刘涛
- 作品数:14 被引量:9H指数:2
- 供职机构:重庆医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 儿童扁平足负重位下X线片各测量角的相关性及差异性研究
- 目的:研究并探讨跟骨倾斜角(CPA)、外侧纵弓角(LLAA)、内侧纵弓角(MLAA)和距骨第二跖骨角(SMAOT)作为评估儿童扁平足严重程度的指标的可行性。 方法:通过回顾性分析我院2019年8月-2020年4月间门诊...
- 刘涛
- 关键词:儿童患者扁平足负重位X线诊断
- 文献传递
- 逆转录病毒载体介导的RNAi抑制Bmi-1基因表达对MCF-7细胞的影响被引量:2
- 2009年
- 目的:研究RNA干扰(RNAi)抑制Bmi-1基因表达后对乳腺癌细胞株MCF-7凋亡和增殖的影响.方法:将表达Bmi-1短发夹RNA(shRNA)的重组逆转录病毒载体pSuper-retro/Bmi-1si瞬时转染MCF-7乳腺癌细胞株,携带针对绿色荧光蛋白干扰序列的载体pSuper-retro/GFPsi作为阴性对照.用RT-PCR和Western Blot分别从mRNA,蛋白水平检测Bmi-1的表达;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测MCF-7细胞周期和凋亡的变化.结果:pSuper-retro/Bmi-1si明显抑制MCF-7细胞Bmi-1 mRNA及蛋白表达.与空白对照组及阴性对照组相比较凋亡细胞数无明显增加;抑制Bmi-1基因表达使MCF-7细胞G1/S周期转换及细胞增殖速率受抑制.结论:表达shRNA的重组逆转录病毒载体pSuper-retro/Bmi-1si能显著抑制乳腺癌细胞株MCF-7中Bmi-1基因表达,从而有效抑制MCF-7细胞增殖,为乳腺癌的基因治疗提供了实验依据.
- 武向梅卜友泉宋方洲刘涛张琴袁成福袁飞秦琴
- 关键词:BMI-1基因重组逆转录病毒RNA干扰
- 人Makorin环指蛋白1基因shRNA真核表达质粒的构建及鉴定被引量:2
- 2009年
- 目的构建人Makorin环指蛋白1(MKRN1)基因shRNA真核表达质粒,并检测其对HEK293细胞MKRN1基因表达的影响。方法设计并合成特异性针对人MKRN1基因的小干扰片段,定向克隆至带有卡那霉素抗性基因和绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pGenesil-1中,对重组质粒进行酶切鉴定及DNA序列分析,并用脂质体将其转染到HEK293细胞中,观察其对细胞MKRN1基因mRNA转录和蛋白表达水平的影响。结果经酶切鉴定和序列分析证明,3个人MKRN1基因shRNA真核表达质粒及其阴性对照质粒构建正确,转染HEK293细胞后,3个shRNA真核表达质粒在mRNA水平对细胞MKRN1基因的抑制率分别为52.4%、26.2%和42.9%,在蛋白水平对细胞MKRN1基因的抑制率分别为69.1%、27.9%和50.0%。结论已成功构建了人MKRN1基因的shRNA真核表达质粒,为进一步研究MKRN1基因的功能及其与人端粒酶逆转录酶的关系奠定了基础。
- 刘涛石艳艳袁成福张琴卜友泉易发平刘革力宋方洲
- 关键词:短发夹RNA真核表达质粒人端粒酶逆转录酶
- 人Makorin环指蛋白1基因沉默对HEK293细胞的影响
- 2010年
- 目的探讨特异性抑制人Makorin环指蛋白1(MKRN1)基因的表达对HEK293细胞的影响。方法用脂质体将前期筛选出的含最有效干扰序列的人MKRN1基因shRNA真核表达质粒,转染至HEK293细胞中,观察其对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因mRNA转录水平、蛋白表达水平及细胞增殖的影响。结果人MKRN1基因shRNA真核表达质粒转染HEK293细胞后,在mRNA和蛋白水平均能明显上调细胞hTERT基因的表达,且细胞明显增殖。结论抑制HEK293细胞中人MKRN1基因的表达,可导致hTERT基因mRNA转录水平和蛋白表达水平上调,并促进细胞增殖。
- 刘涛石艳艳袁成福张琴卜友泉易发平刘革力宋方洲
- 关键词:短发夹RNA真核表达质粒人端粒酶逆转录酶HEK293细胞
- 人CD147基因siRNA真核表达质粒的构建及其对HeLa细胞中CD147基因表达的影响被引量:2
- 2009年
- 目的构建针对人CD147基因的siRNA真核表达质粒,并观察其对HeLa细胞中CD147基因表达的影响。方法根据GenBank中登录的人CD147基因序列,设计并合成针对CD147基因的特异性小干扰片段,并将其定向克隆至带有卡那霉素抗性和增强型绿色荧光蛋白的真核表达载体pGenesil-1中,对重组质粒进行酶切分析和DNA序列测定。用脂质体将重组质粒转染至HeLa细胞中,观察其对HeLa细胞CD147基因mRNA及蛋白表达水平的影响。结果酶切鉴定和测序结果表明,3个表达短发夹RNA的质粒及其阴性对照质粒构建正确。3个siRNA真核表达质粒对HeLa细胞CD147基因mRNA转录水平的抑制率分别为32.5%、66.8%和59.1%;对CD147蛋白表达水平的抑制率分别为28.3%、63.5%和56.2%。结论已成功构建针对人CD147基因的siRNA真核表达质粒,其对HeLa细胞CD147基因的表达具有明显的抑制作用,为进一步研究CD147基因的功能奠定了基础。
- 吕金星袁成福刘涛易发平卜友泉刘革力刘智敏宋方洲
- 关键词:小干扰RNA真核表达质粒HELA细胞
- 人MKRN1基因shRNA真核表达质粒构建及其对HEK293细胞特性的影响
- 目的构建人MKRN1基因shRNA真核表达质粒,并检测其对HEK293细胞MKRN1基因表达及细胞特性的影响,为进一步研究MKRN1基因的功能奠定基础。
方法本课题设计并合成特异性针对MKRN1基因的小干扰片...
- 刘涛
- 关键词:短发夹RNA真核表达质粒人端粒酶逆转录酶
- 文献传递
- MKRN1基因siRNA重组腺病毒载体构建及功能鉴定
- 2009年
- 目的构建MKRN1的siRNA重组腺病毒载体,并在表达MKRN1的HeLa细胞中鉴定其干扰作用和对端粒酶活性的影响,为探讨MKRN1功能及其与肿瘤关系提供有效工具。方法人工合成靶向MKRN1的siRNA干扰序列,用分子克隆的方法克隆到穿梭载体pSES-HUS上得到pSES-HUS-MKRN1 siRNA,并与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组得到pAdeasy-SES-HUS-MKRN1 siRNA;在HEK293细胞中包装成重组腺病毒,感染表达MKRN1的HeLa细胞株,用RT-PCR法及Western印迹技术检测腺病毒对细胞MKRN1表达的影响,用PCR-TRAP法检测细胞中端粒酶活性的变化。结果成功构建了MKRN1的siR-NA重组腺病毒载体;MKRN1的siRNA重组腺病毒能显著抑制HeLa细胞中MKRN1的表达,并显著上调细胞中端粒酶的活性。结论构建的Adeasy-MKRN1 siRNA腺病毒能有效地抑制HeLa细胞中MKRN1的表达并上调细胞端粒酶活性,从而为进一步研究MKRN1的功能及其与肿瘤的关系提供了有效的新工具。
- 石艳艳刘涛张琴袁成福卜友泉易发平刘革力宋方洲
- 关键词:腺病毒载体RNA干扰端粒酶HELA细胞
- 一期与分期输尿管软镜碎石术治疗上尿路结石疗效分析
- 目的: 探讨一期与分期输尿管软镜碎石术(FURL)治疗上尿路结石的临床疗效。 方法: 回顾性分析我科2016年9月至2017年8月105例行输尿管软镜碎石术患者的临床资料,其中一期组47例,分期组58例,比较两组手...
- 刘涛
- 关键词:上尿路结石临床疗效
- MARCO促进Kupffer细胞胞葬作用及改善老龄供肝缺血再灌注损伤
- 目的:肝脏移植术后的缺血再灌注损伤程度与移植物功能和患者预后密切相关。增强库普弗细胞(Kupffer cells,KCs)的胞葬能力可以有效促进KCs M2极化,减轻移植肝脏的缺血再灌注损伤(Ischemia-reper...
- 刘涛
- 关键词:肝脏移植缺血再灌注损伤
- YTHDF2抑制剂及其与紫杉醇联合使用在制备治疗卵巢癌的药物中的应用
- 本发明涉及生物医药技术领域,公开了YTHDF2抑制剂及其与紫杉醇联合应用在制备治疗卵巢癌的药物中的应用。本发明研究表明,YTHDF2的减少增加了卵巢癌对紫杉醇的易感性,氟哌利多可增强卵巢恶性肿瘤对紫杉醇的反应性,氟哌利多...
- 易萍王源刘涛杨丹