甘肃省新药临床前研究重点实验室
- 作品数：71 被引量：356H指数：11
- 相关作者：张伟高琲闵光宁王凯荣龙瑶更多>>
- 相关机构：兰州大学兰州大学第一医院甘肃中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省自然科学基金甘肃省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 白介素17受体抗体融合蛋白基因工程药物研究
- 张春江段建功方媛文娟丁佳栋陈新君
- 课题来源与背景:“白介素17受体抗体融合蛋白基因工程药物研究”为2012年度甘肃省科技支撑计划资助项目，项目编号：1204FKCA131，由兰州大学生命科学学院张春江副教授课题组实施完成。研究目的与意义:该项目构建融合蛋...
- 关键词：
- 关键词：融合蛋白基因基因表达基因工程药物
- 前胃泌素、胃泌素、膜联蛋白2对胃癌CD44^+细胞增殖和侵袭的影响被引量：1
- 2012年
- 目的检测前胃泌素、胃泌素、膜联蛋白2在CD44+细胞的表达情况,研究三者对CD44+细胞生长和侵袭能力的影响。方法使用CD44免疫磁珠分选技术从胃癌BGC-823细胞中分选出CD44+细胞,流式细胞仪(FCM)和免疫荧光检测CD44+细胞中CD44的表达,以鉴定分选是否成功。FCM细胞周期分析和无血清培养,检测CD44+细胞的干细胞特性。流式细胞仪检测前胃泌素、胃泌素、膜联蛋白2在CD44+细胞、BGC-823细胞和CD44-细胞表达的差异。MTT法和Boyden小室实验研究3者对CD44+细胞生长和侵袭能力的影响。结果流式细胞仪和细胞免疫荧光结果提示:CD44+细胞中CD44阳性率为(90.20±2.24)%,显著高于BGC-823细胞[(9.57±2.35)%,P<0.01];CD44+细胞组处于G0/G1期的细胞为(71.1±5.6)%,显著高于BGC-823细胞组[(47.7±3.5)%,P<0.05];在无血清培养7 d后,CD44+细胞能够形成圆形克隆球,而CD44-细胞不能形成圆形克隆球;流式细胞仪显示前胃泌素、胃泌素、膜联蛋白2在CD44+细胞中高表达,明显高于在BGC-823细胞和CD44-细胞的表达水平(P<0.01);Pearson相关性分析显示:三者的表达率呈正相关关系(P<0.01)。高浓度的前胃泌素mAb和膜联蛋白2mAb能够抑制CD44+细胞的生长和侵袭,与对照组相比差异显著(P<0.05)。胃泌素mAb不能抑制CD44+细胞的生长和侵袭,与对照组相比差异不显著(P>0.05)。结论 CD44+细胞中高表达前胃泌素、胃泌素、膜联蛋白2,并且前胃泌素mAb和膜联蛋白2mAb能够抑制CD44+细胞的生长和侵袭能力,提示前胃泌素与膜联蛋白2能够促进CD44+细胞的生长和侵袭。
- 程晓荣杨爱军刘燕菲李双明向琳杨丽李敏
- 关键词：胃癌BGC-823细胞CD44胃泌素
- 砂生槐多糖提取物对免疫抑制模型小鼠Treg和Th17的影响
- 2016年
- 为了开发藏药砂生槐的药用价值,本文拟研究其多糖提取物对免疫抑制小鼠调节性T细胞(Treg)和Th17的影响。水提醇沉法提取砂生槐枝条多糖物质,腹腔注射环磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型,模型小鼠经砂生槐多糖灌胃干预后,分离脾细胞,流式细胞术检测CD4+T细胞比例和CD4+CD25+Treg细胞比例;收集血清,ELISA检测IL-17水平。结果显示,各剂量组砂生槐多糖均能够引起免疫抑制小鼠的脾脏CD4+CD25+Treg细胞比例明显增多(P<0.05),同时明显抑制IL-17的产生(P<0.05)。以上结果提示砂生槐多糖可能通过上调Treg而抑制免疫功能,同时抑制IL-17的产生,发挥免疫抑制作用。
- 雒艳萍贾天玉管彬冯燕海史彦斌马兴铭
- 关键词：砂生槐植物多糖IL-17
- 葡萄籽原花青素治疗大鼠溃疡性结肠炎的作用机理研究
- 吴勇杰杨孝来王艳红李小丽张富华张宝来王莉路莉崔明霞覃红李文广高明堂
- 该项目用三硝基苯磺酸-乙醇溶液致大鼠急性和复发性溃疡性结肠炎(UC)模型，研究了葡萄籽原花青素(GSPE)对两种实验性UC的治疗作用、量效关系及作用机理。结果发现，GSPE的作用及其机理为：1)抑制炎细胞浸润、抗氧化、减...
- 关键词：
- 关键词：溃疡性结肠炎葡萄籽原花青素抗氧化剂动物实验
- 肿瘤干细胞及其分离鉴定被引量：2
- 2010年
- 肿瘤干细胞（TSC）是肿瘤组织中充当干细胞角色的细胞，具有无限增殖的潜能，在启动肿瘤形成和生长中起着决定性的作用。从血液系统肿瘤和实体瘤研究获得的数据提示，在每一个癌组织内只有一小部分的细胞群具有这样启动肿瘤演进的能力，这些肿瘤起始干细胞承担着肿瘤干细胞或癌干细胞的特定功能，而其余的大多数细胞则经过短暂的分化，最终死亡。近年来随着干细胞和TSC的深入研究，越来越多的证据表明TSC是恶性肿瘤转移复发的原因，因此分离鉴定出TSC对阐明肿瘤发病机制和研发抗肿瘤药物具有重要意义。目前分选技术尚未成熟，主要是利用TSC的生物学和表面标记，采用高效的流式细胞仪和磁性细胞分选仪分选TSC或干细胞样细胞，判断其是否具备自我更新与增生分化的能力。TSC的鉴定现在通常用的验证手段包括根据特异的细胞表面标志鉴定TSC，采用染料Hoechst33342鉴定TSC，采用BrdU法鉴定TSC及利用TSC的生物学特性在体外培养进行初步的鉴定等。但是进行TSC鉴定的最具说服力的方法主要是根据细胞体内成瘤能力鉴定TSC。
- 王娜关泉林祝秉东张颖
- 关键词：肿瘤干细胞胃肿瘤
- HPLC同时测定扶正解毒颗粒中5种成分的含量被引量：4
- 2011年
- 目的:建立一种高效液相色谱分析方法,同时测定扶正解毒颗粒中丹参素、原儿茶醛、阿魏酸、丹酚酸B和芒柄花素的含量。方法:迪马ODS-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇和0.05%磷酸水溶液梯度洗脱,280 nm波长测定丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B,316 nm波长测定阿魏酸,248 nm波长测定芒柄花素。结果:5个化合物在一定范围内线性关系良好(r>0.999),平均回收率为98%～101%,RSD<3.55%。结论:该法简便、灵敏、准确、重复性好,可用于同时测定该制剂中5种成分的含量,为该制剂质量控制提供了基础。
- 王娟沈孝丽陈同强ADILBEKOV J.封士兰
- 关键词：丹参素原儿茶醛阿魏酸丹酚酸B芒柄花素扶正解毒颗粒
- 三氧化二砷通过抑制新生血管形成发挥抗小鼠恶性黑色素瘤作用被引量：6
- 2015年
- 目的：采用小动物活体成像技术研究三氧化二砷（As2O3）的抗小鼠恶性黑色素瘤作用及其机制。方法：荧光素酶（luciferase,Luc）基因标记小鼠B16黑色素瘤（B16-Luc）细胞,MTT比色法和Annexin V/PI双标记法分别检测细胞增殖活性及凋亡;BALB/c小鼠腋下接种B16-Luc细胞制备荧光黑色素瘤动物模型,腹腔注射4和8 mg/kg As2O3治疗25天,小动物光学活体成像系统连续动态观察肿瘤生长;治疗末期处死动物、剥离肿瘤块、制片,HE和CD34免疫组化染色观察肿瘤病理和新生微血管形成。结果：1.0~32.0μmol/L As2O3体外显著抑制B16-Luc细胞增殖和诱导其凋亡。活体成像技术观察显示As2O3在体内剂量依赖性地抑制小鼠B16-Luc恶性黑色素瘤的生长,肿瘤组织中新生微小血管显著减少,肿瘤组织中心呈明显坏死改变。结论：As2O3体外诱导小鼠恶性黑色素瘤B16细胞凋亡,主要通过降低肿瘤组织新生血管的形成、促使肿瘤坏死而发挥抗恶性黑色素瘤作用。
- 李楠罗旭飞李娜刘转范临兰席晓霞魏虎来
- 关键词：三氧化二砷新生血管生成
- 砂生槐水提取物对免疫抑制小鼠细胞免疫功能的影响被引量：12
- 2009年
- 探讨藏药砂生槐水提取物对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。通过小鼠腹腔注射环磷酰胺建立免疫抑制动物模型,应用砂生槐水提取物对免疫抑制小鼠进行治疗,采用MTT比色法检测免疫抑制小鼠T淋巴细胞增殖和放免法测定其血清IL-2和TNF-α水平。结果表明:与模型对照组比较,砂生槐水提取物三个剂量组均可协同ConA促进免疫抑制小鼠T淋巴细胞的增殖(P<0.01),同时提高免疫抑制小鼠血清IL-2、TNF-α的水平,尤其2.4g/kg·d剂量组的IL-2、TNF-α水平升高较为明显(P<0.05)。提示砂生槐水提取物可以增强免疫抑制小鼠的T细胞免疫功能。
- 田卫花马兴铭刘英安方玉郭君雒艳萍
- 关键词：砂生槐免疫抑制淋巴细胞
- 新型非病毒载体O-CHCS携带HBD2转染L929细胞及表达产物活性检测
- 2011年
- 目的研究O-胆甾醇基壳聚糖(O-CHCS)作为基因载体进行人β防御素-2(HBD2)基因转染小鼠纤维母细胞L929的可行性及检测目的基因表达产物的生物活性。方法构建重组质粒pCMV-hBD2,通过O-CHCS介导转染于L929细胞,提取转染细胞总RNA,用RT-PCR检测HBD2基因转录水平;收集转染细胞培养上清液,用Westernblotting检测HBD2基因蛋白的表达;用Kirby-Bauer纸片法检测HBD2抗菌活性,同时以Lipofect脂质体转染试剂作为阳性对照。结果经过O-CHCS介导转染的L929细胞,目的基因HBD2在转录水平和蛋白水平均有表达,转染细胞上清液对金黄色葡萄球菌有抑菌圈形成,结果同Lipofect的转染效果基本一致。结论成功构建了真核表达载体pCMV-hBD2,证实了O-CHCS可以作为基因载体用于目的基因HBD2的转染,且目的基因表达产物具有生物活性,为基因工程合成HBD2提供一条经济便捷的途径。
- 崔南房晓楠张妮陈名懋李学敏陈新年
- 关键词：人Β-防御素-2非病毒载体
- 凝胶渗透色谱-多角度激光散射联用技术研究红芪多糖中4个组分分子特征被引量：20
- 2012年
- 目的:测定红芪多糖3(HPS-3)中4个组分的绝对分子量,相对分子质量分布,均方根旋转半径(Rg),多分散系数(Mw/Mn)等分子特征参数,以均方根旋转半径(Rg)对重均分子量(Mw)作图,计算4个组分在溶液状态的构象。方法:采用凝胶渗透色谱-多角度激光散射(GPC-MALLS)联用技术,流动相为含0.02%NaN3的0.1 mol.L-1NaNO3溶液,Ultrahydro-gelTM1000,500色谱柱串联。结果:HPS-3的4个组分中,HPS-3-C的Mw最大(1.986×105g.mol-1);其次为HPS-3-B(1.113×105 g.mol-1)和HPS-3-D(8.457×104 g.mol-1);HPS-3-A的Mw最小(1.223×104 g.mol-1),而Rg最大(55.5 nm)。HPS-3-D相对分子质量分布范围最广,Mw/Mn 2.543。在流动相中,HPS-3-A为球型构象,HPS-3-C为无规则线团构象,HPS-3-B和HPS-3-D则均为高枝化度结构。结论:为进一步研究HPS-3中4个组分分子特征与其生物活性的关系提供必要依据。
- 陈同强ADILBEKOV J王娟沈孝丽石义凯胡芳弟封士兰
- 关键词：红芪多糖凝胶渗透色谱分子特征
