刘敏
- 作品数：136 被引量：374H指数：11
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划黑龙江省教育厅科学技术研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 传染性胰腺坏死病毒抗原捕捉ELISA检测方法的建立及应用
- 传染性胰腺坏死病毒(Infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)属双RNA病毒科(Birnaviridae)水生双RNA病毒属(Aquabirnavirus)的成员,是引起鲑科鱼类...
- 刘敏连科迅李一经唐立杰赵丽丽乔薪瑗
- 关键词：单克隆抗体
- 文献传递
- 鲑鱼甲病毒阳性核酸物质制备及RT-PCR检测方法的建立被引量：1
- 2016年
- 为建立快速检测鲑鱼甲病毒(Salmonid alphavirus,SAV)RT-PCR方法,根据Gen Bank公布的E2基因序列(1 375 bp)设计引物,扩增S AV E2全长基因,利用假病毒制备技术获得包裹E2核酸物质(RNA)的SAV假病毒溶液。以SAV假病毒作为阳性核酸物质质控品,以E2F:5'CCG-TTG-CGG-CCA-CAC-TGG-ATG 3',E2R:5'CCT-CAT-AGG-TGA-TCG-ACG-GCA-G 3'为引物,优化反应条件,建立SAV的RT-PCR检测方法。结果表明,该方法可扩增SAV E2特异性516 bp的DNA片段,引物最适反应浓度为1.0μmol·L-1,最佳退火温度为57.5℃,对SAV的三种亚型SAV1(V4640)、SAV2(V4619)、SAV5(V4638)检测结果均为阳性,对SVCV、IHNV和IPNV的PCR扩增结果均为阴性;并确定对SAV的核酸最低检出量达1.59 pg;以RT-PCR方法在不同时间对每份样品作3次重复检测,检测结果一致。表明此方法特异性强,敏感性高,稳定性和重复性较好,可用于SAV临床诊断和检测。
- 刘敏杜航宋傲臣高帅唐丽杰蒋烨李一经
- 关键词：SAVE2RT-PCR
- 表达传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的重组干酪乳杆菌及制法
- 本发明提供的是一种表达传染性胰腺坏死病毒(Infectious pancreas necrosis virus，IPNV)VP3蛋白的重组干酪乳杆菌及制法。根据传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因...
- 刘敏李一经赵丽丽赵永欣刘巍巍
- 文献传递
- 5种中草药对鲤血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及红细胞过氧化氢酶活性的影响被引量：50
- 2007年
- 用分别添加3%刺五加、蒲公英、枸杞子、金银花和大蒜单方中草药的基础日粮饲喂鲤(Cyprinus carpio),在第15 d和第30 d测定其血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)及红细胞过氧化氢酶(CAT)活性。结果显示,15 d时,血清GOT活性仅大蒜组与对照组差异显著,血清GPT及红细胞CAT活性各试验组与对照组差异均不显著;30 d时,血清GOT活性各实验组与对照组的差异均不显著,血清GPT活性刺五加组和蒲公英组与对照组差异显著,红细胞CAT活性各实验组与对照组的差异均不显著。
- 陈玉春顾雪飞刘敏
- 关键词：中草药
- 融冰期越冬鱼类气泡病及其防治被引量：1
- 2013年
- 北方越冬期鱼类在冰下经历一个漫长的冬季，在东北可达四个月之久。覆冰后水体形成一个封闭的系统，冰下水环境也相对稳定。春季一旦覆冰融化，水体环境发生很大变化，特别是融冰阶段，原来溶解在水体中的各种气体快速释放到空气中，总溶解气体压力快速下降，池中鱼类气泡病的发病率很高，春季低温期正适合水霉的继发感染，因此水霉病引起气泡病的死亡率非常高。本文总结了融冰期气泡病的发病原因、症状及防治方法，希望给北方地区越冬管理带来一些帮助。
- 唐绍林刘敏
- 关键词：气泡病越冬期鱼类冰期水体环境气体压力
- 抗传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备被引量：2
- 2013年
- 利用纯化后的传染性胰腺坏死病毒(IPNV VP3)重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术,采用间接ELISA和有限稀释法筛选杂交瘤细胞,利用染色体鉴定、蛋白印迹和免疫荧光等方法对单克隆抗体进行鉴定,共得到2株能稳定分泌特异性抗体的阳性细胞株,分别命名为2F1、4A7,亚类鉴定2株单抗均为IgG1亚类。ELISA检测其腹水效价,蛋白印迹检测表明获得的2株单抗均能特异性识别IPNV VP3蛋白;间接免疫荧光鉴定表明2株单抗均与IPNV发生反应;间接ELISA检测结果表明2株单抗均不与HSV、SVCV、HRV等病毒反应,与IPNV具有较强的特异性反应。
- 刘立月刘巍巍赵丽丽葛俊伟唐立杰刘敏李一经
- 关键词：VP3蛋白单克隆抗体
- 传染性胰腺坏死病毒VP2 COE蛋白单克隆抗体的制备与初步应用被引量：9
- 2013年
- 为制备抗IPNV VP2蛋白的单克隆抗体,对其基本特性进行鉴定并进行初步应用。实验利用Ni-NTA亲和层析纯化的IPNV VP2 COE重组蛋白作为免疫原,免疫8周龄的雌性BALB/c小鼠,经3次免疫后,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合。采用间接ELISA和有限稀释法筛选杂交瘤细胞,共得到2株能稳定分泌特异性抗体的阳性细胞株,分别命名为5G10和5F3,亚类鉴定均为IgG1亚类。2株杂交瘤细胞的染色体数目在75～120之间。间接ELISA检测5G10和5F3细胞培养上清的效价分别为1∶105、1∶102,腹水效价分别为1∶108、1∶104。Western-blotting和间接免疫荧光鉴定结果显示,2株单抗均能特异性地识别IPNV。间接ELISA表明,2株单抗不与IHNV、VHSV、SVCV、HRV等病毒反应,说明获得的单抗具有高度的特异性。相加ELISA实验结果显示,2株单克隆抗体分别识别IPNV VP2蛋白上不同的抗原位点。应用间接免疫荧光方法对临床确定为患有IPN虹鳟肝组织进行检测,结果证实该2株单克隆抗体可用于后续实验。
- 连科迅赵丽丽张琳琳贾鹏唐立杰葛俊伟李一经刘敏
- 关键词：单克隆抗体
- 中草药对鲤鱼非特异性免疫功能的影响被引量：13
- 2007年
- 用添加刺五加、蒲公英、枸杞子、金银花和大蒜等单方中草药的配合饲料饲喂鲤鱼,在第15d和第30d测定其巨噬细胞对绵羊红细胞的吞噬能力、NBT阳性细胞数、免疫器官指数及血清中补体C3的活性等非特异性免疫指标。结果显示,15d时,所有试验组巨噬细胞对绵羊红细胞的吞噬能力与对照组相比均有显著差异(P<0.05),金银花组和大蒜组NBT阳性细胞数与对照组相比有显著差异(P<0.05),所有试验组免疫器官指数和血清中补体C3的活性与对照组相比差异均不显著(P>0.05);30d时,所有试验组巨噬细胞对绵羊红细胞的吞噬能力和NBT阳性细胞数与对照组相比均有显著差异(P<0.05),所有试验组免疫器官指数与对照组相比均差异不显著(P>0.05),金银花组和大蒜组血清中补体C3的活性与对照组相比有显著差异(P<0.05)。
- 顾雪飞陈玉春刘敏
- 关键词：鲤鱼中草药非特异性免疫
- 浅谈网络环境下研究生文献检索能力的培养
- 2012年
- 针对研究生进入课题或论文研究阶段缺少信息检索能力的问题,提出了弥补性的解决方案,使研究生掌握文献检索的基本理论与方法,通过具有针对性的训练,利用网络环境检索工具,全面、准确、快速地获取所需文献和信息。
- 刘敏管雪婷
- 关键词：网络环境
- IPNV VP2蛋白McAb的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的初步建立
- 目的:本实验旨在以IPNV VP2蛋白作为免疫原,通过细胞融合技术经过克隆筛选获得高效价、分泌功能稳定的单克隆抗体,进而建立针对IPNV的双抗体夹心ELISA检测方法,同时具有McAb的特异性和ELISA的敏感性,为进一...
- 连科迅刘敏姜艳平崔文李海滨李一经
- 关键词：VP2蛋白单克隆抗体双抗体夹心ELISA
