西北大学生命科学学院组织工程实验室
- 作品数：8 被引量：22H指数：3
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- 相关机构：第四军医大学口腔医学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 机械牵张应力刺激成骨细胞的差异蛋白质组学研究被引量：9
- 2010年
- 目的应用蛋白质组学方法分析人成骨样细胞Saos-2在牵张应力作用下蛋白质表达的差异,为更全面地阐明成骨细胞对牵张应力的反应机制提供分子基础。方法将Saos-2分为加力组与对照组,采用Flexcell牵张应力加载系统,用12%大小的应力值进行力学刺激24 h后,应用蛋白质双向凝胶电泳分离蛋白样品,质谱技术鉴定差异表达蛋白点,并用生物信息学分析差异蛋白参与的生物学过程和主要功能。结果对照组和加力组分别得到(1031±41)和(928±25)个蛋白质点,质谱鉴定出肽酰脯氨酰异构酶A样3、线粒体ATP合成酶、抗氧化蛋白1、丝切蛋白1、蛋白磷酸酶1、延伸因子2等17个表达增高的差异蛋白质,涉及应激反应、能量代谢、细胞增殖、细胞骨架重建、信号转导及成骨分化等生物学功能。结论成骨细胞在机械牵张应力作用下蛋白表达发生显著变化,这些差异蛋白参与了成骨细胞力学反应机制的不同过程。
- 李菲菲丁寅冯雪王欢陈富林李立文
- 关键词：成骨细胞蛋白质组学信号转导
- 糖基化对斑马鱼发育及再生作用的研究进展
- 2017年
- 对有机体发育和再生的研究一直是生命科学领域探索热点之一,斑马鱼由于具有发育速度快、胚胎透明便于观察以及其尾鳍、心脏、神经系统等组织器官可以再生等众多优点,已经成为应用最为广泛的模式生物之一.在斑马鱼发育及再生过程中,细胞发生增殖、分化、形态建成等代谢活动,而对其中调控机制的研究尚未完全明确,对其深入探究的意义不言而喻,可以为很多疾病的认识治疗、组织工程的发展奠定理论基础.研究已经表明,在此过程中,有很多蛋白质参与发育及再生的调节,而蛋白质糖基化是重要的蛋白质翻译后修饰,糖基化的变化会影响细胞识别、黏附、信号传导等,从而导致炎症、肿瘤等恶性疾病的发生.近年来,糖组学的发展为发育生物学和再生医学提供了新的思路和研究成果,本文就糖基化变化在斑马鱼的发育过程中发挥的作用做一综述,并对今后它对再生过程的作用进行展望.
- 贾丽苑冯娟涛崔继红
- 关键词：斑马鱼糖基化发育
- 高原低压低氧环境对大鼠骨形态和微结构的影响研究
- 2022年
- 目的:研究长期暴露在高原低压低氧环境下大鼠骨形态和微结构的变化,探讨低压低氧环境对大鼠骨骼发育的影响。方法:将16只10周龄的SD大鼠按照体质量随机分为对照组和低压低氧组,每组8只。低压低氧组大鼠每天在低压低氧模拟氧舱中处理22 h,连续处理6周;对照组放置在正常大气压下,不作其他处理。实验过程中实时监测并记录大鼠的进食、体质量。使用游标卡尺测量右侧股骨长度;采用Micro-CT扫描测定大鼠右侧股骨远端干骺端皮质骨和骨小梁的微结构;计算骨组织的骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)和骨小梁的分离度(Tb.Sp)。使用SPSS 22.0软件进行统计学分析。结果:低压低氧处理2周到实验结束,低压低氧组大鼠的体质量始终小于对照组(P<0.05);低压低氧处理1周到实验结束,低压低氧组大鼠的进食量始终少于对照组(P<0.05);低压低氧组大鼠股骨长度及BV/TV、Tb.N、Tb.Th均显著小于对照组(P均<0.01),Tb.Sp大于对照组(P<0.01)。Micro-CT三维重建结果显示低压低氧组骨小梁的微结构受损,骨量明显降低,空间排列疏松、空隙较大,而对照组骨小梁骨量正常,空隙较小且均匀。结论:长期暴露于低压低氧环境下会损害机体的健康,影响骨骼的生长发育,造成骨骼功能障碍。
- 郝晓霞王丹丁元钧罗二平景达
- 关键词：低压低氧骨形态骨微结构骨损伤骨骼发育
- 活化转录调控因子2(ATF-2)在下颌骨髁突软骨细胞中调控bcl-2机制的研究被引量：3
- 2009年
- 目的:研究ATF-2通过bcl-2影响髁突软骨生长发育的机制。方法:应用体外培养原代小鼠髁突软骨细胞,原代细胞基因转染,蛋白印迹杂交等技术,阐明ATF-2调控bcl-2表达的机制。结果:外源性的ATF-2在髁突软骨细胞中,与bcl-2的调控子中CRE结合,增强bcl-2调控子的活性;当CRE位点的序列改变,ATF-2不能在髁突软骨细胞中对bcl-2调控子的活性产生影响。结论:ATF-2在软骨细胞中,通过影响有凋亡抑制作用的bcl-2的活性和表达,参与下颌骨髁突软骨的生长发育。
- 马秦宋红程晓兵张浚睿陈富林吴炜毛天球
- 关键词：BCL-2下颌骨髁突软骨细胞
- CD326分子胞外区表皮生长因子样结构域融合蛋白的表达与纯化被引量：1
- 2012年
- 目的:构建含有CD326分子胞膜外区EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like1+2结构域的真核表达载体,在COS7细胞中表达相应蛋白并纯化。方法:用PCR扩增编码EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域的cDNA,插入真核表达载体pSecTag2B,脂质体法转染COS-7细胞,利用重组蛋白C端的组氨酸标签(6×His-tag)进行金属螯合亲和层析纯化,最后用SDS-PAGE和Western blot法检测纯化的包含EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域融合蛋白的纯度。结果:序列测定的结果显示含有CD326分子胞膜外区EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域序列的载体构建正确。经Ni2+-NTA树脂柱亲和层析纯化得到3种融合蛋白,相对分子质量(Mr)分别约为3 600,7 700和12 000。纯度均约为95%。Western blot检测结果显示3种融合蛋白都具有下游的c-myc表位。结论:成功构建了含有CD326分子胞外区EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域的真核表达载体,并在COS-7细胞中表达。为制备抗CD326分子不同结构域的单克隆抗体提供了免疫原。
- 蒿慧文王寅炤郑燕森谢鑫
- 关键词：真核表达
- 大鼠皮肤的冷冻干燥保存被引量：7
- 2009年
- 背景:细胞干燥保存的研究报道较多,组织器官是否适用于干燥保存,尚缺乏证据。目的:用海藻糖作为干燥保护剂,优化海藻糖载入大鼠皮肤的条件,探索皮肤干燥保存的可行性。设计、时间及地点:观察性实验,于2007-11/2008-11在西北大学生命科学学院组织工程实验室完成。材料:体质量150g左右成年SD大鼠。海藻糖由Sigma公司提供。方法:通过控制海藻糖浓度(50,300,500,800,1000mmol/L)、负载时间(0.5,4,7,9h)和温度[4℃、4～37℃(相转变)和37℃],优化海藻糖导入大鼠皮肤的条件。将负载海藻糖的皮肤置于含100g/L二甲基亚砜的DMEM冷冻液中孵育,程序冷冻仪以1℃/min的速率降温至-80℃后移入冷冻干燥机中进行冻干。将冻干皮肤水化复苏后分别用双醋酸羧基荧光素(CFDA)、四甲基偶氮唑盐(MTT)检测皮肤活性,并以新鲜和甲醛固定皮肤的吸光度值作为阳性和阴性对照。以苏木精-伊红染色和观察皮肤组织结构,并进行自体移植。主要观察指标:海藻糖在不同加载浓度、孵育温度和时间载入大鼠皮肤的情况。冻干皮肤水化后的形态学、组织学变化及其自体移植后存活情况。结果:海藻糖浓度小于800mmol/L,皮肤的海藻糖载入量随海藻糖浓度的升高而明显增(P<0.05),浓度大于800mmol/L,海藻糖载入量差异不显著。孵育温度为37℃组和相转变组皮肤海藻糖载入量明显高于4℃组(P<0.05),相转变组与37℃组差异无统计学意义。皮肤孵育4,7,9h的海藻糖载入量明显高于孵育0.5h的载入量(P<0.05),孵育时间为4,7,9h之间的海藻糖载入量差异不显著,但孵育7h后皮肤的海藻糖载入量不再增加。实验以海藻糖浓度为800mmol/L,孵育温度为37℃,孵育时间为7h为优化的负载条件处理大鼠皮肤。冻干皮肤玻璃化状态良好,呈半透明状。水化后能够恢复到新鲜皮肤的大小和色泽,组织结构和细胞形态与新鲜皮肤组织无差别。冷冻
- 杨维姜曼耿文鑫严兴荣都慧聪魏菁刘亮岐赵洁李立文陈富林
- 关键词：皮肤海藻糖冷冻干燥自体移植
- 马郁兰精油对大鼠力竭游泳导致的运动性疲劳不具有改善作用被引量：1
- 2023年
- 目的探究马郁兰精油是否具有减轻运动性疲劳的作用及其机制。方法雄性SD大鼠随机分为负重强迫游泳组(WL-FST)和负重强迫游泳+马郁兰精油处理组(WL-FST+MEO),并进行2周负重游泳训练。马郁兰精油通过雾化方式吸入,剂量为4μL/h。测量大鼠血压、心率(HR)、抓力、力竭时间、行为学和心肌细胞线粒体形态,并测定力竭游泳后血清中葡萄糖(GLU)、游离脂肪酸(FFA)、肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的水平。结果与WL-FST组相比,WL-FST+MEO组大鼠舒张压和HR下降(P<0.05,P<0.01)、力竭时间缩短(P<0.01),而抓力和收缩压无显著差异(P>0.05)。旷场实验表明WL-FST+MEO组大鼠中央区域移动距离和滞留时间显著低于WL-FST组(P<0.05)。两组大鼠血清GLU、FFA、CK和LDH活力之间无显著性差异(P>0.05)。与WL-FST组相比,WL-FST+MEO组大鼠心肌细胞线粒体中出现嵴间隙增宽、断裂或溶解呈空泡状的表征更明显。结论实验结果提示,马郁兰精油不能改善大鼠力竭游泳导致的运动性疲劳。马郁兰精油可降低运动性疲劳大鼠的血压和HR,但对运动导致的疲劳大鼠焦虑样行为和心肌损伤无改善作用。
- 张伟周嘉恒胡扬蔡文泳李庆喆杨红燕张衍鹏董玲
- 关键词：运动性疲劳游泳线粒体
- 诱导性多能干细胞重编程技术的发展被引量：1
- 2015年
- 近年来,研究者已经能通过重编程技术从多种物种与组织中获得具有多能性的干细胞系,被称为诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs)。这种细胞或可被应用于生物学及医学等多个领域,如疾病模型、自体细胞治疗、药物毒性筛选及相关基础研究。自2006年第一批i PSCs诞生以来,研究者致力于改进原始诱导方法以获得更高的诱导效率并降低诱导引起的基因组不稳定性。为了使读者能够更好地理解i PSCs的重编程技术,本文归纳总结了近年来已经使用过的一些主要诱导手段,并介绍了其优劣之处。这些研究成果均为今后i PSCs应用于临床实验奠定了坚实的理论基础。
- 张婧崔继红
- 关键词：诱导性多能干细胞重编程
