河南省微生物工程重点实验室 作品数:111 被引量:479 H指数:11 相关作者: 刘安邦 赵俊杰 贾蕴莉 贾蕴丽 刘德海 更多>> 相关机构: 河南省科学院 中国科学院 河南农业大学 更多>> 发文基金: 河南省科技攻关计划 国家自然科学基金 河南省重大公益性科研项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
黑曲霉β-甘露聚糖酶ManA耐热突变体的筛选 被引量:3 2022年 为了改造黑曲霉(Aspergillus niger)来源的β-甘露聚糖酶ManA,获得耐热性高的突变体。利用易错聚合酶链式反应(PCR)技术对构建的表达质粒pGAPZαA-manA进行随机突变,将突变文库转化至毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,表达筛选耐热性高的突变体,并进一步对突变位点进行定点突变,筛选其他耐热性高的突变体。结果表明,ManA的H283R与H283K突变体相对于野生型在耐热性方面有显著提升,75℃加热30 min其相对酶活由26.66%分别提升至76.95%和83.57%;在pH 3.0~9.0的条件下,50℃保存24 h,H283K突变体与野生型的相对酶活均在90%以上,H283R突变体在pH 3.0时的相对酶活下降到了84.72%,两个突变体的最适温度、pH及比酶活与野生型没有明显差异。说明β-甘露聚糖酶ManA的283位组氨酸(H283)对其耐热性较为关键,将该位点突变为精氨酸(R)和赖氨酸(K)时,ManA的耐热性得到显著提升。 李珊珊 刘德海 刁文涛 陈晓飞 权淑静关键词:甘露聚糖酶 易错PCR 定点突变 多环芳烃降解菌的筛选及降解特性分析 被引量:5 2022年 为了获得耐受各种不良环境的多环芳烃(PAHs)降解菌,利用多环芳烃(菲和芘)、重金属(Cu^(2+)、Cr^(6+))以及氮源缺乏培养基从南阳石油污染土壤中分离筛选一株耐受不良环境的菲芘降解菌,通过形态学特征和分子生物学方法鉴定菌株,并研究菌株对重金属Cr^(6+)和Cu^(2+)、氮源缺乏及酸碱的耐受程度,进一步探究在这些不良环境下菌株对多环芳烃菲和芘的降解效果。结果表明,菌株属于根瘤菌属,命名为F3-1。在液体培养基中,菌株F3-1对重金属Cr^(6+)和Cu^(2+)的耐受质量浓度均为20 mg/L;在氮源缺乏的情况下,菌株能够正常生长;菌株F3-1在pH 5.0和pH 7.4环境下均可以正常生长;菌株F3-1在不良环境下对多环芳烃菲和芘均有很好的降解效果,5 d后在pH 7.4条件下对菲(50 mg/L)的降解率为35.54%,在pH 5.0条件下对芘(50 mg/L)的降解率为53.43%。 甄静 李磊 王继雯 杨文玲 杜志敏 李亮亮 巩涛关键词:降解 根瘤菌 多环芳烃 一株基因克隆干扰菌的鉴定及其发酵液降解DNA活性分析 2016年 旨在寻找导致基因克隆失败的原因,检测整个电泳环境中是否存在对DNA有强降解力的菌株。依据菌体形态,革兰氏反应以及16S rDNA序列对DNA降解菌株进行鉴定,琼脂糖凝胶电泳分析菌株对DNA的降解活性。结果显示,从DNA电泳槽中分离到了一株菌,革兰氏染色鉴定为阴性菌,对该菌进行液体培养,利用质粒pUC19作为底物,检测该菌发酵液对DNA的降解能力,发现该菌发酵液能够迅速并彻底地降解DNA,其最佳降解温度为45℃,将该菌命名为DD(DNA degrading)。对该菌的16S rDNA进行测序比对后,发现其与粘质沙雷氏菌(Serrtia marcescens)的16S rDNA序列同源性高达100%。结合菌体形态,革兰氏反应以及16S rDNA序列结果,DD菌株为一株粘质沙雷氏菌,DNA降解活性分析显示其具有很强的DNA降解能力。 刁文涛 王雪妍 陈晓飞 冯菲 宁萌 周伏忠关键词:DNA降解 粘质沙雷氏菌 固定化菌株在土壤中的繁殖释放及性能分析 被引量:1 2016年 不同条件下固定化菌株在土壤中的释放情况存在差异,本试验测定固定化枯草芽孢杆菌在不同条件土壤中的释放及其降解特性。设定不同温度、水分、pH测定固定化枯草芽孢杆菌在灭菌土壤中的释放情况,并分别测定菌株的固氮、解磷、解钾性能。结果表明:固定化菌株在温度35℃和40℃、含水量为50 m L/100 g、pH 5-8时均能大量繁殖释放,固定化后不同温度和水分条件不影响其降解特性。该研究结果为固定化菌株在农业复合微生物肥料上的应用提供理论基础。 甄静 李冠杰 王继雯 杨文玲 巩涛 慕琦关键词:固定化 水解氮 有效磷 速效钾 有机磷降解菌的分离筛选及初步鉴定 被引量:12 2011年 目的:从不同根系土壤分离筛选高效降解有机磷的细菌.方法:通过平板法进行初筛,根据水解圈直径和菌落直径比值大小筛选到水解圈直径和菌落直径比值较大的菌株,进一步通过液体摇瓶培养复筛,对其解磷能力进行了测定,并通过形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列测定等一系列试验对其进行鉴定.结果:分离纯化出10株解磷菌,经平板法初筛出6株水解圈直径和菌落直径比值较大的菌株,最后复筛出1株分解有机磷能力较强的菌株XK-1,解磷能力达22.072mg/L.该菌株鉴定为枯草芽孢杆菌.结论:成功分离出一株解有机磷能力较强的枯草芽孢杆菌XK-1. 王继雯 甄静 谢宝恩 刘莹莹 李冠杰关键词:有机磷 解磷菌 纳豆激酶固态发酵的参数优化 被引量:7 2011年 方法:在对实验室分离的纳豆激酶产生菌进行菌株鉴定及其酶学性质研究的基础上,对影响菌株固态发酵产酶的工艺参数进行了优化研究。结果:发酵温度、发酵时间及培养基碳氮比、料水比、pH对纳豆激酶的产生都有较大影响,而接种量对纳豆激酶影响较小;在优化条件下,纳豆激酶固态发酵酶活可达到8 300U/g,为已知最高纳豆激酶单位酶活。 周伏忠 陈晓飞 陈国参 谢宝恩 宁萌关键词:纳豆激酶 固态发酵 酶活性 玉米浆液贮运过程中常见杂菌的鉴定与分析 被引量:2 2011年 玉米浆是玉米淀粉加工过程中生成的一种重要的工业副产品.本研究对玉米浆液贮运过程中常见的杂菌污染情况进行了分离、鉴定和分析研究;结果表明,玉米浆液贮运过程中的主要杂菌以芽孢杆菌和酵母菌为主,其中芽孢杆菌有7种,分别是凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、栗褐芽胞杆菌(Bacillus badius)、球形芽孢杆菌(Lysinibacillus)、多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)、蔬菜芽孢杆菌(Bacillus oleronius)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilus)和Rummeliibacillus stabekisii(一种芽孢菌);酵母菌有2种,它们是酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和鲁氏酵母(Saccharomyces rouxii)等. 周伏忠 陈晓飞 常丽 孙玉飞 耿庆锋关键词:玉米浆 芽孢杆菌 酵母菌 耐铅铬小麦品种的筛选及对土壤铅铬积累作用的影响 2020年 为了筛选对铅铬污染耐受的小麦品种以及探究其对土壤铅铬积累作用的影响,通过盆栽试验,将混合有菌渣的土壤加入一定量的铅铬溶液,使铅铬在土壤中的质量比分别为1000、300 mg/kg,混匀平衡60 d后,种植郑麦103、温麦19、矮抗58、秋乐168、秋乐2122、豫保1号6个不同品种的小麦.发芽并生长15 d后,对其进行相关指标测定.结果表明,6个试验小麦品种均可以耐受铅铬胁迫.其中,秋乐168最具有生长优势;在对氮、磷、钾的利用上,郑麦103和温麦19对氮、磷有着更多的营养需要,秋乐168和秋乐2122则更偏向于吸收更多的钾;在对土壤中铅铬积累情况上,6个试验小麦品种均可以缓解重金属铅铬的积累.矮抗58可以有效地阻止土壤中铅的持续积累.温麦19对C(rⅥ)的转化相比于其他5个小麦品种具有明显的优势. 雷高 李珊珊 王佰涛 杜志敏 杨文玲关键词:小麦 土壤重金属 高效降解有机磷农药真菌的分离鉴定及其特性研究 被引量:5 2011年 从有机磷农药严重污染的土壤中分离筛选出有机磷农药高效广谱降解真菌,并对其进行鉴定及降解特性研究。通过有机磷农药驯化培养、形态学和生理生化特性及其18SrDNA序列分析等试验对其进行初步鉴定,研究外界因素初始pH、培养温度、氧化乐果初始浓度等对降解菌的生长量和降解能力的影响。通过驯化分离筛选等过程从污染土壤中筛选到2株可以在高浓度氧化乐果环境下生长的真菌J4和J6,它们经生理生化和18SrDNA序列测定初步鉴定均为黑曲霉(Aspergillusniger)。研究发现,J4和J6菌株在氧化乐果初始浓度1000mg/L,pH值分别为6.5和6.0,温度分别为30℃和28℃,摇床转速160r/min条件下,培养5天后降解菌可达到最佳生长量和降解能力,降解率可分别达77.83%和70.81%,耐受氧化乐果的最大浓度均为5000mg/L,其生长量和降解能力具有正比例相关性变化趋势;并进一步研究发现,曲霉J4和J6还具有广谱降解有机磷农药的特性。 王继雯 甄静 谢宝恩 刘莹莹 李冠杰 周伏忠 陈国参关键词:有机磷农药 氧化乐果 驯化 曲霉 降解 辐照灭菌用于纳豆激酶制剂的实验研究 2013年 对60钴γ-射线辐照前后的纳豆激酶(NK)制剂有效成分、酶活及活菌数等技术指标进行了实验研究,结果表明,不同剂量的60钴γ-射线辐照对纳豆激酶制剂中的总皂甙含量和纳豆激酶酶活影响不大,30 kGy时总皂甙含量仍可达到原始含量的105%~125%,NK酶活达到原始酶活的90%以上;纳豆芽孢杆菌、大肠菌群和金黄色葡萄球菌等活菌数对60钴γ-射线辐照十分敏感,5 kGy的60钴γ-射线辐照处理后纳豆芽孢杆菌、大肠菌群和金黄色葡萄球菌数量下降99%以上. 周伏忠 冯菲 时翔明 孙玉飞 李锋关键词:活菌数 灭菌