四川大学华西基础医学与法医学院法医物证学教研室 作品数:56 被引量:228 H指数:9 相关作者: 陈国弟 苟航 陈骁 宋燕华 李莹 更多>> 相关机构: 安徽理工大学医学院 汕头大学医学院法医学教研室 汕头大学医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 四川省应用基础研究计划项目 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 政治法律 生物学 文化科学 更多>>
哺乳动物同性生殖研究历程及应用前景 2023年 繁殖是所有生命形式的基础,同性生殖作为一种特殊的繁殖方式存在于自然界中。同性生殖包含孤雌生殖和孤雄生殖,在哺乳动物中尚未被发现。印记基因等表观遗传机制的存在阻碍了同性生殖胚胎发育。目前利用基因编辑已成功培育出双母系小鼠(Mus musculus domesticus)、单母小鼠和双父系小鼠,双母系小鼠和单母小鼠可正常发育并繁殖后代,双父系小鼠可存活48h。本文综述了哺乳动物同性生殖相关技术以及探究历程,总结了同性生殖技术的应用前景与发展方向。 顾浩宇 黄章龙 罗海玻 宋凤关键词:孤雌生殖 大鼠早期心肌缺血干燥综合征抗原B基因及其蛋白的表达 2013年 目的探讨干燥综合征抗原B基因(SSB)及其蛋白在大鼠早期心肌缺血组织中的表达。方法健康SD大鼠随机分为手术组、非手术对照组和假手术组,根据缺血时间分为0min、15min、30min、60min、120min和240min亚组,依据缺血部位将手术组又分为心肌缺血组和心肌非缺血组。手术组每亚组6只大鼠,非手术对照组及假手术组中的每亚组4只。通过实时荧光定量PCR测定每个样本SSB基因的表达水平,运用Western blot和免疫荧光技术检测SSB蛋白的表达。结果 SSB基因表达在急性心肌缺血早期呈下调趋势,心肌缺血120min组SSB mRNA表达降低,与0min组及非手术对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);与心肌缺血0min组相比,SSB蛋白在心肌缺血60min组的组织中的表达降低(P<0.05);心肌缺血60min和120min,SSB蛋白在非缺血组中的表达高于缺血组(P<0.05)。缺血心肌组织中,SSB蛋白主要位于心肌细胞核,胞浆及部分心肌细胞的细胞膜上也有少量表达。结论 SSB在急性心肌缺血后呈现差异性表达,可能参与早期缺血心肌的病理生理过程。 陈天义 高林波 梁伟波 周斌 薛晖 王艳云 刘云 张录顺 宋雅平 张林关键词:实时荧光定量PCR 免疫印迹 Basigin mRNA在早期缺血心肌和非缺血心肌的表达变化 2010年 目的探讨Basigin mRNA在早期心肌缺血大鼠模型缺血心肌(EI M)和非缺血心肌(NI M)中的表达及意义。方法以β-actin为内对照,应用real-ti me PCR方法检测0 min、15 min、30 min、60 min早期缺血心肌和非缺血心肌Basigin mRNA的表达情况。结果EI M、NI M、假手术(SO)组心肌和非手术组心肌Basigin mRNA表达在0 min差异没有统计学意义(P>0.05)。EI M组在心肌缺血15 min、30 min和60 min较0 min时Basigin mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.001),NI M组和SO组在不同时间段之间差异无统计学意义(P>0.05);EI M组和NI M组在30 min、60 min时Basigin mRNA表达的差异有统计学意义(P<0.05)。结论Basigin在缺血30min参与心肌的病理生理过程,Basigin在鉴定早期心肌缺血死亡的案例中有十分重要的法医学意义。 刘云 高林波 梁伟波 潘新民 王艳云 薛晖 陈天义 张录顺 朱怡 张林关键词:BASIGIN MRNA REAL-TIME PCR EB病毒重组Rta蛋白在胃癌组织中表达的研究 被引量:1 2007年 目的研究EB病毒Rta蛋白在胃癌组织中的表达情况,研究裂解期EB病毒与胃癌的关系。方法采用免疫组织化学方法,应用Rta多克隆抗体检测30例手术切除胃癌组织及其相应癌旁组织中EB病毒BRLF1基因产物Rta蛋白的表达水平与分布情况。结果30例胃癌组织中发现6例R ta蛋白表达阳性,阳性率为20%,相应癌旁组织均为阴性,p=0.031,有显著性差异;Rta蛋白表达阳性率男性多于女性,p=0.024;与病人年龄、病理组织学类型及发生部位之间无明显关系,p=0.196-0.896。结论EB病毒的裂解感染状态与胃癌的发生具有一定相关性,裂解感染期EBV可能在胃癌的发病中起了一定作用。 董晖 梁伟波 朱银华 张蓓蕾 江华 张林关键词:胃癌 EB病毒 免疫组织化学 MEK/ERK和PI3K/AKT信号通路抑制剂在诱导恶性黑色素瘤细胞凋亡中的协同作用 被引量:1 2014年 目的通过联合抑制MEK和AKT信号通路关键靶点分子,探讨克服细胞耐药性的靶向治疗方法。方法体外培养和新鲜分离恶性黑色素瘤细胞株,分别在0.5%和5%血清浓度下单独或同时抑制靶点MEK(U0126,20μmol/L)和AKT(LY294002,20μmol/L),MTT法检测细胞增殖,PI染色流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果当培养液血清浓度从0.5%提高到5%时,U0126和LY294002对肿瘤细胞增殖的抑制效应明显降低。LY294002以抑制细胞增殖为主,U0126主要诱导细胞凋亡,二者作用效果与细胞是否具备该通路关键靶点活化变异无关。联合用药时诱导细胞凋亡普遍增强,LY294002和U0126具有协同效应。结论联合抑制MEK/ERK和PI3K/AKT信号通路可较好地克服恶性黑色素瘤细胞的耐药性。 王馨苑 承尧 杜吉佩 陈德高 杨雪杉 杨志梅 黄宁关键词:MEK ERK P13K EB病毒GST-Rta融合蛋白的表达、纯化及其多克隆抗体的制备 被引量:6 2005年 目的表达和纯化EB病毒的重组融合蛋白谷胱氨肽S转移酶(GST)-Rta185和GST-Rta150,并制备特异性多克隆抗体。方法质粒表达载体pGEX-R185I、pGEX-R150I和pGEX-5X-3分别转入大肠杆菌BL21(DE3)中,异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用GlutathioneSepharose4B亲和层析柱纯化目的蛋白。将纯化后的GST-R185、GST-R150和GST蛋白免疫新西兰大白兔制备抗血清。结果在细菌裂解液中检测到高表达量的融合蛋白,经GlutathioneSepharose4B亲和层析柱纯化获得较高纯度的GST-Rta融合蛋白。应用Westernblot和ELISA方法检测证实,用纯化的GST-Rta蛋白免疫家兔得到了特异性的多克隆抗体。结论通过上述方法制备出来的融合蛋白纯度较高,免疫家兔获得的多克隆抗体具有良好的特异性,为研究EB病毒Rta蛋白及与EB病毒相关疾病的诊断和治疗提供了重要的条件。 徐永春 梁伟波 苟航 陈文婕 朱银华 贾静 张林关键词:融合蛋白 多克隆抗体 EB病毒 中国汉族群体中PDCD1基因多态性与结直肠癌的相关性 被引量:1 2018年 目的探讨程序性细胞死亡受体1( programmed cell death 1,PDCD1)基因多态性与结直肠癌的发生发展的关联性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP)方法对426例结直肠癌患者及500名正常个体的rs36084323、rs11568821、rs2227981、rs2227982和rs10204525位点进行多态性分析。结果rs36084323位点G等位基因在显性遗传模型下与TNM分期进展期结直肠癌的发生正关联(OR=1.59,95%CI:1.02~2.48)。rs36084323、rs11568821、rs2227981、rs2227982和rs10204525位点组成的单倍型G-G-C-T-A和A-G-C-C-G与结直肠癌的发生负关联。结论PDCD1基因rs36084323位点AG和GG基因型与TNM分期进展期的结直肠癌存在正关联。而G-G-C-T-A和A-G-C-C-G单倍型与结直肠癌的发生负关联。 赵苑村 毛志刚 庞华 赵小红 张姝 高泽华 杨以文 方婷 马其钊 马晓丹 王玉芳 张霁关键词:结直肠癌 单核苷酸多态性 单倍型 PDGF-B在闭合性脑损伤组织中的表达 被引量:2 2005年 目的 了解闭合性脑损伤后 PDGF- B的表达变化。方法 制备液压冲击脑损伤大鼠模型 ,应用免疫组化技术观察大鼠脑损伤后不同时间 PDGF- B的表达情况 ,并应用图象分析仪进行分析。结果 脑损伤后 1hPDGF- B表达上调 ,4~ 7d达高峰 ,14 d时仍高于对照组。结论 液压冲击脑损伤后 PDGF- B表达上调 ,且呈一定的时序性变化规律 。 李雷波 陈晓刚 刘敏 张林 王世春 廖志钢 何桂琼关键词:液压冲击脑损伤 法医病理学 鼻咽癌患者IL-8和IFN-γ基因多态性的研究 被引量:1 2007年 目的研究IL-8和IFN-γ基因多态性在鼻咽癌(NPC)患者中的频率分布,并分析其与NPC的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)分析105例NPC患者和109例健康对照者IL-8基因-251(A/T)位点的基因多态性;应用聚合酶链反应、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术检测两组人群中IFN-γCA短串联重复序列多态性。分析两位点多态性与NPC的关系。结果NPC组IL-8-251(A/T)位点基因型、等位基因频率与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);NPC组IFN-γ(CA)n13等位基因频率低于对照组,差异具有统计学意义(χ2=5.878,P=0.015),其基因型(CA)13+/(CA)13+、(CA)13+/(CA)13-和(CA)13-/(CA)13-在两组人群中的分布也有差异(χ2=15.181,P=0.001)。结论在研究人群中未发现IL-8-251(A/T)位点多态性与NPC相关;IFN-γ(CA)n13等位基因与NPC具有相关性,提示IFN-γ重复序列基因多态性可能在决定鼻咽癌遗传易感性方面有一定意义。 泰淑红 韦叶生 王鹏 周斌 冉鹏 杨志惠 张林关键词:鼻咽癌 干扰素-Γ 白细胞介素-8 基因多态性 增强型绿色荧光蛋白基因真核表达载体的构建 被引量:10 2005年 构建增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)基因的真核表达载体pCDNA3.1(+) EGFP,转染至培养的Hela细胞中成功表达,并发出绿色荧光,证明EGFP一种良好的报告基因和筛选标记. 徐洁杰 张伟娟 王浩明 胡火珍关键词:真核表达载体 转染 HELA细胞