中南民族大学生命科学学院医学生物研究所 作品数:43 被引量:64 H指数:4 相关作者: 杨潇 徐浩 张婷 马云飞 姜秋菊 更多>> 相关机构: 华中农业大学动物科技学院 华中农业大学动物科学技术学院农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室 华中农业大学动物科学技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖北省自然科学基金 中央高校基本科研业务费专项资金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 农业科学 更多>>
siRNA沉默DNA甲基化转移酶1基因干扰胎牛成纤维细胞增殖和凋亡(英文) 被引量:1 2018年 为阐明Dnmt1-siRNA对胎牛成纤维细胞(FBFCs)的影响,设计了3种针对Dnmt1的siRNA来转染FBFCs.结果显示:Dnmt1-siRNA3转染FBFCs 24,48,72 h后,Dnmt1 mRNA表达水平显著降低(P<0.01).在转染后48 h,siRNA3对Dnmt1抑制效率达到近80%,Dnmt1-siRNA3处理的FBFCs增殖也受到显著影响,FBFC细胞活力下降、处于G0/G1过渡期细胞数量增多(P<0.05).但Dnmt1-siRNA3组FBFC细胞的凋亡率也显著增加(P<0.05).说明通过Dnmt1特异性siRNA能够有效地敲低FBFC中的Dnmt1 mRNA表达量,由于细胞周期分布变化,siRNA处理后FBFC作为核供体能提高SCNT的效率. 于孟飞 王文璐 易建明关键词:凋亡 细胞周期 供体细胞 RNA干扰 Linifanib和Tivozanib对肺癌细胞增殖的影响 被引量:4 2017年 为探讨小分子化合物Linifanib和Tivozanib对肺癌细胞A549和H358增殖的影响,以不同浓度Linifanib和Tivozanib预处理细胞48 h,用MTT法检测了细胞存活率,并通过流式细胞仪检测了细胞周期和凋亡情况,用RT-PCR检测了肿瘤抑制因子P21的mRNA表达量.结果表明:Linfanib和Tivozanib能抑制肺癌细胞的增殖,呈现剂量依赖性.Linifanib能诱导细胞凋亡,同时引起细胞周期在G2/M期阻滞.Tivozanib主要引起细胞周期在G2/M期阻滞.Linifanib和Tivozanib均能引起A549和H358细胞中P21的mRNA表达量显著升高,说明Linifanib和Tivozanib能抑制肺癌细胞A549和H358的增殖. 沈金花 陈剑霖关键词:小分子化合物 肺癌细胞 增殖 PTPMT1稳定敲减细胞株的建立及其表型分析 2020年 为进一步研究基因PTPMT1在肺癌细胞中的功能,利用CRISPR/Cas9系统建立了基因PTPMT1敲减的肺腺癌人类肺泡基底上皮细胞(A549)细胞株,并对基因敲减细胞株进行了一系列表型研究.结果表明:在A549细胞中基因PTPMT1的减少会导致细胞生长减缓.在非同步化的条件下,敲减细胞株和野生型细胞株的细胞周期并无明显变化,但在敲减细胞中细胞周期相关蛋白P27的mRNA水平显著升高. 沈金花 陈春发关键词:细胞增殖 CRISPR/Cas9技术制备S100A9基因编辑小鼠及表型研究 被引量:3 2021年 S100钙结合蛋白A9 (S100 calcium binding protein A9, S100A9)参与多种炎症反应及肿瘤细胞的迁移和侵袭调控等生物学过程。本研究目的是利用CRISPR/Cas9技术构建S100A9基因编辑小鼠,为探讨该基因生物学功能提供动物模型。根据S100A9基因序列构建针对外显子2和3的单链小向导RNA(smallguideRNA,sgRNA),体外转录后,通过显微注射将Cas9mRNA和候选sgRNA混合物注射到小鼠受精卵中,体外培养获得早期胚胎并移植到代孕小鼠,所获F0小鼠经PCR鉴定和基因测序鉴定其基因型。F0小鼠进一步与野生型C57BL/6小鼠测交获得F1杂合子小鼠,再通过F1小鼠自交获得纯合子后代,并利用real-timePCR、Western blot及免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)等方法验证S100A9表达和分布情况;构建鸡卵清白蛋白(ovalbumin from chicken egg white, OVA)激发的过敏性哮喘模型,HE染色观察小鼠肺组织病理变化。结果显示,本方法成功敲除S100A9基因2、3外显子2 492 bp,并获得能稳定遗传的S100A9^(-/-)小鼠。S100A9基因在野生型小鼠的肺和脾脏中高表达,而在S100A9^(-/-)小鼠肺和脾脏中未检测到S100A9 mRNA和蛋白的表达;在表型方面,S100A9^(-/-)小鼠在生长、繁殖及发育方面未表现出明显的缺陷,但在OVA处理条件下,相较于野生型小鼠,S100A9^(-/-)小鼠肺部表现出明显加重的炎症表型,且支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中嗜酸性粒细胞的占比显著升高。以上结果表明,本研究成功构建了S100A9基因编辑小鼠新品系,并初步证实S100A9功能缺失加重哮喘小鼠气道炎症,为研究S100A9基因功能提供了新的小鼠模型。 严珮 梁大焱 许文豪 薛璐 于孟飞 于孟飞 刘庆华 沈金花关键词:S100A9 小鼠 白鲜碱对气管平滑肌的舒张作用及机理研究 被引量:3 2020年 目的:探讨白鲜碱对异常收缩的气管平滑肌的舒张作用.方法:以80 mmol·L^-1 KCl或100μmol·L^-1 ACh预刺激气管,用生物机能系统检测气管的张力,用膜片钳技术检测离子通道电流,观察白鲜碱对气管平滑肌的影响.结果:白鲜碱能呈剂量依赖性地抑制高钾和ACh诱导的预收缩,而对静息状态下的气管无影响.且白鲜碱能阻断VDCCs电流,抑制细胞外Ca^2+内流.除VDCCs通道外,它还抑制ACh激活的其他离子通道,并抑制肌质网中的内Ca^2+释放.结论:白鲜碱具有舒张气管平滑肌异常收缩的作用,有望作为一种钙离子拮抗剂抑制气道高反应,缓解哮喘. 沈金花 韩淑慧 时顺波关键词:白鲜碱 气管平滑肌 钙离子 哮喘 苦物质:新型强效气道舒张剂 目的:研究发现苦物质具有解除气管收缩的作用[1],提示苦物质可能是哮喘等呼吸道疾病的新型气道解痉剂。然而,这需要进一步研究证实,并且其中的解痉机理需要阐明。材料与方法:实验动物为近交系雄性BALB/c小鼠。利用RT-PC... 张婷 韦命余 于孟飞 薛璐 沈金花 彭勇波 赵平 陈微微 马立群 刘庆华关键词:气道平滑肌 哮喘 离子通道 钙信号 周龄·初始注射时间对小鼠超数排卵的影响 被引量:1 2018年 [目的]探讨不同周龄、不同初始注射时间对小鼠超数排卵效果的影响。[方法]用10 IU PMSG+10 IU HCG间隔48 h处理C57BL/6J小鼠,收集并统计合子数。[结果]4周龄超排效果优于于8周龄,可达26.86枚∕只;4周龄C57BL/6J小鼠PMSG和HCG注射时间为12:00—13:00,超排后收集合子数可达30枚∕只以上,而且体外培养的发育状况良好。[结论]4周龄C57BL/6J小鼠适宜超数排卵;PMSG和HCG注射时间为12:00—13:00,超排效果相对理想。 巩雪洁 臧敦安 许文豪关键词:小鼠 超排卵 激素 周龄 氯喹抑制B细胞钙信号 目的 哮喘的发病机制与免疫反应有着非常密切的关系.苦味物质氯喹能够通过抑制钙离子信号,进而抑制脾脏B淋巴细胞的激活.然而氯喹抑制钙信号的内在机理仍然不是十分明确.方法 分离小鼠的脾脏淋巴细胞,并用Anti-B220-PE... 赵平 吴一凡 许金超 周琦 熊明睿 沈金花 彭勇波 薛璐 陈微微 于孟飞 马立群 刘庆华关键词:氯喹 B淋巴细胞 IP3受体 鸡骨香乙醇提取物舒张小鼠气道平滑肌的作用机理研究 2022年 为研究鸡骨香乙醇提取物(EECC)舒张小鼠气道平滑肌的作用机理.在组织水平上,利用生物机能系统,检测EECC对气管张力的影响.在细胞水平上,利用膜片钳系统,记录EECC对L型电压依赖性钙通道(VDLCCs)电流的影响.在活体水平上,利用肺功能仪,检测EECC对小鼠呼吸系统阻力(Rrs)的影响.实验发现在组织水平上,EECC能剂量依赖性地舒张由高钾或ACh诱导预收缩的小鼠气管,但对静息状态下的正常气管没有影响.EECC可以阻断VDLCCs和其他离子通道,从而抑制细胞外钙内流及肌浆网中的钙释放.在细胞水平上,EECC可以阻断VDLCCs电流.在活体水平上,EECC能够显著降低小鼠的Rrs.实验结果提示鸡骨香中的药效成分可以有效舒张过度收缩的气道平滑肌,鸡骨香有望用于缓解或治疗哮喘. 姚凤杰 曾晓月 沈金花关键词:气道平滑肌 哮喘 干扰素调节因子的研究进展 被引量:12 2014年 指出了干扰素调节因子(IRFs)是一类在干扰素(IFN)信号通路中起重要调控作用的多功能转录因子,目前已经发现10个IRFs成员,它们在IFN的诱导、病毒防御、免疫调节、细胞分化、细胞生长与凋亡和许多疾病的调节中具有重要作用.对IRFs的结构、IRFs在免疫系统、细胞分化、细胞凋亡和相关疾病如肿瘤、系统性红斑狼疮中的功能作了综述. 沈金花 吕印 刘庆华关键词:干扰素调节因子 疾病