贵州医科大学基础医学院生理学教研室
- 作品数：50 被引量：148H指数：7
- 相关作者：王宏健李勇杰杨莉更多>>
- 相关机构：武汉大学人民医院贵州民族大学化学与环境科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵阳市科学技术计划项目贵州省科技厅科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 天麻对APP/PS1痴呆小鼠模型的神经保护作用及其对衰老相关蛋白的影响
- 2023年
- 目的探讨天麻(RG)对APP/PS1双转基因小鼠脑组织衰老相关蛋白水平的影响及其神经保护作用。方法30只C57正常小鼠随机分为正常组、正常给药组;30只APP/PS1模型小鼠随机分为模型组、模型给药组;正常给药组、模型给药组灌胃给予1.5 g/(kg·d)的RG,各组小鼠6月龄时进行水迷宫实验;免疫组织化学检测脑组织内Aβ聚集;Western印迹测定脑组织中衰老相关蛋白p53、p21表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组脑组织中白细胞介素(IL)-6、IL-8表达。结果与正常组比较,模型组学习记忆能力显著降低,脑组织内Aβ斑块聚集明显增多,p21、IL-6、IL-8表达显著增加(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,模型加药组学习记忆能力显著升高,脑组织内Aβ斑块聚集明显减少,p21、IL-6、IL-8表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论RG可能通过调控衰老相关蛋白及IL-6、IL-8表达延缓衰老进程,改善阿尔茨海默病(AD)病理进程。
- 高玉梅王晓玲胡晓霞李若淳江沂齐晓岚周莉
- 关键词：天麻衰老
- LINC00152在胰腺癌中的表达及临床意义被引量：3
- 2019年
- 目的检测LINC00152在胰腺癌多个细胞系及组织中的表达,并探讨其表达水平与胰腺癌患者临床、病理特征之间的关系。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LINC00152在6株人胰腺癌细胞系和1株人胰腺导管上皮细胞中的表达,同时检测在100例胰腺癌组织及相其配对的相邻的非癌组织中LINC00152的表达情况,并分析LINC00152的表达水平与胰腺癌患者临床病理特征及生存预后之间的关系。结果 qRT-PCR显示,相对于人胰腺正常细胞系(HPDE),LINC00152的表达水平在6株人胰腺癌细胞系(PANC-1,MIA PaCa-2,Panc03.27,AsPC-1,SW1990,CFPAC-1)中明显地升高(均P <0.01);在人胰腺癌临床组织样本中,癌组织的LINC00152的表达水平明显高于癌旁组织(P <0.01),胰腺癌中LINC00152表达水平与淋巴结转移及临床分期密切相关(均P <0.05),而与患者的性别、年龄以及患者肿瘤的直径大小无关(均P> 0.05),Kaplan-Meier生存分析结果显示,相对于LINC00152低表达的患者,高表达患者的预后差(P <0.05)。结论 LINC00152的表达量在胰腺癌组织和细胞中异常增高,与胰腺癌的发生发展相关,可能是一个胰腺癌诊断以及治疗的有效靶点。
- 雷珊曾智锐薛燕兰金芝孙远梅陈腾祥
- 关键词：胰腺肿瘤淋巴转移长链非编码RNA预后
- 芥子碱硫氰酸盐对皮肤鳞癌细胞的影响及其机制
- 2021年
- 目的探讨芥子碱硫氰酸盐(sinapine thiocyanate,ST)对皮肤鳞癌A431和Colo-16细胞恶性生物学行为的影响及机制。方法以20μmol·L-1的ST与紫杉醇处理皮肤成纤维细胞,CCK-8比较两者细胞毒性;以0、5、10和20μmol·L-1的ST处理A431和Colo-16细胞,CCK-8、克隆平板、划痕和Transwell实验检测各组细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭;应用分子对接技术明确ST与AKT蛋白的结合;采用Western blot检测各组细胞AKT、p-AKT(S473)、β-catenin、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和PCNA的表达;以DMSO、ST以及ST联合AKT激动剂SC79处理A431和Colo-16细胞,采用CCK-8、克隆平板、划痕和Transwell实验检测各组细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭。结果同浓度的ST毒性比紫杉醇小;ST抑制A431和Colo-16细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭;ST可与AKT稳定结合;ST减少A431和Colo-16细胞中p-AKT(S473)、β-catenin、N-cadherin、Vimentin和PCNA的表达以及增加E-cadherin的表达;SC79可减轻ST的抑制作用。结论ST通过AKT/β-catenin通路抑制皮肤鳞癌A431和Colo-16细胞的恶性生物学行为。
- 苏羽屾曾智锐荣冬芸王叶李丹袁乡石唐姗姗曹煜
- 关键词：皮肤鳞癌芥子碱硫氰酸盐增殖迁移
- 芥子碱硫氰酸盐对肝癌细胞SMMC-7721增殖、迁移和侵袭的影响及机制被引量：4
- 2020年
- 目的探究芥子碱硫氰酸盐(sinapine thiocyanate)对肝癌细胞SMMC-7721增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法采用CCK-8、划痕和Transwell实验,检测不同浓度(0、25、50和100μmol·L^-1)的芥子碱硫氰酸盐对SMMC-7721细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;利用生物信息学和分子对接技术,挖掘蛋白靶点并验证芥子碱硫氰酸盐与蛋白靶点PTGS1和PTGS2的结合能力;Western blot检测芥子碱硫氰酸盐对SMMC-7721细胞中PTGS1、PTGS2、Bcl-2、Bax、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平的影响。结果芥子碱硫氰酸盐明显抑制SMMC-7721细胞的增殖、迁移和侵袭的能力(P<0.05);芥子碱硫氰酸盐有27个蛋白靶点,蛋白靶点富集在氮代谢等4个通路上;其中,PTGS1和PTGS2富集在多个信号通路中,且其活性口袋能与芥子碱硫氰酸盐稳定结合;芥子碱硫氰酸盐明显减少肝癌细胞SMMC-7721中PTGS1、PTGS2、Bcl-2、MMP-2和MMP-9的蛋白表达(P<0.05),增加Bax的蛋白表达(P<0.05)。结论芥子碱硫氰酸盐靶向PTGS1和PTGS2,从而抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖、迁移和侵袭。
- 陈腾祥王婧雅曾智锐雷珊薛燕孙远梅杨宇石兰金芝
- 关键词：肝癌芥子碱硫氰酸盐增殖迁移
- 雷公藤甲素对人结肠癌细胞EKR1/2、Akt、p53及AMPKα磷酸化水平的影响
- 2018年
- 目的:观察雷公藤甲素(Tp)对人结肠癌细胞EKR1/2、Akt、p53及AMPKα等信号通路分子的影响。方法:体外培养人结肠癌SW480细胞,用40 nmol/L Tp刺激24 h,分别于刺激0、24 h时对细胞进行拍照,观察细胞形态,应用Path Scan分别检测细胞内信号通路分子ERK1/2的Thr202/Tyr204位点、Akt的Thr308和Ser473位点,AMPKα的Thr172位点及p53的Ser15位点的磷酸化水平,并通过Western blot验证p53蛋白在人结肠癌细胞SW480,SW620和HCT116细胞中的磷酸化水平。结果:40 nmol/L Tp刺激24 h后,人大肠癌SW480细胞变大、形态不规整、触角变长,细胞表型发生改变;Path Scan结果表明,Tp刺激24 h时,SW480细胞ERK1/2的Thr202/Tyr204位点、Akt的Thr308和Ser473位点及p53的Ser15位点磷酸化水平增高,AMPKα的Thr172磷酸化水平降低;Western blot实验结果显示,Tp刺激24 h时,人结肠癌SW480、SW620和HCT116细胞中p53蛋白的磷酸化水平上调。结论:Tp可能是通过ERK1/2、Akt、p53和AMPKα信号通路影响结肠癌细胞表型改变。
- 郭曼岚漆敏刘蔚雯勾梦壮孙密欣刘亚伟陈腾祥
- 关键词：雷公藤甲素P53ERK1/2SW480细胞
- 亚砷酸钠诱导SH-SY5Y细胞凋亡及硫化氢的干预作用被引量：2
- 2020年
- 目的:探讨亚砷酸钠(NaAsO 2)对SH-SY5Y细胞凋亡的影响,同时观察硫化氢(H 2S)的干预作用。方法:将SH-SY5Y细胞按24 h、48 h各分为对照组、NaAsO 2(20μmol/L)组、NaAsO 2(40μmol/L)组、NaHS(400μmol/L)组、NaHS+NaAsO 2(20μmol/L)组及NaHS+NaAsO 2(40μmol/L)组,采用Hoechst33342/PI双染法、流式细胞术和Western blot检测各组细胞形态、细胞凋亡及相关蛋白改变。结果:荧光显微镜观察发现,与对照组比较,20和40μmol/L NaAsO 2暴露24 h或48 h均剂量依赖性增加细胞凋亡率,20或40μmol/L NaAsO 2仅暴露48 h增加的凋亡率可被NaHS所拮抗(P<0.05),而20或40μmol/L NaAsO 2暴露24 h对凋亡的增长却不被NaHS所拮抗(P>0.05);流式细胞术检测显示,与对照组比较,20、40μmol/L NaAsO 2预处理24或48 h均诱导SH-SY5Y细胞发生凋亡,且呈浓度依赖性效应(P<0.05),20或40μmol/L NaAsO 2仅作用48 h所诱导的凋亡可被NaHS所逆转(P<0.05),而20或40μmol/L NaAsO 2暴露24 h对凋亡的增长却不被NaHS所拮抗(P>0.05);Western blot提示,20或40μmol/L NaAsO 2暴露24 h能够剂量依赖性增加cleaved Caspase-12蛋白表达、且该作用被NaHS所拮抗(P<0.05),NaAsO 2可以降低Caspase-12蛋白表达、但不被NaHS所逆转(P>0.05)。结论:外源性H 2S能抑制NaAsO 2诱导的细胞凋亡,可能与降低激活的Caspase-12蛋白表达有关。
- 潘际刚吴昌学齐晓岚范海琼李成朱卫
- 关键词：硫化氢细胞凋亡亚砷酸钠细胞形态
- 外源性硫化氢对氟诱导损伤SH-SY5Y细胞的作用及机制被引量：2
- 2020年
- 目的:探讨外源性硫化氢(H 2S)对氟诱导损伤SH-SY5Y细胞的作用及其机制。方法:离体培养的SH-SY5Y细胞,分为Control组(不处理)、NaF组(NaF孵育48 h诱导损伤)、NaHS组(NaHS孵育48 h)、NaF联合NaHS组(NaHS预处理30 min后加2 mmol/L NaF孵育48 h);采用台盼蓝拒染法观察各组SH-SY5Y细胞存活率,采用光镜、相差显微镜及透射电镜观察各组SH-SY5Y细胞超微结构,采用流式细胞仪检测各组细胞的活性氧(ROS)水平。结果:Control组和NaF联合NaHS组SH-SY5Y细胞的存活率分别高于NaF组,差异均有统计学意义(P<0.05);NaF组细胞器结构模糊不清、线粒体空泡变性增多,NaF联合NaHS组则形态结构明显得到改善;NaF组细胞ROS水平分别高于Control组和NaF联合NaHS组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:外源性H 2S参与对氟所致神经损伤的保护,可能涉及抗氧化应激机制。
- 潘际刚潘际刚吴昌学齐晓岚朱卫刘宇官志忠
- 关键词：硫化氢氟中毒神经损伤活性氧SH-SY5Y细胞
- MST过表达及亚砷酸钠对SH-SY5Y细胞的影响被引量：2
- 2020年
- 目的:探讨亚砷酸钠(NaAsO 2)、巯基丙酮酸硫转移酶(MST)基因过表达对SH-SY5Y细胞的作用及机制。方法:将空载体转染细胞、MST过表达细胞各分为对照组、NaAsO 2组、TUDCA(内质网应激阻断剂)组、NaAsO 2联合TUDCA组,采用MTT、Western blot和酶活性检测等方法观察细胞活力、Bax、Bcl-2凋亡相关蛋白表达及Caspase-3活性。结果:50μmoL/L NaAsO 2暴露24 h显著降低空转组细胞活力和Bcl-2蛋白水平(P<0.01),增加Bax蛋白表达及Caspase-3活性(P<0.01);TUDCA预处理可以逆转以上变化,Bcl-2的蛋白表达则在MST基因过表达细胞砷暴露后发生显著增加,但可被TUDCA所拮抗(P<0.01)。结论:内质网应激可能参与砷、内源性H 2S对SH-SY5Y细胞损伤的影响。
- 潘际刚吴昌学齐晓岚范海琼李成朱卫
- 关键词：亚砷酸钠细胞活力
- 缺氧诱导Calpain 2表达可促进胰腺癌细胞迁移和侵袭被引量：1
- 2019年
- 目的:探讨缺氧微环境中卡配因即钙蛋白酶(Calpain)1和Calpain 2蛋白表达情况,以及调控Calpain 2蛋白表达对胰腺癌PANC-1细胞迁移和侵袭的影响。方法:通过公共数据库GEPIA(Gene Expression Proling Interactive Analysis)分析Calpain 1和Calpain 2 mRNA在胰腺癌组织中的表达情况,以及它们与患者生存预后的相关性。采用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法分别检测在常氧(21%O2)和缺氧(1%O2)条件下,胰腺癌PANC-1细胞中Calpain 1、Calpain 2 mRNA和蛋白的表达水平。将靶向Calpain 2编码基因CAPN 2的siRNA转染胰腺癌PANC-1细胞,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证CAPN 2基因沉默效果。分别在常氧和缺氧条件下培养Calpain 2低表达组和阴性对照组细胞,然后采用划痕愈合实验和Transwell小室法分别检测各组细胞的迁移和侵袭能力,再采用蛋白质印迹法检测各组细胞中Calpain 2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平,最后用倒置显微镜观察各组细胞的形态学变化。结果:相对于正常胰腺组织,胰腺癌组织中Calpain 1和Calpain 2 mRNA表达水平明显增高(P值均<0.01),并且Calpain 2高表达与胰腺癌患者的不良预后有明显相关性(P=0.013)。相对于常氧条件,缺氧条件下胰腺癌PANC-1细胞中Calpain 1 mRNA和蛋白表达水平变化不明显,而Calpain 2 mRNA和蛋白表达水平明显上调(P值均<0.01)。成功构建Calpain 2低表达的PANC-1细胞株。在常氧条件下,下调Calpain 2表达可明显抑制PANC-1细胞的迁移和侵袭能力(P值均<0.05);缺氧培养可促进PANC-1细胞迁移和侵袭(P值均<0.05);而在缺氧条件下,下调Calpain 2表达可以逆转缺氧培养对PANC-1细胞迁移和侵袭的促进作用(P值均<0.05)。常氧条件下,下调Calpain 2表达的胰腺癌PANC-1细胞中,E-cadherin表达量增多(P <0.05),Vimentin表达量减少(P <0.05),而且PANC-1细胞轮廓变大,部分细胞有凋亡样改变;缺氧条件下,E-cadherin蛋白表
- 曾智锐雷珊张金娟杨宇石薛燕兰金芝孙远梅胡晓霞陈腾祥
- 关键词：细胞低氧上皮-间质转化肿瘤侵润
- 高温对体外唾液链球菌clpP基因表达的影响
- 2018年
- 目的:探讨高温对体外培养的唾液链球菌(S. salivarius) clp P基因表达的影响。方法:取10例人唾液样本在55℃培养,挑选生成的菌落进行分离培养、16S r DNA扩增及DNA序列测定,采用BLAST分析及构建系统发育树,鉴定得到S. salivarius临床株;采用PCR方法对S. salivarius ATCC 13419模式株(阳性对照)和获得的S. salivarius临床株进行clp P基因的片段克隆及序列分析,再用实时荧光定量PCR方法比较S. salivarius在37℃及55℃下培养2 h时的clp P基因相对表达水平。结果:在55℃培养下,10例唾液样本中仅有2例有少量菌落生成,最终经分离鉴定得到2株S. salivarius临床株,分别命名为HS_01和HS_02;利用PCR方法克隆S.salivarius ATCC 13419模式株、HS_01及HS_02菌株的clp P基因片段,经实时荧光定量PCR方法检测显示,3个S. salivarius菌株在55℃条件下clp P基因的相对表达水平高于37℃培养时,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论:高温刺激下获得的S. salivarius临床株的Clp P基因表达水平升高。
- 朱铭慧秦波徐卫华付雪飞胡晓霞
- 关键词：高温DNA序列测定聚合酶链式反应实时荧光定量PCR
