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丁桂兰
作品数:
2
被引量:2
H指数:1
供职机构:
南昌大学第一附属医院
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发文基金:
广东省科技计划工业攻关项目
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
黄呈辉
南方医科大学
张伦理
南昌大学第一附属医院
李小鹏
南昌大学第一附属医院
李传友
首都医科大学附属北京胸科医院
刘毅
江西省儿童医院
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作者
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丁桂兰
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结核分枝杆菌感染诱导星形胶质细胞过度表达基质金属蛋白酶-9的分子机制
被引量:1
2013年
目的探讨结核分枝杆菌感染对人星形胶质细胞基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响及其机制。方法分别用结核分枝杆菌(MTB)直接感染人星型胶质细胞系U251细胞,MTB感染外周血单个核细胞(PBMC)后的条件培养基(CoMTB)、含RPMI-1640的MTB条件培养基(CoTB)及未感染MTB的PBMC条件培养基(CoMCON)刺激U251细胞,ELISA检测细胞上清液中MMP-9含量,明胶酶谱法检测MMP9活性,Western印迹法检测MMP-9、核因子(NF)-κB及核因子-κB抑制蛋白(IκB)α和IκBβ的表达。组间及配对数据比较采用t检验,多组间比较先行方差齐性检验,方差齐采用方差分析,不齐采用秩和检验。结果MTB直接感染U251细胞后MMP-9几乎检测不到,CoMTB刺激U251细胞后,MMP-9含量从12h的(400.1±12.6)pg/mL逐步升至72h的(2900.3±108.4)pg/mL,呈时间依赖性;而CoMCON和CoTB组刺激72h后MMP-9含量分别为(300.8±40.4)pg/mL和(400.2±42.8)pg/mL,差异有统计学意义(t=9.514,P=0.000;£-9.476,P=0.000)。明胶酶谱法和Western印迹法检测CoMTB组上清液中MMP-9的表达,随刺激时间延长,其活性和表达量逐渐增强,与ELISA法一致。CoMTB刺激U251细胞后NF-κBP65表达增加,1h时是CoMCON组的2倍(t=6.78,P=0.041),2h时是CoMCON组的5倍(t=9.23,P=0.008),CoMTB组ICBa和IκBα蛋白0.5h开始降解并持续至6h,而CoMCON组未见降解。结论PBMC-神经胶质细胞网络在结核感染的基质降解中起重要作用,CoMTB可能通过激活NF-κB信号通路上调MMP9的表达。
李小鹏
张伦理
丁桂兰
黄呈辉
陈佳丽
刘毅
任卫聪
孙照刚
李传友
关键词:
分枝杆菌
结核
星形细胞
基质金属蛋白酶类
结核
脑膜
基质金属蛋白酶-9在结核性脑膜炎小鼠中的表达及其意义
被引量:1
2014年
目的分析基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在小鼠结核性脑膜炎病理生理过程中的表达特点及其意义。方法侧脑室注射结核分枝杆菌H37RV悬液的16只小鼠作为模型组,注射等量0.9%氯化钠溶液的16只小鼠作为对照组,30d后处死。分别进行脑组织结核分枝杆菌培养、病理学观察,明胶酶谱法检测MMP-9活性,检测血脑屏障通透性和脑组织含水量,免疫荧光染色脑组织MMP-9、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)和整合素aM(OX-42)。采用t检验比较两组间的差异。结果模型组小鼠注射菌量为(1.271±0.111)×10。菌落形成单位(cfu)/只,感染30d后脑组织匀浆培养出结核分枝杆菌,菌量为(4.900±1.407)×10。cfu/mL,光学显微镜下见蛛网膜下腔和脑室扩张,大量炎性细胞浸润。模型组小鼠脑组织MMP-9条带累积吸光度(A)值为478214-19932,对照组为10082±3544,差异有统计学意义(f=3.728,P=0.010)。模型组小鼠脑组织伊文斯兰(EB)含量为(11.8±3.6)bLg/g,对照组为(4.7±3.4)/tg/g,差异有统计学意义(t=2.887,P=0.028)。模型组小鼠脑组织含水量为0.849土0.035,对照组为0.775±0。037,差异有统计学意义(t=2.925,P=0.026)。免疫荧光染色显示感染后小鼠脑组织高表达MMP-9、GFAP和OX-42,且MMP-9与GFAP和0X-42均明显重合。结论MMP-9在结核性脑膜炎小鼠脑组织中活性增强,并参与破坏血脑屏障,导致组织水肿、炎性细胞渗出,小胶质细胞-星形胶质细胞网络参与MMP-9的分泌。
丁桂兰
李小鹏
黄呈辉
罗金亮
王俊井
李传友
张伦理
关键词:
结核
脑膜
基质金属蛋白酶9
小鼠
小神经胶质细胞
星形胶质细胞
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