逸
- 关键词：棉酚磷脂酶A荧光分析法抗生育作用
- 生物活性蛋白钙调素与磷脂酶A_2的高效毛细管电泳纯度分析被引量：1
- 1996年
- 采用高效毛细管电泳对猪脑中提取的钙调素与猪胰腺中提取的磷脂酶Ａ２进行分离分析。以Ｂｉｏ－Ｒａｄ２０ｃｍ×２５μｍｃｏａｔｅｄ石英毛细管为分离柱，ＵＶ２００ｎｍ为检测波长，选择０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（ｐＨ３．５）为钙调素电泳分离缓冲液体系，０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（ｐＨ２．５，内含０．１％ＨＰＭＣ）为磷脂酶Ａ２电泳分离缓冲液体系，对多步分离纯化获得的钙调素与磷脂酶Ａ２进行纯度分析，同时为进一步研究钙调素与磷脂酶Ａ２的生物活性提供了有效的检测手段。
- 范国荣刘猛六张正行胡卓逸安登魁
- 关键词：钙调素磷脂酶A2高效毛细管电泳
- 磷脂酶A2的活力测定与临床初步应用被引量：1
- 1995年
- 磷脂酶Ａ２（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２，ＰＬＡ２）是能催化和水解膜磷脂的磷脂酶中的一种，几乎存在于所有的细胞中，在血清、胰液、精浆、唾液、滑膜液中都可测得。酶蛋白由１２５个氨基酸的单一多肽链组成，分子量１２０００～１５０００，等电点是９．２，最适...
- 张文辉李晓军武建国刘猛六刘猛六
- 关键词：磷脂酶A2急性胰腺炎不育症
- 微孔比色法在猪胰腺PLA_2制备中的应用被引量：5
- 1997年
- 微孔比色法采用合成的磷脂类似物２－硫代十六酰乙基磷酸胆碱作底物，在多孔聚苯乙烯板的小孔中反应，并用酶联免疫检测器连续测定和记录吸收值．同时应用此法及滴定法检测酶活力，从猪胰腺中制备了一种分子量低（１４．３ｋＤ），对热、酸稳定，活性依赖Ｃａ２＋的ＰＬＡ２．两种方法检测结果具有可比性，而微孔比色法同时可测多个样品，有节约样品，灵敏度较高等优点．微孔比色法特别适用于大量的样品测定，如拮抗剂筛选、临床样品及制备酶时层析级分的检测等．
- 刘猛六胡卓逸徐龙川
- 关键词：磷脂酶A2胰腺
- 抗人精浆磷脂酶A2单克隆抗体细胞株的建立与鉴定
- 2002年
- 目的 :制备并鉴定人精浆磷脂酶A2 (PLA2 )的单克隆抗体 (McAb)。 方法 :通过PEG沉淀、SephacrylS 30 0柱层析、DEAE SephadexA 2 5柱层析及羟基磷灰石 (HA)柱层析分离纯化人精浆中的PLA2 ,并以SDS PAGE鉴定其分子量及蛋白浓度 ;免疫BALB/C小鼠制备抗PLA2McAb ,通过ELISA技术、Western Blot方法鉴定其敏感性及特异性。 结果 :从精浆中提纯的PLA2的相对分子质量 (Mr)约为 3490 0 ,纯化倍数约为 2 4 5倍。制备的McAb经鼠Ig亚类分析为IgMKappa型 ,敏感性可达 1∶5 6～ 1∶5 8,Western Blot证明其特异结合的抗原即为PLA2蛋白酶。结论 :Mr为 3490 0的PLA2可能为一种新型PLA2。
- 王书奎黄宇烽夏欣一李保仝王自正刘猛六
- 关键词：磷脂酶A2纯化单克隆抗体人精浆
- 二氢嘧啶酶的分离纯化与性质研究被引量：5
- 2000年
- 二氢嘧啶酶产生菌Pseudomonasputida 980 1经过超声波粉碎及分级盐析 ,DEAE 纤维素和羟基磷灰石柱层析 ,SephadexG 2 0 0凝胶过滤得到纯化 2 49倍的酶液。SDS PAGE显示为单带 ,单体分子量为 380 0 0 ,SephadexG 2 0 0凝胶过滤测得分子量为 15 6 0 0 0。二氢嘧啶酶对苯海因的km 为 2 .39× 10 -2 mol/L ,其最适 pH和最适温度分别是 8.5～ 8.7和 34℃～ 35℃。 1mmol/L的EDTA和 β 巯基乙醇对酶活力有强烈的抑制作用。
- 黄红辉刘猛六胡卓逸
- 关键词：纯化
